一种异黄烷类化合物及其制备方法和用途技术

本发明专利技术提供了式Ⅰ所示的化合物、或其立体异构体、或其药学上可接受的盐、或其溶剂合物、或其前体药物、或其代谢产物。本发明专利技术化合物为异黄烷类化合物，本发明专利技术异黄烷类化合物具有良好的抗肿瘤效果，特别是对于肺癌和乳腺癌的抗肿瘤效果良好。本发明专利技术异黄烷类化合物为临床上筛选和/或制备抗肿瘤药物，特别是抗肺癌和乳腺癌的药物提供了一种新的选择。

An isoflavane compound and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一种异黄烷类化合物及其制备方法和用途
本专利技术涉及化学医药领域，具体涉及一种异黄烷类化合物及其制备方法和用途。
技术介绍
鸡血藤药材为豆科(Leguminosae)植物密花豆SpatholobussuberectusDunn的干燥藤茎，为传统的活血化瘀中药，具有活血补血，调经止痛，舒筋活络的作用，临床上用于月经不调，痛经，经闭，风湿痹痛，麻木瘫痪，血虚萎黄。现代研究表明，鸡血藤的提取物和次级代谢产物能够抑制肿瘤细胞生长，黄酮类成分是鸡血藤的明确活性成分，已报道的黄酮类型有黄酮类、二氢黄酮类、异黄酮类、异黄烷类、二氢黄酮醇类、查耳酮类等，其中异黄烷类成分目前的报道较少。鸡血藤总黄酮表现出的多种药理活性，包括防治心脑血管疾病、改善血液系统疾病、抗肿瘤作用及抗菌等作用。WangLi-Xia等报道鸡血藤中的一个异黄烷成分对多种肿瘤细胞具有细胞毒作用。然而，目前从鸡血藤中分离得到的异黄烷类成分较少，具有抗肿瘤作用的报道则更为罕见。因此，从鸡血藤药材中分离提取出新的化合物并且以此为基础发现活性物质，具有重要的现实意义。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术提供了一种异黄烷类化合物及其制备方法和用途。本专利技术提供了式Ⅰ所示的化合物、或其立体异构体、或其盐、或其溶剂合物、或其前体药物、或其代谢产物：其中，R6为羟基；R7为甲氧基；R8为羟基或甲氧基；R1、R2、R3、R4、R5、R9、R10各自独立地选自氢、卤素、羟基、氨基、甲氧基，或相邻碳原子的两取代基组合成亚甲二氧基。进一步地，R9、R10各自独立地选自氢、羟基、甲氧基，或R9、R10组合成亚甲二氧基。进一步地，所述化合物如式Ⅱ所示：其中，R9、R10各自独立地选自氢、甲氧基，或R9、R10组合成亚甲二氧基。进一步地，所述化合物的结构式如下：本专利技术还提供了一种前述的化合物A的制备方法，步骤如下：a.取鸡血藤干燥饮片95％乙醇加热回流提取，减压浓缩，得到鸡血藤提取物，将其用热水混悬，采用乙酸乙酯萃取，减压浓缩，得到乙酸乙酯萃取部位；b.步骤a所得的乙酸乙酯萃取部位经硅胶柱层析，依次以二氯甲烷：甲醇＝100:0、100:1、50:1、25:1、10:1、3:1、0:100(v/v)为洗脱剂进行梯度洗脱，取二氯甲烷：甲醇＝25:1(v/v)时的洗脱液，利用薄层色谱，收集展开剂为石油醚：乙酸乙酯＝2:1(v/v)薄层展开，Rf为0.20～0.80的相似流份，得F5；c.