一种骨肉瘤干细胞外泌体提取分离的方法技术

本发明专利技术公开了一种骨肉瘤干细胞外泌体提取分离的方法，包括以下操作步骤：将骨肉瘤干细胞放入至选定的培养基内；对培养收获的骨肉瘤干细胞及培养基进行离心；对获得的骨肉瘤干细胞培养基上清进行低温搅拌，并放入至试管内进行沉淀，沉淀结束后对沉淀产生的上清液进行收集；对收集到的上清液使用细胞滤膜进行过滤，并获得过滤后的滤固体；用磷酸盐缓冲液将所述滤固体进行重悬；将获得的重悬液放入至超速离心机内进行低温超速离心，并获得离心液；对离心液进行沉淀，此时所获得的沉淀体即为骨肉瘤干细胞外泌体。本发明专利技术在运用的过程中，能提高骨肉瘤干细胞外泌体的提取效率，且确保了提取后的外泌体的质量，有利于进行推广应用。

A method of extraction and separation of exosomes from osteosarcoma stem cells

【技术实现步骤摘要】
一种骨肉瘤干细胞外泌体提取分离的方法
本专利技术涉及骨肉瘤干细胞
，尤其涉及一种骨肉瘤干细胞外泌体提取分离的方法。
技术介绍
骨肉瘤干细胞是骨肉瘤启动、发展、转移、复发的根源，且越来越被人关注，已成为肿瘤发生、发展机制研究中的热点，在对骨肉瘤干细胞进行研究的过程中，涉及到骨肉瘤干细胞外泌体的提取，传统用于常规细胞提取外泌体的方法在运用至骨肉瘤干细胞外泌体的提取过程中时，存在着提取效率较低，提取效果较差，且存在提取步骤繁琐、限制条件较多的缺点。为此，我们提出了一种骨肉瘤干细胞外泌体提取分离的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种骨肉瘤干细胞外泌体提取分离的方法。为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：一种骨肉瘤干细胞外泌体提取分离的方法，包括以下操作步骤：S1：获取骨肉瘤干细胞，将骨肉瘤干细胞放入至选定的培养基内，培养24-48小时后进行收获；S2：对培养收获的骨肉瘤干细胞及培养基进行离心，获得骨肉瘤干细胞培养基上清；S3：对步骤本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种骨肉瘤干细胞外泌体提取分离的方法，其特征在于，包括以下操作步骤：/nS1：获取骨肉瘤干细胞，将骨肉瘤干细胞放入至选定的培养基内，培养24-48小时后进行收获；/nS2：对培养收获的骨肉瘤干细胞及培养基进行离心，获得骨肉瘤干细胞培养基上清；/nS3：对步骤S2获得的骨肉瘤干细胞培养基上清进行20-30分钟的低温搅拌，并进一步放入至试管内进行沉淀，沉淀结束后对沉淀产生的上清液进行收集；/nS4：对步骤S3收集到的上清液使用规格为0.20um的细胞滤膜进行过滤，并获得过滤后的滤固体；/nS5：用磷酸盐缓冲液将所述滤固体进行重悬，得到重悬液；/nS6：将步骤S5获得的重悬液放入至超速离心机内进...

【技术特征摘要】
1.一种骨肉瘤干细胞外泌体提取分离的方法，其特征在于，包括以下操作步骤：
S1：获取骨肉瘤干细胞，将骨肉瘤干细胞放入至选定的培养基内，培养24-48小时后进行收获；
S2：对培养收获的骨肉瘤干细胞及培养基进行离心，获得骨肉瘤干细胞培养基上清；
S3：对步骤S2获得的骨肉瘤干细胞培养基上清进行20-30分钟的低温搅拌，并进一步放入至试管内进行沉淀，沉淀结束后对沉淀产生的上清液进行收集；
S4：对步骤S3收集到的上清液使用规格为0.20um的细胞滤膜进行过滤，并获得过滤后的滤固体；
S5：用磷酸盐缓冲液将所述滤固体进行重悬，得到重悬液；
S6：将步骤S5获得的重悬液放入至超速离心机内进行低温超速离心，并获得离心液；
S7：对步骤S6的离心液进行沉淀，并在沉淀后吸除上清液并保留沉淀体，此时所获得的沉淀体即...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕杨帆，曹亚，常献，
申请(专利权)人：中国人民解放军陆军军医大学第二附属医院，
类型：发明
国别省市：重庆;50