The invention relates to the technical field of preparation of deacetylated chitosan derivatives, in particular to a preparation method of low molecular weight carboxymethyl deacetylated chitosan. Chitosan enzyme produced by Bacillus sp. 10066 was used to prepare low-molecular-weight deacetylated chitosan, and then low-molecular-weight carboxymethyl deacetylated chitosan was prepared by derivatization of low-molecular-weight deacetylated chitosan. The invention provides a preparation method of low molecular weight carboxymethyl deacetylated chitosan polysaccharide.
【技术实现步骤摘要】
一种酶法制备低分子量羧甲基脱乙酰壳多糖的方法
本专利技术涉及脱乙酰壳多糖衍生物的制备
，具体涉及一种低分子量羧甲基脱乙酰壳多糖的制备方法。
技术介绍
脱乙酰壳多糖，又名壳聚糖，是壳多糖脱乙酰基的产物，是天然的阳离子碱性多糖，具有良好的生物相容性、保湿性和成膜性，具有很好的抗菌和抑菌性，理论上讲具有广阔的应用前景，但由于其只能溶于稀酸中，限制了它的应用。羧甲基脱乙酰壳多糖是脱乙酰壳多糖改性产物，不仅大大增加了脱乙酰壳多糖的水溶性，还保持了原有的良好性能。作为非激素类生物活性添加剂，其安全性高，具有调节免疫力、抗炎、促进伤口愈合、保湿吸湿、抑菌等功效，目前已广泛应用于医疗、化妆品等领域。目前市场上的羧甲基脱乙酰壳多糖多为高分子量的羧甲基脱乙酰壳多糖（分子量通常大于100KDa），其溶解速度慢，溶解度低，溶解后有少量不溶物（水不溶物通常0.5~1%之间），影响溶液的澄清度（透光率通常低于80%）。另外，产品在使用过程中对终端产品的pH要求比较高，适用范围窄。因此，影响了它在很多终端产品中的应用。而低分子量羧甲基脱乙酰壳多糖（分子量通常小于10000Da）具有溶解度高、溶解速度快的优点，且抑菌和保湿效果更好。文献报道的制备低分子量羧甲基脱乙酰壳多糖的方法通常为双氧水氧化降解高分子量羧甲基脱乙酰壳多糖，但是该法为自由基降解，具有反应进程过快不易控制，氧化副产物多等缺点。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种低分子量羧甲基脱乙酰壳多糖的制备方法，所得低分子量羧甲基脱乙酰壳多...
【技术保护点】
1.微生物菌株芽孢杆菌 10066所产壳聚糖酶在制备低分子量羧甲基脱乙酰壳多糖方面的应用。/n
【技术特征摘要】
1.微生物菌株芽孢杆菌10066所产壳聚糖酶在制备低分子量羧甲基脱乙酰壳多糖方面的应用。
2.一种低分子量羧甲基脱乙酰壳多糖的制备方法，其特征在于，采用芽孢杆菌（Bacillussp.）10066所产生的壳聚糖酶制备低分子量脱乙酰壳多糖，再对低分子量脱乙酰壳多糖衍生化制备低分子量羧甲基脱乙酰壳多糖。
3.根据权利要求2所述低分子量羧甲基脱乙酰壳多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：将脱乙酰壳多糖粉末与纯化水按质量比为1:12-20进行混合搅拌，然后加入等摩尔数的酸进行溶解，完全溶解后加入适量采用芽孢杆菌（Bacillussp.）10066所产生的壳聚糖酶在40~50℃下进行酶解；
步骤2：酶解结束后，用截留分子量为10kDa~20kDa的超滤膜过滤，滤过液再用200Da~300Da的纳滤膜浓缩分离，加入体积为所得浓缩液体积2~3倍的95%乙醇，沉淀，抽滤，保留固体；
步骤3：步骤2所得固体产物用浓度大于90%的乙醇浸泡2小时，按步骤2所得固体产物：氢氧化钠的质量比为1:1.2-1.5加入氢氧化钠；按步骤2所得固体产物：氯乙酸的质量比为1:1-3加入氯乙酸，在40~65℃下进行衍生化改性；反应结束后，抽滤，保留固体；
步骤4：对步骤3所得固体，用纯化水搅拌溶解，产物完全溶解后，过滤去除不溶物，向滤液中加入无水乙醇进行醇沉，抽滤，所得固体用80%-9...
【专利技术属性】
技术研发人员：邵先祥，李广生，翟天龙，王国蕊，曲欣欣，门晋名，
申请(专利权)人：威海迪素制药有限公司，迪沙药业集团有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37
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