血癌治疗剂制造技术

本发明专利技术公开了一种寡核苷酸‑修饰的核酸，其包含至少一种1‑β‑D‑呋喃糖基胞嘧啶胞嘧啶作为具有治疗功效的修饰的核酸和鸟苷。更具体地，合成了包含至少一种具有治疗效果并且富含鸟苷(G)的修饰的核酸(N)的新型寡核苷酸‑修饰的核酸，并且该新型寡核苷酸‑修饰的核酸对确定了血癌细胞和耐药性血癌细胞具有优异的凋亡活性这一事实。基于此，提供了一种预防、改善或治疗血癌的组合物，其包含新型寡核苷酸‑修饰的核酸和新型寡核苷酸‑修饰的核酸或其药学上可接受的盐作为活性成分。

Blood cancer agent

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】血癌治疗剂
本专利技术涉及用于预防、改善或治疗血癌的组合物，其包含具有治疗效果的具有至少一种1-β-D-呋喃型阿拉伯糖基胞嘧啶作为修饰的核酸的新型寡核苷酸-修饰的核酸或其药学上可接受的盐作为有效成分。
技术介绍
血液(血液学)癌症是指其中各种血细胞转化为癌细胞的癌症，以及攻击血液，骨髓和/或淋巴系统的癌症类型。这类癌症包括白血病，淋巴瘤和多发性骨髓瘤。白血病是血癌，其中从产生血液的造血干细胞转化的癌细胞引起白血病细胞的过度产生，但是阻止正常血细胞的正常产生，导致感染，贫血，出血等。淋巴瘤是发生在淋巴系统中的癌症，包括非霍奇金淋巴瘤和霍奇金淋巴瘤。多发性骨髓瘤是由浆细胞的异常分化和增殖引起的血癌，浆细胞是血液中的一种白细胞。更具体地，血癌选自：非霍奇金淋巴瘤，霍奇金淋巴瘤，多发性骨髓瘤，白血病，淋巴瘤，骨髓增生异常综合征，急性淋巴细胞白血病，急性髓性白血病，慢性淋巴细胞性白血病，慢性髓性白血病，单发性骨髓瘤和再生障碍性疾病贫血。每年，新确诊的所有癌症病例中，白血病，霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤和骨髓瘤的新病例几乎占10％。在老龄化社会中，患有血癌的老年人数量正在增加，但是其存活率很低。尤其是65岁或65岁以上的患者的存活率仅为9.4％，而80岁或80岁以上的患者的存活率则低至0％(Blood，2012，120；1165-1174)。血液(血液)癌症是由血液和淋巴系统中产生的突变细胞转变为癌细胞而引起的疾病，而突变细胞则遍及人体，大约有70种类型的血癌。因此，被诊断患有血癌的患者首先接受缓解诱导化疗，以从体内清除所有免疫细胞，以杀死突变的异常细胞。此后，进行巩固化学疗法，包括仅向异常细胞中注入有毒化学物质。缓解诱导化学疗法是通过高剂量的高细胞毒性抗癌药物的联合施用来进行的，这种药物具有很高的毒性和不良作用，因此不适用于老年患者。这就是为什么老年血癌患者的生存能力很低的原因(Blood，2010，116：5818-5823)。另外，对血癌没有治疗效果，因为即使对大剂量缓解诱导化疗也无反应，或者由于五年之内的高耐药率和高复发率，与血癌相关的医疗需求仍未得到满足。当前，已经开发出使用抗体和激酶抑制剂的靶疗法，但是对血癌的治疗仍然在很大程度上取决于化学疗法和放射疗法(TheNewEnglandJournalofMedicine，2014，371：1005-1015)。用作血癌化学治疗剂的抗癌药是具有相当毒性的细胞毒性抗癌药，由于生物利用度低和难以将靶标传递至癌细胞而以非常高的剂量施用。这对患者造成严重的副作用，从而使治疗困难。因此，需要具有更少毒性和有效治疗功效的新型治疗剂。已知富含鸟苷的寡核苷酸对多种癌细胞具有抑制细胞生长的作用，并通过与细胞中的特定蛋白(例如对细胞生长和死亡特异性寡核苷酸重要的蛋白，诸如eEF1A，JNK，Ki-ras，核仁蛋白，stat3，端粒酶和拓扑异构酶蛋白)(当使用这些蛋白处理癌细胞时)结合来调节细胞周期，这些蛋白在癌细胞中的表达要高于正常细胞(ChristopherR.Iresonetal.Molecularcancertherapy,2006,2957-2962；NaijieJingetal.Cancerresearch,2004,6603-6609；ChristopheMarchandetal.TheJournalofBiologicalChemistry,2002,8906-8911)。这些富含鸟苷的寡核苷酸除了与胞嘧啶的三氢键合外，还具有特殊的结构特征。富含鸟苷的寡核苷酸可通过分子内键合或分子间键合而具有四链结构。不是通过腺苷和硫胺素之间以及鸟苷和胞苷之间的氢键形成双螺旋结构，而是将四个鸟苷在一个平面上定位以形成Hoogsteen型氢键，从而构成一个G四联体。2个或多个这样的G-四链体连续定位以形成四螺旋结构。通常，由于寡核苷酸在血液中的低稳定性和低细胞渗透性，将寡核苷酸开发成药物存在困难。然而，由于其结构特征，已知构成这种G-四链体的寡核苷酸具有相对较高的血液稳定性和细胞渗透性。如美国专利号7,314,926和美国专利公开号2007-105805中所述，已知构成这种G-四链体的寡核苷酸与在癌细胞表面上高表达的特定蛋白质结合，然后通过内吞作用渗透到癌细胞中，并与参与细胞死亡的蛋白质结合以抑制细胞生长。据报道，此类寡核苷酸由于细胞抑制作用而不是细胞毒性作用而诱导凋亡(PaulaJ.Batesetal.TheJournalofBiologicalChemistry,1999,26369-26377；Brunaetal.FEBSjournal,2006,1350-1361)。另外，除了抑制癌细胞生长的作用外，已知构成G-四链体的寡核苷酸具有各种体内功能和调节功能，例如，美国专利号5,567,604公开了构成G-四链体的寡核苷酸具有抗病毒性，美国专利号6,994,959公开了构成G-四链体的寡核苷酸具有免疫调节活性，及美国专利公开号2007-105805公开了构成G-四链体的寡核苷酸对亨廷顿氏病具有治疗作用(CherylA.Stoddartetal.AntimicrobialAgentsandChemotherapy,1998,2113-2115；MichaelSkogenetal.BMCNeuroscience,2006,7:65)。构成G-四链体的此类寡核苷酸由于细胞抑制作用而诱导凋亡，因此凋亡率相对较高。因此，难以将寡核苷酸与高毒性化学治疗剂组合施用(PaulaJ.Batesetal.ExperimentalandMolecularPathology,2009,151-164；ChristopherR.Iresonetal.MolecularCancerTherapy,2006,2957-2962)。韩国专利第10-0998365号公开了通过将用于处理而提供凋亡作用的修饰的核酸引入形成G-四链体的寡核苷酸中来改善凋亡作用的例。但是，该专利既没有公开根据本专利技术的寡核苷酸-修饰的核酸，也没有公开其对血癌的治疗作用以及对耐药性血癌细胞的凋亡作用。【现有技术】【专利文件】韩国专利第10-0998365号美国专利第7,314,926号美国专利公开第2007-105805号美国专利第US5,567,604号美国专利第6,994,959号美国专利公开第2007-105805号【非专利文件】非专利文献1：ChristopherR.Iresonetal.MolecularCancerTherapy,2006,2957-2962；NaijieJingetal.CancerResearch,2004,6603-6609；ChristopheMarchandetal.TheJournalofBiologicalChemistry,2002,8906-8911。非专利文献2：PaulaJ.Batesetal.TheJournalofBiologicalChemistry本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.寡核苷酸-修饰的核酸，其包含由以下式1表示的化合物以形成G-四链体结构：/n[式1]/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171201 KR 10-2017-0164409;20181129 KR 10-2018-011.寡核苷酸-修饰的核酸，其包含由以下式1表示的化合物以形成G-四链体结构：
[式1]



