寡核苷酸衍生物或其盐制造技术

本发明专利技术提供寡核苷酸衍生物或其盐等、及其制造方法，所述寡核苷酸衍生物或其盐包含环状寡核苷酸和线状寡核苷酸，其中，环状寡核苷酸和线状寡核苷酸具有彼此互补的碱基序列，环状寡核苷酸与线状寡核苷酸介由该互补的碱基序列的氢键形成复合物。

Oligonucleotide derivatives or salts thereof

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】寡核苷酸衍生物或其盐
本专利技术涉及寡核苷酸衍生物或其盐。具体而言，本专利技术涉及针对生物体内的酶分解提高了耐性的寡核苷酸衍生物或其盐。
技术介绍
短链干扰RNA(smallinterferingRNA，以下为siRNA)参与RNA干扰(RNAinterference，以下为RNAi)，是具有作为用于抑制靶基因表达的引导的功能的RNA(非专利文献1)。siRNA能够经由信使RNA(mRNA)的切割而选择性地抑制(敲低)该mRNA所负责表达的蛋白质的表达，因此被期待应用于医药(非专利文献2)。作为面向siRNA在医药品中的应用的课题，可举出生物体内不稳定性、即容易被核酸酶分解。为了针对由核酸酶导致的分解来提高耐性，专利文献1中公开了使单链进行环状化而得到的核酸或哑铃形核酸。由于在该核酸中没有RNA末端，因此具有不易被核酸酶分解的特征。另外，专利文献2中公开了下述内容：通过将以在细胞中开环的方式设计而成的、具有彼此互补的序列的2个环状核酸一同施予至细胞，从而在细胞内构建siRNA。现有技术文献专利文献专利文献1：日本特开2008-278784号公报专利文献2：日本特开2014-143923号公报非专利文献非专利文献1：Nature，第411卷，第6836期，494-498页(2001年)非专利文献2：NatureReviewsCancer，第11卷，59-67页(2011年)
技术实现思路
专利技术所要解决的课题<br>然而，专利文献1、2中公开的环状核酸中，虽然报道了针对核酸酶的稳定性的提高，但关于基因沉默的信息少，强烈需求具有强敲低活性的经环状化的核酸。本专利技术所要解决的课题在于，提供具有针对核酸酶的耐性、且具有强敲低活性的新型寡核苷酸衍生物。用于解决课题的手段本专利技术包括以下的实施方式。[1]寡核苷酸衍生物或其盐，其包含环状寡核苷酸和线状寡核苷酸，其中，环状寡核苷酸和线状寡核苷酸具有彼此互补的碱基序列，环状寡核苷酸与线状寡核苷酸介由所述互补的碱基序列的氢键形成复合物。[2]如[1]所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，环状寡核苷酸具有10～40个碱基长度。[3]如[1]或[2]所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，环状寡核苷酸包含至少1个硫代磷酸酯键。[4]如[1]～[3]中任一项所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，环状寡核苷酸包含至少1个2’-修饰核苷酸。[4-1]如[4]所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，2’-修饰核苷酸为核糖的2’-OH基被选自由-OR、-R、-R’OR、-SH、-SR、-NH2、-NHR、-NR2、-N3、-CN、-F、-Cl、-Br及-I(R为烷基或芳基，优选为碳原子数1～6的烷基，R’为亚烷基，优选为碳原子数1～6的亚烷基，-NR2的2个R可以相同或不同)组成的组中的取代基取代而得到的2’-修饰核苷酸。[4-2]如[4]所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，2’-修饰核苷酸为核糖的2’-OH基被选自由-F、甲氧基及乙氧基组成的组中的取代基取代而得到的2’-修饰核苷酸。[4-3]如[4]所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，2’-修饰核苷酸为核糖的2’-OH基被选自由2-(甲氧基)乙氧基、3-氨基丙氧基、2-[(N，N-二甲基氨基)氧基]乙氧基、3-(N，N-二甲基氨基)丙氧基、2-[2-(N，N-二甲基氨基)乙氧基]乙氧基、2-(甲基氨基)-2-氧代乙氧基、2-(N-甲基氨基甲酰基)乙氧基及2-氰基乙氧基组成的组中的取代基取代而得到的2’-修饰核苷酸。[5]如[1]～[4-3]中任一项所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，环状寡核苷酸的碱基长度与线状寡核苷酸的碱基长度相同，或比线状寡核苷酸的碱基长度更长。[6]如[1]～[5]中任一项所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，环状寡核苷酸由式1表示。式1：[化学式1](式中，L1及L2表示接头，n1及n2各自独立地表示0～10的整数，M表示包含可由于细胞内的环境而被切割的化学结构的部分，X表示寡核苷酸。)[6-1-1]如[6]所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，环状寡核苷酸具有10～40个碱基长度。[6-1-2]如[6]或[6-1-1]所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，环状寡核苷酸包含至少1个硫代磷酸酯键。[6-1-3]如[6]～[6-1-2]中任一项所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，环状寡核苷酸包含至少1个2’-修饰核苷酸。[6-2-1]如[6]～[6-1-3]中任一项所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，细胞内的环境为存在于细胞内的酶。[6-2-2]如[6]～[6-1-3]中任一项所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，细胞内的环境为细胞内的pH。[6-2-3]如[6]～[6-2-2]中任一项所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，n1及n2各自独立地为0～8的整数。[7]如[6]～[6-2-3]中任一项所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，可由于细胞内的环境而被切割的化学结构为-S-S-、-S-C(O)-或-C(O)-S-。[8]如[6]～[7]中任一项所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，M选自由式3-1～式3-6组成的组。[化学式2](式中，R1及R2各自独立地表示氢原子或C1-C3烷基，或者R1及R2与它们所键合的碳原子连接在一起而形成碳原子数3～6的环，R3及R4各自独立地表示氢原子或C1-C3烷基，或者R3及R4与它们所键合的碳原子连接在一起而形成碳原子数3～6的环，n5～n8各自独立地表示0～10的整数，n9及n10各自独立地表示1～4的整数，Y1～Y4各自独立地表示键、-NR5-、-O-或-S-，R5表示氢原子、C1-C3烷基或C2-C4烷酰基。)[化学式3](式中，R1’及R2’各自独立地表示氢原子或C1-C3烷基，或者R1’及R2’与它们所键合的碳原子连接在一起而形成碳原子数3～6的环，R3’及R4’各自独立地表示氢原子或C1-C3烷基，或者R3’及R4’与它们所键合的碳原子连接在一起而形成碳原子数3～6的环，R5’及R6’按所键合的碳原子各自独立地为氢原子或C1-C3烷基，n5’及n6’各自独立地表示1～10的整数。)[8-1-1]如[8]所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，M为式3-1。[8-1-2]如[8-1-1]所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，R1～R4各自独立地为氢原子或C1-C3烷基。[8-1-3]如[8-1-1]或[8-1-2]所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，Y本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.寡核苷酸衍生物或其盐，其包含环状寡核苷酸和线状寡核苷酸，其中，/n环状寡核苷酸和线状寡核苷酸具有彼此互补的碱基序列，环状寡核苷酸与线状寡核苷酸介由所述互补的碱基序列的氢键形成复合物。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170428 JP 2017-0906131.寡核苷酸衍生物或其盐，其包含环状寡核苷酸和线状寡核苷酸，其中，
环状寡核苷酸和线状寡核苷酸具有彼此互补的碱基序列，环状寡核苷酸与线状寡核苷酸介由所述互补的碱基序列的氢键形成复合物。


