一种白葡萄球菌粉的制备工艺制造技术

本发明专利技术公开一种白葡萄球菌粉的制备工艺，其包括如下步骤：步骤1）菌种的制备；步骤2）培养基配制；步骤3）培养；步骤4）灭活；步骤5）沉淀、干燥；步骤6）粉碎；步骤7）混合；步骤8）包装。本发明专利技术培养效果优于常规的培养基，并且成本低廉，给制药企业节省了原料成本，提高了工业附加值。不会破坏维生素以及其他活性物质，营养成分均衡合理，成本低廉，可完全取代市场常用培养基，发酵效率也相应提高。

Preparation technology of a kind of white staphylococcus powder

The invention discloses a preparation process of Staphylococcus aureus powder, which comprises the following steps: Step 1) preparation of bacteria; step 2) preparation of culture medium; step 3) cultivation; step 4) inactivation; step 5) precipitation and drying; step 6) grinding; step 7) mixing; step 8) packaging. The culture effect of the invention is superior to the conventional culture medium, and the cost is low, which saves the raw material cost for the pharmaceutical enterprise and improves the industrial added value. It will not destroy vitamins and other active substances. The nutrition is balanced and reasonable, and the cost is low. It can completely replace the commonly used medium in the market, and the fermentation efficiency is also improved accordingly.