取步骤b所得的F5，上聚酰胺色谱，依次以甲醇:水＝0:100、25:75、40:60、50:50、75:25、95:5(v/v)为洗脱剂进行梯度洗脱，取甲醇：水＝25:75、40:60、50:50(v/v)时的洗脱液，利用薄层色谱，收集展开剂为二氯甲烷：丙酮＝10:1(v/v)，Rf为0.40～0.80的相似的流份，得F5-2；d.取步骤c所得的F5-2,经正相SephadexLH-20柱色谱，以二氯甲烷：甲醇＝1:1(v/v)为洗脱剂，得到的洗脱液利用薄层色谱，收集展开剂为二氯甲烷：丙酮＝10:1(v/v)，Rf为0.35～0.80的相似的流份，得F5-2-2；e.取步骤d所得的F5-2-2,经正相SephadexLH-20柱色谱，以石油醚：二氯甲烷：甲醇＝2:2:1(v/v/v)为洗脱剂，得到的洗脱液利用薄层色谱，收集展开剂为二氯甲烷：乙酸乙酯＝30:1(v/v)，Rf为0.30～0.50的相似的流份，得F5-2-2-4；f.取步骤e所得的F5-2-2-4，经反相SephadexLH-20柱色谱，以70％甲醇水溶液为洗脱剂，得到的洗脱液利用薄层色谱，收集展开剂为二氯甲烷：乙酸乙酯＝30:1(v/v)，Rf为0.30～0.45的相似的流份，得F5-2-2-4-3；g.取步骤f所得的F5-2-2-4-3，经正相SephadexLH-20柱色谱，以二氯甲烷：甲醇＝1:1(v/v)为洗脱剂，得到的洗脱液利用薄层色谱，收集展开剂为二氯甲烷：乙酸乙酯＝10:1(v/v)，Rf为0.35～0.70的相似的流份，得F5-2-2-4-3-2；h.取步骤g所得的F5-2-2-4-3-2，先经薄层色谱制备，以二氯甲烷：甲醇＝5:1(v/v)为展开剂，再采用半制备高效液相色谱纯化，以58％甲醇水溶液为洗脱剂，tR＝102.0min，分离得到化合物A。进一步地，步骤a中，所述95％乙醇用量为鸡血藤干燥饮片的6倍(v/w)；所述提取为提取3次，每次提取时间为3h；和/或，步骤b中，所述梯度洗脱条件如下：和/或，步骤c中，所述梯度洗脱的条件如下：和/或，步骤d中，组分F5-2为5.4g时，收集所述洗脱剂二氯甲烷：甲醇＝1:1(v/v)的体积为0.18L；和/或，步骤e中，组分F5-2-2为1.2g时，收集所述洗脱剂石油醚：二氯甲烷：甲醇＝2:2:1(v/v/v)的体积为0.10L；和/或，步骤f中，组分为F5-2-2-4为0.3g时，收集所述洗脱剂70％甲醇水溶液的体积为0.15L；和/或，步骤g中，组分为F5-2-2-4-3为0.10g时，收集所述洗脱剂二氯甲烷：甲醇＝1:1(v/v)的体积为0.10L。本专利技术还提供了一种前述的化合物B的制备方法，步骤如下：A.取鸡血藤干燥饮片95％乙醇加热回流提取，减压浓缩，得到鸡血藤提取物，将其用热水混悬，采用乙酸乙酯萃取，减压浓缩，得到乙酸乙酯萃取部位；B.取步骤A所得的乙酸乙酯部位经硅胶柱层析，依次以二氯甲烷：甲醇＝100:0、100:1、50:1、25:1、10:1、3:1、0:100(v/v)为洗脱剂进行梯度洗脱，取二氯甲烷：甲醇＝25:1(v/v)时的洗脱液，利用薄层色谱，收集展开剂为石油醚：乙酸乙酯＝2:1(v/v)薄层展开，Rf为0.20～0.80的相似流份，得F5；C.