2.如权利要求1所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，环状寡核苷酸具有10～40个碱基长度。


3.如权利要求1或权利要求2所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，环状寡核苷酸包含至少1个硫代磷酸酯键。


4.如权利要求1～3中任一项所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，环状寡核苷酸包含至少1个2’-修饰核苷酸。


5.如权利要求1～4中任一项所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，环状寡核苷酸的碱基长度与线状寡核苷酸的碱基长度相同，或比线状寡核苷酸的碱基长度更长。


6.如权利要求1～5中任一项所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，环状寡核苷酸由式1表示，
式1：
[化学式1]



式中，
L1及L2表示接头，
n1及n2各自独立地表示0～10的整数，
M表示包含可由于细胞内的环境而被切割的化学结构的部分，
X表示寡核苷酸。


7.如权利要求6所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，可由于细胞内的环境而被切割的化学结构为-S-S-、-S-C(O)-或-C(O)-S-。


8.如权利要求6或7所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，M选自由式3-1～式3-6组成的组，
[化学式2]



式中，
R1及R2各自独立地表示氢原子或C1-C3烷基，或者R1及R2与它们所键合的碳原子连接在一起而形成碳原子数3～6的环，
R3及R4各自独立地表示氢原子或C1-C3烷基，或者R3及R4与它们所键合的碳原子连接在一起而形成碳原子数3～6的环，
n5～n8各自独立地表示0～10的整数，
n9及n10各自独立地表示1～4的整数，
Y1～Y4各自独立地表示键、-NR5-、-O-或-S-，
R5表示氢原子、C1-C3烷基或C2-C4烷酰基；
[化学式3]



式中，
R1’及R2’各自独立地表示氢原子或C1-C3烷基，或者R1’及R2’与它们所键合的碳原子连接在一起而形成碳原子数3～6的环，
R3’及R4’各自独立地表示氢原子或C1-C3烷基，或者R3’及R4’与它们所键合的碳原子连接在一起而形成碳原子数3～6的环，
R5’及R6’按所键合的碳原子各自独立地为氢原子或C1-C3烷基，
n5’及n6’各自独立地表示1～10的整数。


9.如权利要求6～8中任一项所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其具有至少1种靶向化合物。


10.如权利要求9所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，靶向化合物与L1及L2中的至少一者结合。


11.如权利要求9或权利要求10所述的寡核苷酸衍生物或其盐，其中，靶向化合物选自由胆固醇、生育酚、二十二碳六烯酸、肉豆蔻酸、棕榈酸及N-乙酰基-D-半乳糖胺组成的组。


12.医药组合物，其包含权利要求1～11中任一项所述的寡核苷酸衍生物或其盐。


13.如权利要求12所述的医药组合物，所述医药组合物被静脉内施予或皮下施予。


14.疾病的治疗或预防方法，所述方法包括将权利要求1～11中任一项所述的寡核苷酸衍生物或其盐、或者权利要求12或...

【专利技术属性】
技术研发人员：山本润一郎，筱原史一，春元俊正，本间正一，萩原健司，
申请(专利权)人：协和麒麟株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP