鼠李糖乳杆菌CCFM1060、其发酵食品及菌剂制备方法技术

本发明专利技术公开了鼠李糖乳杆菌CCFM1060、其发酵食品及菌剂制备方法，显著降低高脂高胆固醇饮食诱导的Proteus属的丰度升高，减少尿路堵塞、肠道细菌迁移以及肠炎等疾病发生；显著改善NAFLD患者的脂质代谢紊乱；显著改善NAFLD小鼠的胰岛素抵抗；能够回调血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶的升高；显著降低血清中低密度脂蛋白胆固醇的浓度，减少心血管疾病的风险；能够显著提高NAFLD患者肝脏中的SOD水平；能够显著改善肝脏炎症；能够显著改善NAFLD患者肝脏组织损伤；能够显著改善脂肪肝细胞的Nrf2基因的表达；体外吸附全氟辛酸的能力较强。

Lactobacillus rhamnosus ccfm1060, its fermented food and its preparation method

The invention discloses Lactobacillus rhamnosus ccfm1060, its fermented food and preparation method of bacterial agent, which can significantly reduce the increase of Proteus induced by high-fat and high cholesterol diet, reduce the occurrence of diseases such as urinary tract blockage, intestinal bacterial migration and enteritis, significantly improve the lipid metabolism disorder of NAFLD patients, significantly improve the insulin resistance of NAFLD mice, and can reduce the glutamic pyruvic acid conversion in serum The increase of ammonia enzyme and glutamic oxaloacetylase, the decrease of serum LDL-C concentration and the risk of cardiovascular disease, the improvement of liver SOD level, the improvement of liver inflammation, the improvement of liver tissue damage, the improvement of Nrf2 gene expression in fatty liver cells, the absorption of PFOA in vitro Strong ability.