取步骤B所得的F5，上聚酰胺色谱，依次以甲醇:水＝0:100、25:75、40:60、50:50、75:25、95:5(v/v)为洗脱剂进行梯度洗脱，取甲醇：水＝25:75、40:60、50:50(v/v)时的洗脱液，利用薄层色谱，收集展开剂为二氯甲烷：丙酮＝10:1(v/v)，Rf为0.40～0.85的相似的流份，得F5-1；D.取步骤C所得的F5-1,经溶剂二氯甲烷：甲醇＝1:1重结晶操作后，过滤，得到母液部分F5-1-2；E.取步骤D所得的F5-1-2,经正相SephadexLH-20柱色谱，以二氯甲烷：甲醇＝1:1(v/v)为洗脱剂，得到的洗脱液利用薄层色谱，收集展开剂为二氯甲烷：丙酮＝30:1(v/v)，Rf为0.20～0.90的相似的流份，得F5-1-2-4；F.取步骤E所得的F5-1-2-4，经硅胶柱层析，依次以石油醚：乙酸乙酯＝20:1、10:1、5:1、1:1(v/v)为洗脱剂进行梯度洗脱，得到的洗脱液利用薄层色谱，收集展开剂为二氯甲烷：丙酮＝20:1(v/v)，Rf为0.40～0.60的相似的流份，得F5-1-2-4-3；G.取步骤F所得的F5-1-2-4-3，先经薄层色谱制备，以二氯甲烷：甲醇＝20:1(v/v)为展开剂，再采用半制备高效液相色谱纯化，以80％甲醇水溶液为洗脱剂，tR＝30.4min，分离得到化合物B。进一步地，步骤A中，所述95％乙醇用量为鸡血藤干燥饮片的6倍(v本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.式Ⅰ所示的化合物、或其立体异构体、或其盐、或其溶剂合物、或其前体药物、或其代谢产物：

【技术特征摘要】
1.式Ⅰ所示的化合物、或其立体异构体、或其盐、或其溶剂合物、或其前体药物、或其代谢产物：其中，R6为羟基；R7为甲氧基；R8为羟基或甲氧基；R1、R2、R3、R4、R5、R9、R10各自独立地选自氢、卤素、羟基、氨基、甲氧基，或相邻碳原子的两取代基组合成亚甲二氧基。2.根据权利要求1所述的化合物、或其立体异构体、或其盐、或其溶剂合物、或其前体药物、或其代谢产物，其特征在于：R9、R10各自独立地选自氢、羟基、甲氧基，或R9、R10组合成亚甲二氧基。3.根据权利要求2所述的化合物、或其立体异构体、或其盐、或其溶剂合物、或其前体药物、或其代谢产物，其特征在于：所述化合物如式Ⅱ所示：其中，R9、R10各自独立地选自氢、甲氧基，或R9、R10组合成亚甲二氧基。4.根据权利要求1～3任一项所述的化合物、或其立体异构体、或其盐、或其溶剂合物、或其前体药物、或其代谢产物，其特征在于：所述化合物的结构式如下：5.一种权利要求4所述的化合物A的制备方法，其特征在于：步骤如下：a.取鸡血藤干燥饮片95％乙醇加热回流提取，减压浓缩，得到鸡血藤提取物，将其用热水混悬，采用乙酸乙酯萃取，减压浓缩，得到乙酸乙酯萃取部位；b.步骤a所得的乙酸乙酯萃取部位经硅胶柱层析，依次以二氯甲烷：甲醇＝100:0、100:1、50:1、25:1、10:1、3:1、0:100(v/v)为洗脱剂进行梯度洗脱，取二氯甲烷：甲醇＝25:1(v/v)时的洗脱液，利用薄层色谱，收集展开剂为石油醚：乙酸乙酯＝2:1(v/v)薄层展开，Rf为0.20～0.80的相似流份，得F5；c.取步骤b所得的F5，上聚酰胺色谱，依次以甲醇:水＝0:100、25:75、40:60、50:50、75:25、95:5(v/v)为洗脱剂进行梯度洗脱，取甲醇：水＝25:75、40:60、50:50(v/v)时的洗脱液，利用薄层色谱，收集展开剂为二氯甲烷：丙酮＝10:1(v/v)，Rf为0.40～0.80的相似的流份，得F5-2；d.