【技术实现步骤摘要】
一种白葡萄球菌粉的制备工艺
本专利技术属于微生物
，具体涉及一种白葡萄球菌粉的制备工艺。
技术介绍
发酵法制备获得白葡萄球菌粉是制药企业生产白葡萄球菌粉的唯一途径，但是培养基的成本制约着企业的发展，目前较多企业采用葡萄糖蛋白胨培养基，原料成本高，企业的利润大大降低。“用液体发酵法生产气管炎菌苗片的最佳工艺条件研究，山东医药工业1999年”，公开了一种白葡萄球菌培养基，包括蛋白胨0.5%，尿素2%，玉米浆1%，葡萄糖1%，柠檬酸钠0.3%，硫酸镁0.05%以及氯化钠0.5%，该培养基原料成本较高，并且获得的菌体浓度仅达到109CFU/mL级别。开发一种低成本的白葡萄球菌粉制备工艺是我们需要解决的技术问题。小麦麸皮（麦麸）作为面粉加工的主要副产品，过去，麸皮主要是用作动物饲料，经济价值不高。小麦麸皮含有丰富的碳水化合物、蛋白质、维生素E、酚类化合物以及无机矿物质等（麦麸的功能成分及其应用研究进展，贾天广，食品研究与开发2014年），已经逐渐应用到其他领域，包括保健品、食品添加剂、提取膳食纤维和膳食蛋白等，具备广泛的应用前景和开发价值。但由于小麦麸皮成分复杂，其处理工艺难以掌握。在细菌培养
，研究人员大多采用小麦麸皮进行处理，作为细菌培养基的碳源的部分补充物，用于降低培养基的成本；迄今还没有出现以小麦麸皮为主要原料的白葡萄球菌培养基。
技术实现思路
本专利技术的目的是解决现有技术存在发酵成本高的技术问题，提供一种白葡萄球菌粉的制备工艺，以克服现有技术的不足。本专利技术是通过以下技术方案实现的：本专利技术一种白葡萄球菌粉的制备工艺，其包括如下步骤：步骤1）菌种的制备：按无菌要求，把冻干管内的菌种传至若干试管斜面，在37±1℃培养18-24小时，冷藏保存；把试管斜面的菌种传若干扁瓶斜面，在37±1℃培养8-10小时，用营养肉汤培养基或生理盐水制成均匀的菌悬液供生产使用，在传扁瓶斜面的同时可传若干试管斜面，培养后保存，并填好菌种传代记录；步骤2）培养基配制：（1）种子罐培养基的配比、用量及配制名称玉米浆消化液蛋白胨氯化钠口服葡萄糖有机硅消泡剂总量配比50%1%0.2%0.3%————用量500kg10kg2kg3kg350ml100万ml将玉米浆消化液打入种子罐内，加入各物料，用水补至全量，搅拌充分溶解后，用氢氧化钠溶液调PH值至7.4-7.6后，灭菌；（2）发酵罐培养基的配比、用量及配制名称玉米浆消化液蛋白胨氯化钠口服葡萄糖有机硅消泡剂总量配比≥34.3%1%0.2%0.3%————用量≥2400kg70kg14kg21kg2000ml700万ml将玉米浆消化液打入配料罐内，加入各物料，用水补至规定体积，搅拌充分溶解后，用氢氧化钠调PH值至7.4-7.6后，用打料泵将配制后的培养基打入发酵罐内，灭菌；步骤3）培养：（1）下种、移种：种子罐内温度降至37℃时，将准备好的种子以无菌手续接入种子罐内培养，待菌体生长进入对数生长期，并达到一定浓度（一般200亿/ml）时，取种并移入发酵罐内继续培养（移种管道在移种前30-40分钟灭菌好备用）；（2）培养：培养过程中，随时观察温度、通气量和罐内泡沫，培养时通气量应保持在0.05-0.08MPa，温度应保持在36-38℃之间，PH值每次调整后为7.2-7.4之间；在菌体的对数生长期时，通气量要相应增大；（3）取样：下种、移种前以无菌手续（将取样口通蒸汽灭菌15-20分钟）取样，检测培养基的PH值、浓度、吸收度值、镜检，以及做无菌检验；斜面下种4小时，开始取样检测，大瓶菌种下种2小时开始取样检测，发酵罐移种后2小时开始取样检测，检测PH值、浓度、菌型，每次取样操作人员与化验人员一起操作，由化验员检测各项目，将化验结果及时通知操作人员；操作人员在菌体大量生长繁殖时要每半小时检测并调整PH值；（4）补料：培养过程中，如泡沫过多可酌情加入消泡剂。根据检测的PH值浓度，补加灭菌后氢氧化钠溶液，使调整后的PH值在7.2-7.4之间，同时补加适量的葡萄糖溶液；步骤4）灭活：菌体大量生长繁殖后，若2-3小时内浓度不再明显上升，PH值和吸收度值基本不变的情况下，经检测合格，按0.6%的比例加入甲醛溶液，搅拌5-10分钟，静置2小时，彻底灭活后，沉淀分离；步骤5）沉淀、干燥：将灭活后的发酵液压入沉淀罐，用硫酸调PH值6.0-6.5之间，按1.5-2.5%的比例加入絮凝剂，充分搅拌混合后静置30分钟，分离，将菌泥均匀放置烘盘内，厚度不超过5cm，85-95℃干燥3小时，使干燥失重≤6.0%；步骤6）粉碎：将干燥后的菌块，先通过10目筛粗粉碎成小颗粒，再细粉碎，细粉碎后的菌粉应通过100目筛；步骤7）混合：将菌粉置混合机中，运转10分钟，将菌粉放入料桶内，最后混合均质的菌粉为一批；步骤8）包装：将检验合格的菌粉按20kg/桶包装，内为双层塑料袋，外为纸桶，桶内放装箱单，桶外贴标签，桶内外品名、批号、数量应一致，要认真核对，检验合格后入库。本专利技术培养效果优于常规的培养基，并且成本低廉，给制药企业节省了原料成本，提高了工业附加值。不会破坏维生素以及其他活性物质，营养成分均衡合理，成本低廉，可完全取代市场常用培养基，发酵效率也相应提高。具体实施方式本专利技术一种白葡萄球菌粉的制备工艺，其包括如下步骤：步骤1）菌种的制备：按无菌要求，把冻干管内的菌种传至若干试管斜面，在37±1℃培养18-24小时，冷藏保存；把试管斜面的菌种传若干扁瓶斜面，在37±1℃培养8-10小时，用营养肉汤培养基或生理盐水制成均匀的菌悬液供生产使用，在传扁瓶斜面的同时可传若干试管斜面，培养后保存，并填好菌种传代记录；步骤2）培养基配制：（1）种子罐培养基的配比、用量及配制名称玉米浆消化液蛋白胨氯化钠口服葡萄糖有机硅消泡剂总量配比50%1%0.2%0.3%————用量500kg10kg2kg3kg350ml100万ml将玉米浆消化液打入种子罐本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种白葡萄球菌粉的制备工艺，其特征是包括如下步骤：/n步骤1）菌种的制备：/n按无菌要求，把冻干管内的菌种传至若干试管斜面，在37±1℃培养18-24小时，冷藏保存；把试管斜面的菌种传若干扁瓶斜面，在37±1℃培养8-10小时，用营养肉汤培养基或生理盐水制成均匀的菌悬液供生产使用，在传扁瓶斜面的同时可传若干试管斜面，培养后保存，并填好菌种传代记录；/n步骤2）培养基配制：/n将玉米浆消化液打入种子罐内，加入各物料，用水补至全量，搅拌充分溶解后，用氢氧化钠溶液调PH值至7.4-7.6后，灭菌；/n将玉米浆消化液打入配料罐内，加入各物料，用水补至规定体积，搅拌充分溶解后，用氢氧化钠调PH值至7.4-7.6后，用打料泵将配制后的培养基打入发酵罐内，灭菌；/n步骤3）培养：/n（1）下种、移种：/n种子罐内温度降至37℃时，将准备好的种子以无菌手续接入种子罐内培养，待菌体生长进入对数生长期，并达到一定浓度（一般200亿/ml）时，取种并移入发酵罐内继续培养（移种管道在移种前30-40分钟灭菌好备用）；/n（2）培养：/n培养过程中，随时观察温度、通气量和罐内泡沫，培养时通气量应保持在0.05-0.08MPa，温度应保持在36-38℃之间，PH值每次调整后为7.2-7.4之间；在菌体的对数生长期时，通气量要相应增大；/n（3）取样：/n下种、移种前以无菌手续（将取样口通蒸汽灭菌15-20分钟）取样，检测培养基的PH值、浓度、吸收度值、镜检，以及做无菌检验；斜面下种4小时，开始取样检测，大瓶菌种下种2小时开始取样检测，发酵罐移种后2小时开始取样检测，检测PH值、浓度、菌型，每次取样操作人员与化验人员一起操作，由化验员检测各项目，将化验结果及时通知操作人员；操作人员在菌体大量生长繁殖时要每半小时检测并调整PH值；/n（4）补料：/n培养过程中，如泡沫过多可酌情加入消泡剂。/n...