【技术实现步骤摘要】
鼠李糖乳杆菌CCFM1060、其发酵食品及菌剂制备方法
本专利技术属于功能性微生物
，具体涉及鼠李糖乳杆菌CCFM1060、其发酵食品及菌剂制备方法。
技术介绍
近年来，经济的发展导致我国人民生活方式的改变、活动量减少，肥胖的比例明显增加，糖尿病和代谢综合征(MetabolicSyndrome)得患病率大幅度增高。国际糖尿病联合会(IDF)表示，2017年，全球有4.25亿年龄大于19岁的人患有糖尿病，如果维持这种趋势，约30年后，糖尿病患者人数将高达6.93亿人。因此，控制糖尿病已经成为迫在眉睫的事情。二型糖尿病是以空腹血糖升高、高密度脂蛋白胆固醇降低和甘油三酯升高、胰岛素抵抗等表现同时存在，以糖代谢、脂代谢和蛋白质代谢异常为病理改变基础的多种危险因素聚集，促发动脉粥样硬化等各种心脑血管疾病发生发展的临床综合征。由于二型糖尿病是多种代谢成分异常聚集的病理状态，其集簇发生与胰岛素抵抗有关，目前已成为心血管疾病和肝脏疾病研究领域共同关注的热点。此外，二型糖尿病均伴随着肠道微生态的紊乱，同时也与抑郁、焦虑等精神性疾病紧密相关。另外有研究表明，职业暴露于PFOA的工人的Ⅱ型糖尿病死亡风险增加，因此日常生活中的PFOA暴露，是人类Ⅱ型糖尿病发病的潜在风险。目前针对二型糖尿病的药物治疗多为围绕缓解胰岛素分泌不足和胰岛素抵抗两方面，包括减轻胰岛素抵抗的二甲双胍、噻唑烷二酮类；良好控制血糖的磺脲类、罗格列酮等。这些药物均有一定的治疗作用，但随着病情加重，用药量增大、药物间相互作用、药物毒副作用等也显著增加，导致消化道出现不良反应，并表现出一定的肝肾毒性，如长期服用二甲双胍会引起刺激一些患者的胃肠道造成不适并且可能会影响患者对维生素B12的吸收，罗格列酮会引起肝功能损伤及水肿等。非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholicfattyliverdisease,NAFLD)，为肝细胞中脂肪过度堆积而引起的脂肪变性，是一种肝脏代谢紊乱的症状，未加干预可逐渐演化为非酒精性脂肪型肝炎(NASH)进而恶化为死亡率极高的肝纤维化、肝硬化、肝癌。近年来，随着生活水平的提高，越来越多的高脂肪、高能量饮食摆上餐桌，而人们的运动量却并未随之增加，从而使得以非酒精性脂肪性肝病为代表的代谢综合征的发生率逐年升高。由于其病理机制不完善，并无专门针对NAFLD的药物在市面上出售，治疗方式只能从饮食及生活方式上进行改善，同时辅以降低血脂或血糖的药物以达到更好的效果。有研究表明，职业暴露于PFOA的工人的因脂肪肝死亡风险增加，因此日常生活中的PFOA暴露，是人类肝脏疾病发病的潜在风险。
技术实现思路
本部分的目的在于概述本专利技术的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和专利技术名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和专利技术名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本专利技术的范围。鉴于上述的技术缺陷，提出了本专利技术。因此，作为本专利技术其中一个方面，本专利技术克服现有技术中存在的不足，提供鼠李糖乳杆菌CCFM1060，保藏编号为GDMCCNo：60705。作为本专利技术的另一个方面，本专利技术克服现有技术中存在的不足，提供制备鼠李糖乳杆菌CCFM1060菌剂的方法。为解决上述技术问题，本专利技术提供了如下技术方案：制备鼠李糖乳杆菌CCFM1060菌剂的方法，其包括，菌株培养基的制备；菌株保护剂的制备；接种培养、冻干。作为本专利技术所述的制备鼠李糖乳杆菌CCFM1060菌剂的方法的一种优选方案：所述菌株培养基，为改良MRS培养基，其配方为胰蛋白胨10g、牛肉浸膏10g、酵母粉5g、葡萄糖20g、醋酸钠5g、柠檬酸氢二铵2g、磷酸氢二钾2g、七水硫酸镁0.5g、吐温-801mL、一水合硫酸锰0.25g、半胱氨酸盐酸盐0.5g，水1000mL；调整其pH为6.5±0.2。作为本专利技术所述的制备鼠李糖乳杆菌CCFM1060菌剂的方法的一种优选方案：所述菌株保护剂，其配方为100g/L～150g/L脱脂奶粉、100g/L～150g/L麦芽糊精、140g/L～160g/L海藻糖、余量为水，冻干，得到冻干保护剂。作为本专利技术所述的制备鼠李糖乳杆菌CCFM1060菌剂的方法的一种优选方案：所述菌株保护剂，其配方为120g/L脱脂奶粉、120g/L麦芽糊精、150g/L海藻糖、余量为水，冻干，得到冻干保护剂。作为本专利技术所述的制备鼠李糖乳杆菌CCFM1060菌剂的方法的一种优选方案：所述接种培养、冻干，包括，鼠李糖乳杆菌CCFM1060以2％的接种量接种到在119～123℃条件下灭菌15～25min后的所述菌株培养基中，在温度35～39℃厌氧条件下培养24～48h，用pH为6.8～7.2磷酸盐缓冲液清洗2～4次，用所述菌株保护剂重悬，使菌浓达到1010CFU/mL；接着，让该菌株重悬液在温度37℃厌氧条件下预培养50～70min，再在-15～-20℃预冻8～14h，之后真空冷冻干燥。作为本专利技术所述的制备鼠李糖乳杆菌CCFM1060菌剂的方法的一种优选方案：鼠李糖乳杆菌CCFM1060以2％的接种量接种到在121℃条件下灭菌20min后的培养基中，在温度37℃厌氧条件下培养24h，用pH为6.8磷酸盐缓冲液清洗2～4次，用所述的保护剂重悬，使菌浓达到1010CFU/mL；接着，让该悬浮液在温度37℃厌氧条件下预培养60min，再在-15℃预冻12h，之后真空冷冻干燥。作为本专利技术的另一个方面，本专利技术克服现有技术中存在的不足，提供一种发酵食品。为解决上述技术问题，本专利技术提供了如下技术方案：一种发酵食品，其使用所述的鼠李糖乳杆菌CCFM1060菌剂进行发酵，所述菌剂含有大于106CFU/g的活性鼠李糖乳杆菌CCFM1060。作为本专利技术所述的发酵食品的一种优选方案：所述发酵食品包括乳制品、豆制品与果蔬制品。作为本专利技术所述的发酵食品的一种优选方案：所述发酵食品，包括黄瓜梨汁乳酸菌饮料，其制备方法为，将梨榨汁得到梨汁，将黄瓜切块，放入90℃的热水中热烫30s，打浆，过滤，得到黄瓜汁；将梨汁、黄瓜汁与脱脂乳粉以5：4：1的质量比混合，得到黄瓜汁梨汁混合乳液，均质后加入5％的木糖醇，分装，115℃灭菌20min，冷却至室温后加入所述鼠李糖乳杆菌CCFM1060菌剂以107CFU/mL接种到所述黄瓜汁梨汁混合乳液，37℃恒温培养箱中发酵16h。本专利技术的有益效果：本专利技术筛选的鼠李糖乳杆菌CCFM1060，对模拟胃肠液具有较好的耐受能力；显著降低高脂高胆固醇饮食诱导的Proteus属的丰度升高，减少尿路堵塞、肠道细菌迁移以及肠炎等疾病发生；显著改善NAFLD患者的脂质代谢紊乱；显著改善NAFLD小鼠的胰岛素抵抗；能够回调血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的升高；显著降低血清中低密度脂蛋白胆固醇的浓度，减少心血管疾病的风险；能够显著提高NAFLD患者肝脏中的SOD水平；能够显著改善肝脏炎症；能够显著改善NAFLD患者肝脏组织损伤；能够显著本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.鼠李糖乳杆菌CCFM1060，保藏编号为GDMCC No：60705。/n