取步骤c所得的F5-2,经正相SephadexLH-20柱色谱，以二氯甲烷：甲醇＝1:1(v/v)为洗脱剂，得到的洗脱液利用薄层色谱，收集展开剂为二氯甲烷：丙酮＝10:1(v/v)，Rf为0.35～0.80的相似的流份，得F5-2-2；e.取步骤d所得的F5-2-2,经正相SephadexLH-20柱色谱，以石油醚：二氯甲烷：甲醇＝2:2:1(v/v/v)为洗脱剂，得到的洗脱液利用薄层色谱，收集展开剂为二氯甲烷：乙酸乙酯＝30:1(v/v)，Rf为0.30～0.50的相似的流份，得F5-2-2-4；f.取步骤e所得的F5-2-2-4，经反相SephadexLH-20柱色谱，以70％甲醇水溶液为洗脱剂，得到的洗脱液利用薄层色谱，收集展开剂为二氯甲烷：乙酸乙酯＝30:1(v/v)，Rf为0.30～0.45的相似的流份，得F5-2-2-4-3；g.取步骤f所得的F5-2-2-4-3，经正相SephadexLH-20柱色谱，以二氯甲烷：甲醇＝1:1(v/v)为洗脱剂，得到的洗脱液利用薄层色谱，收集展开剂为二氯甲烷：乙酸乙酯＝10:1(v/v)，Rf为0.35～0.70的相似的流份，得F5-2-2-4-3-2；h.取步骤g所得的F5-2-2-4-3-2，先经薄层色谱制备，以二氯甲烷：甲醇＝5:1(v/v)为展开剂，再采用半制备高效液相色谱纯化，以58％甲醇水溶液为洗脱剂，tR＝102.0min，分离得到化合物A。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：步骤a中，所述95％乙醇用量为鸡血藤干燥饮片的6倍(v/w)；所述提取为提取3次，每次提取时间为3h；和/或，步骤b中，所述梯度洗脱条件如下：和/或，步骤c中，所述梯度洗脱的条件如下：和/或，步骤d中，组分F5-2为5.4g时，收集所述洗脱剂二氯甲烷：甲醇＝1:1(v/v)的体积为0.18L；和/或，步骤e中，组分F5-2-2为1.2g时，收集所述洗脱剂石油醚：二氯甲烷：甲醇＝2:2:1(v/v/v)的体积为0.10L；和/或，步骤f中，组分为F5-2-2-4为0.3g时，收集所述洗脱剂70％甲醇水溶液的体积为0.15L；和/或，步骤g中，组分为F5-2-2-4-3为0.10g时，收集所述洗脱剂二氯甲烷：甲醇＝1:1(v/v)的体积为0.10L。7.一种权利要求4所述的化合物B的制备方法，其特征在于：步骤如下：A.取鸡血藤干燥饮片95％乙醇加热回流提取，减压浓缩，得到鸡血藤提取物，将其用热水混悬，采用乙酸乙酯萃取，减压浓缩，得到乙酸乙酯萃取部位；B.取步骤A所得的乙酸乙酯部位经硅胶柱层析，依次以二氯甲烷：甲醇＝100:0、100:1、50:1、25:1、10:1、3:1、0:100(v/v)为洗脱剂进行梯度洗脱，取二氯甲烷：甲醇＝25:1(v/v)时的洗脱液，利用薄层色谱，收集展开剂为石油醚：乙酸乙酯＝2:1(v/v)薄层展开，Rf为0.20～0....

【专利技术属性】
技术研发人员：彭芙，熊亮，
申请(专利权)人：四川大学，成都中医药大学，
类型：发明
国别省市：四川,51