快速检测肝素和肝素酶浓度的方法技术

本发明专利技术属于生物分析检测领域，具体地，涉及快速检测肝素和肝素酶浓度的方法。首先建立A溶液的标准曲线，A为肝素或者肝素酶，当A为肝素时，将银纳米粒子溶液与已知浓度肝素溶液混合反应后，再与苝探针溶液混合；当A为肝素酶时，将肝素酶溶液与已知浓度肝素溶液混合，进行酶解后，再依次与银纳米粒子溶液和苝探针溶液混合反应；测定混合溶液中苝探针激基缔合物和苝探针单体荧光强度的比值，以A溶液的浓度为横坐标，以与A溶液浓度相对应的比值为纵坐标，绘制出线性标准曲线，得到标准曲线的回归方程；将待测A溶液按照上述方法，得到苝探针激基缔合物和苝探针单体荧光强度的比值，将比值代入回归方程，即可得到待测A溶液的浓度。

A method for rapid determination of heparin and heparanase concentration

【技术实现步骤摘要】
快速检测肝素和肝素酶浓度的方法
本专利技术属于生物分析检测领域，具体地，涉及快速检测肝素和肝素酶浓度的方法。
技术介绍
肝素在凝血、细胞生长、脂质代谢及免疫防御等生理过程中起着至关重要的作用，且被广泛应用于血栓栓塞性疾病、心肌梗死、心血管手术、心脏导管检查、体外循环、血液透析等医疗领域。同时，肝素酶作为一种能特异性降解肝素的酶，在肝素结构分析、低分子量制备、人体中残留肝素去除方面有重要应用。因此，对肝素及肝素酶进行准确检测具有非常重要的意义。目前已报道的肝素及肝素酶检测方法很多，例如比色、电化学、离子交换色谱和荧光分析方法等。然而，比色法灵敏度较差，电化学方法易受外部环境影响，离子交换色谱法操作较为繁琐。相比之下，荧光检测方法因其响应快速、操作简单、灵敏度高等优点而备受关注。已建立的荧光检测方法，主要分为两类：荧光恢复/淬灭法和比率荧光法。荧光恢复/淬灭法是基于监测某一特定波长处荧光的恢复或者淬灭，从而实现对目标分析物(肝素及肝素酶)的定量分析检测。2014年，LiuZiping等利用肝素可诱导CuInS2量子点集聚淬灭其荧光的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.快速检测肝素和肝素酶浓度的方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、将银纳米粒子溶液与已知浓度的A溶液混合反应后，再与苝探针溶液混合，得到混合液，混合溶液中，银纳米粒子与苝探针结合，得到苝探针激基缔合物，利用银纳米粒子的金属增强荧光效应增强苝探针激基缔合物荧光；同时，未结合的苝探针单体发射单体荧光；/n所述苝探针的结构为：/n

【技术特征摘要】
1.快速检测肝素和肝素酶浓度的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、将银纳米粒子溶液与已知浓度的A溶液混合反应后，再与苝探针溶液混合，得到混合液，混合溶液中，银纳米粒子与苝探针结合，得到苝探针激基缔合物，利用银纳米粒子的金属增强荧光效应增强苝探针激基缔合物荧光；同时，未结合的苝探针单体发射单体荧光；
所述苝探针的结构为：



所述A为肝素或者肝素酶；当A为肝素时，将银纳米粒子溶液与已知浓度肝素溶液混合反应后，再与苝探针溶液混合；当A为肝素酶时，将肝素酶溶液与已知浓度肝素溶液混合，进行酶解后，再依次与银纳米粒子溶液和苝探针溶液混合反应；
S2、分别测定混合溶液中苝探针激基缔合物和苝探针单体的荧光强度，得到苝探针激基缔合物和苝探针单体荧光强度的比值；
S3、按照S1-S2的方法测定一系列不同已知浓度的A溶液的苝探针激基缔合物和苝探针单体荧光强度的比值，然后以A溶液的浓度为横坐标，以与A溶液浓度相对应的比值为纵坐标，绘制出线性标准曲线，得到标准曲线的回归方程；
S4、将银纳米粒子溶液与待测A溶液混合后，再与苝探针溶液混合，进行反应，分别测定...

【专利技术属性】
技术研发人员：李娟敏，尚利，
申请(专利权)人：西北工业大学，
类型：发明
国别省市：陕西;61