一种针对猪流行性腹泻具有免疫原性的融合蛋白及其应用制造技术

技术编号:22969244 阅读:88 留言:0更新日期:2019-12-31 21:25
本发明专利技术公开了一种针对猪流行性腹泻具有免疫原性的融合蛋白及其应用,本发明专利技术的针对猪流行性腹泻病毒具有免疫原性的融合蛋白,为含有猪流行性腹泻病毒的S1D中和表位的融合蛋白,本发明专利技术还进一步公开了一种重组减毒单核细胞增生性李斯特细菌,所述重组减毒单核细胞增生性李斯特细菌为携有克隆了密码子优化的PEDV S1D编码基因的重组DNA质粒。本发明专利技术的融合蛋白或其编码基因或重组减毒单核细胞增生性李斯特细菌可用于制备猪流行性腹泻病毒疫苗。

An immunogenic fusion protein for swine epidemic diarrhea and its application

【技术实现步骤摘要】
一种针对猪流行性腹泻具有免疫原性的融合蛋白及其应用
本专利技术属于基因工程
,尤其涉及一种针对猪流行性腹泻具有免疫原性的融合蛋白及其应用。
技术介绍
猪流行性腹泻(PorcineEpidemicDiarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(PorcineEpidemicDiarrheaVirus,PEDV)引发的猪肠道性传染病。1978年比利时研究人员首次成功分离该病毒,毒株命名为CV777。PEDV主要结构蛋白包括S、N、M和E蛋白,其中,S蛋白由S1和S2两个亚基组成,S1亚基负责识别宿主细胞表面受体,也是诱导中和保护性抗体以及研制亚单位疫苗的重要靶抗原,S1D是S1亚基的中和表位之一;S2亚基负责病毒囊膜与宿主细胞膜的融合。2010年以来,PEDV引发的严重猪腹泻性疾病开始在我国广泛流行,该病毒主要感染新生仔猪,临床表现为剧烈呕吐和腹泻,7日龄内哺乳仔猪的感染死亡率高达70-80%,给我国这一养猪大国的养猪业造成极大经济损失。与经典毒株CV777相比,新的流行毒株已发生变异,特别是S1亚基的变异较大,而PEDV新流行毒株的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种针对猪流行性腹泻具有免疫原性的融合蛋白,为在减毒重组单核细胞增生性李斯特细菌中分泌表达的含有PEDV S1D中和表位的融合蛋白。/n

【技术特征摘要】
1.一种针对猪流行性腹泻具有免疫原性的融合蛋白,为在减毒重组单核细胞增生性李斯特细菌中分泌表达的含有PEDVS1D中和表位的融合蛋白。


2.如权利要求1所述融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白为单核细胞增生性李斯特细菌溶血素蛋白LLO的信号肽和PEDVS1D中和表位及绿色荧光蛋白GFP的融合蛋白,PEDVS1D中和表位连接于溶血素蛋白LLO的信号肽的C端,绿色荧光蛋白GFP连接于PEDVS1D中和表位的C端。


3.如权利要求2所述融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.4所示。


4.如权利要求1-3任一所述融合蛋白,其特征在于,所述减毒重组单核细胞增生性李斯特细菌包含编码PEDVS1D中和表位的多核苷酸,所述编码PEDVS1D中和表位的多核苷酸序列为SEQIDNO.7。


5.一种多核苷酸,其编码权利要求1-4任一所述融合蛋白,所述融合蛋白中编码PEDVS1D中和表位基因序列为SEQIDNO.7。


6.一种载体,其含有权利要求5所述多核苷酸。


7.一种宿主细胞,其被权利要求6所述载体转化。


8.如权利要求7所述宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞为单核细胞增生性李斯特细菌。


9.如权利要求8所述宿主细胞,其特征在于,所述单核细胞增生性李斯特细菌的血清型为1/2a。


10.一种重组减毒单核细胞增生性李斯特细菌,所述重组减毒单核细胞增生性李斯特细菌基因组中含有PEDVS1D中和表位基因,所述PEDVS1D中和表位基因的序列为SEQI...

【专利技术属性】
技术研发人员:王恒安涂光岚桑益旸
申请(专利权)人:上海交通大学
类型:发明
国别省市:上海;31

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