川贝母总苷在制备治疗哮喘药物中的用途制造技术

本发明专利技术公开了川贝母总苷在制备治疗哮喘药物中的用途，解决其他单一靶点用药所造成的途径单一、副作用大、产生耐药性等问题，本发明专利技术中的川贝母总苷提取物能提供更安全、有效的治疗，且作用机理多效应、多靶点，可针对临床中的病理特征，对哮喘进行有效的治疗，为寻找抗哮喘药物提供了新方向，具有良好的临床应用前景。

Application of total glycosides of Fritillaria sichuanensis in the preparation of asthma drugs

【技术实现步骤摘要】
川贝母总苷在制备治疗哮喘药物中的用途
本专利技术涉及天然药物的应用，具体涉及川贝母总苷在制备治疗哮喘药物中的用途。
技术介绍
哮喘(asthma)是一种由多种炎性细胞，如嗜酸性粒细胞、肥大细胞和T淋巴细胞等浸润所致的反复发作的慢性气道炎症性疾病，临床上以气道高反应为特征，突出表现为可逆性的气道阻塞和呼吸困难，该疾病呈现高度异质性，其诱因广泛，例如尘螨、花粉或者空气污染等，均可视为哮喘的诱因。尽管过敏反应的发展有着广泛的异质性，但是Ig-E在过敏性哮喘中，对固有和特异性免疫的衔接起着至关重要的作用，并参与哮喘的各个阶段。在哮喘的发病初期，抗原被树突细胞提呈给CD4+T细胞，使其分化为Th2，促进B细胞生成大量的Ig-E抗体，使机体进入过敏状态；随着疾病发展，其病理进程体现为Th2细胞群功能亢进，Th2细胞被募集激活，诱导嗜酸性粒细胞浸润气管，进一步分泌大量的IL-4、IL-5、IL-13等炎症因子，使气道杯状细胞呈现一个高反应的状态，黏附因子增多，加重炎症历程。目前阻断Ig-E的奥马珠单抗，对轻度哮喘患者的治疗研究表明，阻断Ig-E可以减少过敏原吸入后的早期支气管收缩和血液中嗜酸性粒细胞的数量；抗IL-4的单抗药品，可以显著改善大部分患者肺功能和哮喘控制指标，控制哮喘发病进程；以及其他的治疗方式：β受体激动剂、抗胆碱能支气管扩张剂、白三烯调节剂、茶碱和磷脂二酯酶抑制剂、糖皮质激素等。但是这些局部靶点的治疗方式已经不适用于高度异质性的哮喘患者，甚至一部分哮喘患者对糖皮质激素产生了很强的耐药性。而天然药物活性成分毒副作用小、多靶点治疗等优点已成为治疗哮喘、缓解炎症型药物的重要来源。川贝母(FritillariaeCirrhosaeBulbus)是百合科植物卷叶贝母(川贝母)、暗紫贝母、甘肃贝母、梭砂贝母、太白贝母、瓦布贝母的干燥鳞茎。贝母之名，始载于《神农本草经》，列为中品，曰：“贝母。味辛平，主伤寒烦热，淋沥，邪气疝，喉痹乳难，金疮风痉。”性微寒，味苦、甘。能清热化痰，润肺止咳。川贝母在中国的用药史已经超过2000年，主要用于止咳化痰。川贝母止咳化痰的功效在临床使用中，被证实无疑，但是川贝母具体发挥药效的成分未知。川贝母总苷在川贝母中广泛分布，但总苷部位的制备优化及活性研究却鲜有报道。卵清蛋白(OVA)是最经典的哮喘模型致敏剂，OVA小鼠哮喘模型也是至今发展最成熟的动物模型，目前尚未有关川贝母总苷在缓解和治疗哮喘方面的报道。
技术实现思路
专利技术目的：本专利技术的目的在于提供川贝母总苷在制备治疗哮喘药物中的用途，本专利技术公开了川贝母总苷提取物对哮喘具有缓解和治疗的作用。技术方案：川贝母总苷在制备治疗哮喘药物中的用途。所述的药物是治疗呼气气流减少、气喘，并伴有慢性气道炎症的药物；或所述的药物是治疗肺泡结构损伤，支气管壁增厚明显，支气管狭窄的药物。所述川贝母总苷为川贝母总苷或包含川贝母总苷的组合物。所述组合物由川贝母总苷添加药学上可接受的辅料制备成制剂。所述制剂为口服制剂。所述口服制剂为口服液、冲剂、丸剂、片剂、散剂、颗粒剂、汤剂。川贝母总苷是川贝母总苷提取物的主要成分，川贝母总苷提取物中的川贝母总苷含量为55％-70％。川贝母总苷提取物在制备治疗哮喘药物中的用途。所述的川贝母总苷提取物的制备方法，具体包括以下步骤：取川贝母鳞茎粉末，乙醇提取，过滤，将滤液浓缩，用石油醚脱脂，得到水相层，用水饱和正丁醇萃取，挥干溶剂浓缩得到浸膏，用水复溶，作为上样液；量取经乙醇活化好的HPD100大孔树脂，用水洗至无醇味，湿法装柱，加水进行平衡后上样，用水淋洗，乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩得浸膏，用水复溶后冻干。川贝母总苷在制备治疗Ig-E、IL-4、IL-5、IL-13炎症因子分泌增多的药物中的应用。有益效果：本专利技术公开了川贝母总苷缓解哮喘的医药用途，设计采用了至今发展最成熟的OVA哮喘动物模型，选取了最具临床症状的药效指标，经过多次实验条件优化，最终确定70％乙醇提取，石油醚脱脂，水饱和正丁醇萃取，所得浸膏经条件优化后的HPD100大孔树脂富集纯化。本专利技术中，哮喘模型川贝母总苷药物治疗组，Ig-E、IL-4含量显著降低，肺泡、支气管部位炎症浸润情况得到大幅度缓解，嗜酸性粒细胞比例显著下降。因此，川贝母总苷具有明显缓解哮喘的作用。与现有治疗哮喘的药物相比，本专利技术的川贝母总苷更安全有效、温和持久，且作用机理多靶点、多效应，并不会出现单一靶点药物产生强烈耐药性的状况。因此，川贝母总苷在缓解、治疗哮喘方面具备可观的开发和利用价值。附图说明图1三种是大孔树脂的静态吸附性能图；图2四种不同乙醇浓度的洗脱效果图；图3是TSF的制备流程图；图4是OVA模型的造模流程图；图5是TSF对OVA哮喘小鼠肺部病理学的影响；图6是TSF对OVA哮喘小鼠血清中Ig-E含量的影响；图7是TSF对OVA哮喘小鼠肺部IL-4mRNA水平变化的影响；图8是TSF对OVA哮喘小鼠肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数的影响；图9是TSF对OVA哮喘小鼠肺泡灌洗液(BALF)中细胞分类计数的影响。具体实施方式实施例1：川贝母总苷富集提取条件优化1、大孔树脂型号筛选本专利技术比较了AB-8、D101、HPD100四种型号的大孔树脂的静态吸附、解吸性能，以筛选出适合川贝母总苷富集的大孔树脂。取上样溶液(总苷浓度0.47mg/ml)4ml，加入到放置1.0g大孔树脂的锥形瓶中，每种类型树脂平行制备3份，称定重量，密封，置摇床上进行充分震荡12h，使大孔树脂充分吸收。12h之后，称定重量，补足重量，移取上清液，13000rpm，离心5min，采用香草醛-冰醋酸-高氯酸比色法进行制备检测，计算各种树脂对川贝母总苷的比吸附量(mg/g)。将移走吸附12h的上样溶液的大孔树脂用蒸馏水充分洗涤，每次10ml洗涤，洗涤3次，移取洗涤蒸馏水至吸不上液体为止，加入95％乙醇10ml，称定重量，密封，置摇床上进行充分震荡12h，使大孔树脂充分解吸附，12h后，称定重量，补足，取上清液，13000rpm离心5min，采用香草醛-冰醋酸-高氯酸比色法进行制备检测，计算各种树脂对总苷的比解吸量(mg/g)。从图1结果可知，三种大孔树脂的吸附率接近，但是HPD101的解析率明显优于其他2种大孔树脂，综合考虑，HPD100表现最佳性能，因此选择HPD100大孔树脂富集纯化川贝母总苷。2、除杂溶剂和洗脱溶剂的确定取4ml总苷上样溶液(总苷浓度0.48mg/ml)上柱(1.0g树脂装柱)，平行5份，过夜吸附，分别用水、30％、50％、70％和95％乙醇10BV进行洗脱，分别收集各浓度洗脱液，计算各浓度下的解析率％。以乙醇浓度对川贝母总苷解析率作图。从图2结果可知，洗脱水溶液中皂苷类成分基本检测不到，因此选择水作为除杂溶剂。比较30％、50％、70％和95％不本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.川贝母总苷在制备治疗哮喘药物中的用途。/n

【技术特征摘要】
1.川贝母总苷在制备治疗哮喘药物中的用途。


2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于所述的药物是治疗呼气气流减少、气喘，并伴有慢性气道炎症的药物；或所述的药物是治疗肺泡结构损伤，支气管壁增厚明显，支气管狭窄的药物。


3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于所述川贝母总苷为川贝母总苷或包含川贝母总苷的组合物。


4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于所述组合物由川贝母总苷添加药学上可接受的辅料制备成制剂。


5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于所述制剂为口服制剂。


6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于所述口服制剂为口服液、冲剂、丸剂、片剂、散剂、颗粒剂、汤剂。


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【专利技术属性】
技术研发人员：辛贵忠，杨丽，刘丽芳，刘云，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32