本发明专利技术属于微生物的开发和应用领域，具体公开了含有甲基营养型芽孢杆菌的复合菌剂及在制备水产动物疾病的药物中的应用。所述的复合菌剂包括：甲基营养型芽孢杆菌YFI‑1、地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌。本发明专利技术提供的复合菌剂对水产动物无致病性，对水产病原菌：维氏气单胞菌、嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、爱德华氏菌、霉实假单胞菌、无乳链球菌具有良好的抑制作用。该复合菌剂对水产动物细菌性疾病起到较好的防治作用，因此具有良好的应用前景。
Compound fungicide containing methyl nutritious bacillus and its application in the preparation of aquatic animal diseases
The invention belongs to the field of development and application of microorganisms, in particular to a compound bacterial agent containing methyl nutritious bacillus and its application in the preparation of aquatic animal diseases. The compound bacterial agent comprises: methyl nutritious Bacillus yfi \u2011 1, Bacillus licheniformis and Bacillus subtilis. The compound bactericide provided by the invention has no pathogenicity to aquatic animals, and has good inhibitory effect on Aquatic Pathogenic Bacteria: Aeromonas westermani, Aeromonas hydrophila, Aeromonas temperate, Edwardsiella, Pseudomonas mycoides and Streptococcus lactis. The compound fungicide has a good control effect on the bacterial diseases of aquatic animals, so it has a good application prospect.
【技术实现步骤摘要】
含有甲基营养型芽孢杆菌的复合菌剂及在制备水产动物疾病的药物中的应用
本专利技术属于微生物的开发和应用领域，具体涉及含有甲基营养型芽孢杆菌的复合菌剂及在制备水产动物疾病的药物中的应用。技术背景中国是世界上最大的水产品生产国和消费国，随着养殖高度集约化，水生态环境恶化日益突出，病害濒发，据统计，每年我国因病害造成损失达150亿元。而在水产养殖过程中当前，维氏气单胞菌和嗜水气单胞菌能够导致多种养殖动物爆发细菌性疾病，对养殖也造成巨大损失。目前，药物仍然是渔业生产中控制病害发生最重要的手段。其原料药主要是移植农药、畜禽兽药、医药和少量化工原料等，也成为影响水产品安全和环境安全最直接的因素之一。因长期、超剂量使用，致使病原产生耐药性，同时破坏和干扰了肠道正常菌群和养殖微生态环境，加大了水产养殖病害防治的难度。微生态制剂是通过加强肠道微生物区系的屏障作用或通过增进非特异性免疫功能，维持宿主微生态平衡，减少疾病的发生，同时，兼有提高饲料利用率、改善产品品质、优化养殖生态环境作用，因绿色环保、无毒副作用、无残留污染、不产生抗体、无记忆性、作用范围广等优点成为抗生素最有潜力的替代品。芽孢杆菌(Bacillussp.)是一类能够产生芽孢的革兰氏阴性细菌，好氧或兼性好氧生活，广泛存在于土壤、水、空气以及动物肠道等处，能够产生耐热、耐旱、抗紫外线和抗有机溶剂的内生孢子，所产生芽孢可制成粉剂、可湿性粉剂等多种剂型，另外还能利用分泌的多种酶类和抗生素来抑制其他细菌的生长，进而减少甚至消灭水产养殖动物的病原体，减少疾病的发生，提高养殖效益。能够改善水生动物肠道微生物区系，增强动物的消化吸收功能，促进动物对钙、磷、铁的利用，促进维生素D的吸收，增强机体抗病力，降低饵料系数，是理想的益生菌筛选对象。研究报道(谢学文等2016)发现甲基营养型芽孢杆菌对黄瓜炭疽病菌具有较强的抑制作用。夏艳等(2014)筛选到一株甲基营养型芽孢杆菌对烟草青枯病菌有明显的抑制作用。魏新燕等(2018)发现甲基营养型芽孢杆菌BH21对葡萄灰霉病菌(Botrytiscinerea)有较好拮抗作用。张皎皎(2018)从草鱼肠道中筛选出一株甲基营养型芽孢杆菌WM-1，该菌对嗜水气单胞菌具有较好的抑制作用。目前，水产领域益生菌的种类较少，本专利技术从池塘水中筛选出一株甲基营养型芽孢杆菌YFI-1,具有较广的抑菌谱，对维氏气单胞菌、嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、爱德华氏菌、霉实假单胞菌、无乳链球菌都具有抑制作用，将该菌与枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌复配后，可加强其抑菌功能。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种含有甲基营养型芽孢杆菌(Bacillusmethylotrophicus)YFI-1的复合菌剂，所述的复合菌剂包括甲基营养型芽孢杆菌YFI-1，枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌。本专利技术的另一个目的在于提供了一种含有甲基营养型芽孢杆菌YFI-1的复合菌剂的应用，该复合菌剂对水产病原菌，包括维氏气单胞菌、嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、爱德华氏菌、霉实假单胞菌、无乳链球菌有较好的抑制作用。为了达到上述目的，本专利技术采取以下技术措施：一种含有甲基营养型芽孢杆菌(Bacillusmethylotrophicus)的复合菌剂，所述的复合菌剂包括：甲基营养型芽孢杆菌YFI-1、地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌；所述的甲基营养型芽孢杆菌YFI-1的保藏编号：CCTCCNO：M2019651。市售的地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌菌能完成本专利技术。以上所述的复合菌剂，优选的，所述的甲基营养型芽孢杆菌YFI-1、地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的有效菌浓度比例为3-4:0.5-2:1-2。一种含有甲基营养型芽孢杆菌(Bacillusmethylotrophicus)的复合菌剂的应用，包括利用该复合菌剂制备成水产细菌的抑菌剂，或是制备成预防或治疗水产动物疾病的药物；以上所述的应用中，优选的，所述的水产细菌包括但不限于：维氏气单胞菌、嗜水气单胞菌、爱德华氏菌、温和气单胞菌、无乳链球菌、霉实假单胞菌。以上所述的应用中，优选的，所述的水产动物疾病是由维氏气单胞菌、嗜水气单胞菌、爱德华氏菌、温和气单胞菌、无乳链球菌或霉实假单胞菌引起的。与现有技术相比，本专利技术具有以下优点：1.本专利技术的甲基营养型芽孢杆菌YFI-1对水产病原菌维氏气单胞菌、嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、爱德华氏菌、霉实假单胞菌、无乳链球菌都具有良好的抑制效果，可以作为抗生素替代品使用，具有良好的应用前景。2.本专利技术的甲基营养型芽孢杆菌YFI-1对养殖动物和环境友好，且不会产生药物残留和耐药性问题。3.本专利技术的甲基营养型芽孢杆菌YFI-1，枯草芽孢杆菌，地衣芽孢杆菌混配后的复合菌剂对水产病原菌维氏气单胞菌、嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、爱德华氏菌、霉实假单胞菌、无乳链球菌的抑制率高于单株甲基营养型芽孢杆菌YFI-1，因此适用于作为复合菌剂使用。具体实施方式本专利技术所述技术方案，如未特别说明，均为本领域的常规技术，所述试剂或材料，如未特别说明，均来源于商业渠道。本专利技术实施例中的抑菌指示菌具体为：维氏气单胞菌(AeromonasveroniiCCTCCAB98045)、嗜水气单胞菌(AeromonashydrophilaATCC13040)、温和气单胞菌(AeromonassobriaATCC43979)、迟缓爱德华氏菌(EdwardsiellatardaATCC15947)、霉实假单胞菌(PseudomonasfragiATCC4973)、无乳链球菌(StreptococcusagalactiaeATCC12386)、弗氏柠檬酸杆菌(CitrobacterfreundiiATCC43864)、脑膜败血伊丽莎白菌(ElizabethkingiameningosepticaATCC13253)、类志贺邻单胞菌(PlesiomonsshigelloidesATCC14029)实施例1：甲基营养型芽孢杆菌YFI-1的分离鉴定1.菌种的分离从养殖区域采集养殖池塘水样品。用0.85％的无菌生理盐水将养殖池塘水样品连续10倍倍比稀释6次，用移液枪分别在各个浓度梯度稀释液中吸取溶液100μL到BHI固体平板上，用涂布棒涂匀、编号，并做3个重复。涂布均匀后在超净工作台中放置5～10min，使培养基表面菌液被充分吸收。最后将平板倒置，于恒温培养箱中30℃培养24h。挑选不同形态的菌落接种于普通肉汤平板上分离纯化。2.菌株筛选采用牛津杯平板抑菌法对分离纯化获得的细菌进行抑菌性能测定，经过大量分选，获得1株对维氏气单胞菌(Aeromonasveronii)、嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)、温和气单胞菌(Aeromonassobria)、爱德华氏菌(Edwardsiellatarda)、霉实假单胞菌(Pseudomonasfragi)、无乳链球菌(Streptococcusagalactiae)等致病本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种含有甲基营养型芽孢杆菌（
【技术特征摘要】
1.一种含有甲基营养型芽孢杆菌（Bacillusmethylotrophicus）的复合菌剂，所述的复合菌剂包括：甲基营养型芽孢杆菌YFI-1、地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌；所述的甲基营养型芽孢杆菌YFI-1的保藏编号：CCTCCNO：M2019651。
2.根据权利要求1所述的复合菌剂，所述的甲基营养型芽孢杆菌YFI-1、地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的有效菌浓度比例为3-4:0.5-2:1-2。
3.权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员：薛明洋，周勇，范玉顶，孟彦，江南，刘文枝，李逸群，曾令兵，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院长江水产研究所，
类型：发明
国别省市：湖北;42
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。