【技术特征摘要】
1.鼠李糖乳杆菌CCFM1060，保藏编号为GDMCCNo：60705。


2.制备鼠李糖乳杆菌CCFM1060菌剂的方法，其特征在于：包括，
菌株培养基的制备；
菌株保护剂的制备；
接种培养、冻干。


3.如权利要求2所述的制备鼠李糖乳杆菌CCFM1060菌剂的方法，其特征在于：所述菌株培养基，为改良MRS培养基，其配方为胰蛋白胨10g、牛肉浸膏10g、酵母粉5g、葡萄糖20g、醋酸钠5g、柠檬酸氢二铵2g、磷酸氢二钾2g、七水硫酸镁0.5g、吐温-801mL、一水合硫酸锰0.25g、半胱氨酸盐酸盐0.5g，水1000mL；调整其pH为6.5±0.2。


4.如权利要求2或3所述的制备鼠李糖乳杆菌CCFM1060菌剂的方法，其特征在于：所述菌株保护剂，其配方为100g/L～150g/L脱脂奶粉、100g/L～150g/L麦芽糊精、140g/L～160g/L海藻糖、余量为水，冻干，得到冻干保护剂。


5.如权利要求4所述的制备鼠李糖乳杆菌CCFM1060菌剂的方法，其特征在于：所述菌株保护剂，其配方为120g/L脱脂奶粉、120g/L麦芽糊精、150g/L海藻糖、余量为水，冻干，得到冻干保护剂。


6.如权利要求2所述的制备鼠李糖乳杆菌CCFM1060菌剂的方法，其特征在于：所述接种培养、冻干，包括，鼠李糖乳杆菌CCFM1060以2％的接种量接种到在119～123℃条件下灭菌15～25min后的所述菌株培养基中，在温度35～39℃厌氧条件下培养24～48h，用...

【专利技术属性】
技术研发人员：王刚，陈卫，焦婷，赵建新，张灏，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32