其中
R1是氢或另一核酸的磷酸部分的磷原子；且
R2是氢或另一核酸的磷酸部分的磷原子。


2.权利要求1的寡核苷酸-修饰的核酸，其中所述化合物由以下式2表示：
[式2]





3.权利要求2的寡核苷酸-修饰的核酸，其中所述寡核苷酸-修饰的核酸由以下序列表示：
GaTbNc，
其中
G是鸟苷或鸟苷衍生物；
T是胸腺嘧啶或胸腺嘧啶衍生物；
N是作为修饰的核酸的1-β-D-呋喃型阿拉伯糖基胞嘧啶；
G，T和N通过置换随机排列；并且
a是选自1～30的整数，
b是选自0～30的整数，且
c是选自1～30的整数，
条件是a，b和c的总和不超过60。


4.权利要求3的寡核苷酸-修饰的核酸，其中所述寡核苷酸-修饰的核酸由以下序列表示：
序列1：GGTGGTGGTTNTGGTGGTGG；
序列2：GGTGGTGGTNNTGGTGGTGG；
序列3：NGGTGGTGGTTGTGGTGGTGG；或
序列4：NNGGTGGTGGTTGTGGTGGTGG；
其中
G是鸟苷或鸟苷衍生物；
T是胸腺嘧啶或胸腺...

【专利技术属性】
技术研发人员：文圣焕，李秀珍，池柳美，申熙钟，奇旻孝，朴溶彬，严智贤，
申请(专利权)人：阿普塔生物治疗公司，三进制药株式会社，
类型：发明
国别省市：韩国;KR