【技术特征摘要】
1.一种白葡萄球菌粉的制备工艺，其特征是包括如下步骤：
步骤1）菌种的制备：
按无菌要求，把冻干管内的菌种传至若干试管斜面，在37±1℃培养18-24小时，冷藏保存；把试管斜面的菌种传若干扁瓶斜面，在37±1℃培养8-10小时，用营养肉汤培养基或生理盐水制成均匀的菌悬液供生产使用，在传扁瓶斜面的同时可传若干试管斜面，培养后保存，并填好菌种传代记录；
步骤2）培养基配制：
将玉米浆消化液打入种子罐内，加入各物料，用水补至全量，搅拌充分溶解后，用氢氧化钠溶液调PH值至7.4-7.6后，灭菌；
将玉米浆消化液打入配料罐内，加入各物料，用水补至规定体积，搅拌充分溶解后，用氢氧化钠调PH值至7.4-7.6后，用打料泵将配制后的培养基打入发酵罐内，灭菌；
步骤3）培养：
（1）下种、移种：
种子罐内温度降至37℃时，将准备好的种子以无菌手续接入种子罐内培养，待菌体生长进入对数生长期，并达到一定浓度（一般200亿/ml）时，取种并移入发酵罐内继续培养（移种管道在移种前30-40分钟灭菌好备用）；
（2）培养：
培养过程中，随时观察温度、通气量和罐内泡沫，培养时通气量应保持在0.05-0.08MPa，温度应保持在36-38℃之间，PH值每次调整后为7.2-7.4之间；在菌体的对数生长期时，通气量要相应增大；
（3）取样：
下种、移种前以无菌手续（将取样口通蒸汽灭菌15-20分钟）取样，检测培养基的PH值、浓度、吸收度值、镜检，以及做无...

【专利技术属性】
技术研发人员：林凡友，聂昌盛，孙永喜，王世礼，毛传伟，周龙霞，
申请(专利权)人：仁和堂药业有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37