一种洛索洛芬或其钠盐中有关物质的检测方法技术

本申请公开了一种洛索洛芬或其钠盐中有关物质的检测方法，此方法使用了高效液相色谱法，给出了独特的色谱条件并成功检测出了洛索洛芬钠盐中的一种工艺杂质。本申请使用了反向色谱法去检测该工艺杂质，并且峰形较好，与相邻色谱峰分离度高，节约了研发成本，降低了实验难度，重现性好。

A Method for the Detection of Related Substances in Losoprofen or Its Sodium Salt

【技术实现步骤摘要】
一种洛索洛芬或其钠盐中有关物质的检测方法
本专利技术属于药物分析
，具体涉及一种洛索洛芬或其钠盐中有关物质的检测方法。
技术介绍
洛索洛芬钠（LoxoprofenSodium），化学名为2-[4-(2-氧代环戊烷-1-基甲基)苯基]丙酸钠二水合物，CAS号：80382-23-6，分子式为C15H17NaO3，分子量为268.28，结构式如下所示：洛索洛芬钠由日本第一三共株式会社首先研制，该品已列入国家九五和2010年新品开发推荐试制品种之一。洛索洛芬钠为丙烯酸类前体型非甾体抗炎药，其本身不具有药物活性，经皮或口服给药吸收后，在人体内转化为活性代谢物反式-OH体，其活性代谢物通过抑制前列腺素的合成而发挥镇痛、抗炎及解热作用。与临床上同类药物相比，其特点主要体现在：更强（临床效果好）、更快（口服30分钟血浆浓度即达峰值）、更安全（副作用小）。另一类特点是适应症广，临床上可广泛用于类风湿性关节炎、腰痛、肩周炎、颈肩腕综合症等的抗炎镇痛以及手术、外伤后及拔牙后的镇痛消炎和急性上呼吸道炎症的解热镇痛等。国内外已经上市的剂型有片剂、胶囊、颗粒剂、贴膏剂、贴剂、凝胶等。中国专利CN201710273835.8公开了一种布洛芬、其钠盐及其制剂有关物质的检测方法，此专利技术的有关物质包括杂质A、B、C、D、E和F，所述方法包括：(1)供试品溶液的制备；(2)样品检测：并给出了色谱柱条件，色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，250×4.6mm，5μm；柱温：20～40℃；流动相：有机相乙腈占水相磷酸水溶液的体积比例为32％～48％，磷酸水溶液中磷酸加入量为0.01～0.1％；流速：1.0～2.3ml/min；检测波长：205～225nm。利用本专利技术提出的有关物质检测方法能实现多种杂质的有效分离。但是此方法对于的产品是布洛芬，且杂质的结构与我方差别很大，属于不同领域的检测方法。文献《Identificationofdegradationproductsinloxoprofensodiumadhesivetapesbyliquidchromatography–massspectrometryanddynamicpressurizedliquidextraction–solid-phaseextractioncoupledtoliquidchromatography–nuclearmagneticresonancespectroscopy》是《JournalofChromatographyA》中一篇介绍洛索洛芬钠降解产物的文章，里面介绍了洛索洛芬钠贴剂在工艺中的各种杂质，其中有公开洛索洛芬钠工艺杂质DP-3的介绍和化学结构，DP-3的结构如下式所示，通常此DP-3杂质是被认为是由洛索洛芬钠与辅料薄荷素油/薄荷脑的主成分薄荷醇形成的工艺杂质。其给出的色谱柱条件如下：色谱柱为TSKgelODS-100V，流动相为0.01%（v/v）三氟乙酸-乙腈梯度洗脱；检测波长：222nm；流速：1.0ml/min；柱温：40℃。梯度洗脱程序如下：A：乙腈；B：0.01%（v/v）三氟乙酸时间（min）AB0-535655-1035→9565→510-20955经过重复性实验并验证，该方法下，杂质DP-3峰形拖尾，无法有效的检测出是否存在DP-3这种杂质，无法达到检测的目的。因此，在现今文献和专利公开中没有发现能够有效检测出洛索洛芬或其钠盐中DP-3杂质的情况下，研发出一种能够有效检测出DP-3杂质，并且符合操作简单，试剂易得，重现性好，环境污染小的方法非常有意义。
技术实现思路
本申请的主要目的是提供一种洛索洛芬或其钠盐中有关物质的检测方法。我方技术方案所要分离的杂质是洛索洛芬钠制剂生产过程中所产生的工艺杂质，其在贴膏剂的生产中普遍存在，对洛索洛芬钠凝胶贴膏剂型的产品最终纯度和质量造成了严重影响。其在文献中被标记为杂质DP-3，此杂质被认为是由洛索洛芬钠与辅料薄荷素油/薄荷脑的主成分薄荷醇形成的工艺杂质，因此在洛索洛芬钠凝胶贴膏的生产过程中不可避免的会产生这种杂质，使得检测出这种杂质的意义很大。杂质DP-3的结构如下式所示：为了实现上述目的及解决洛索洛芬钠制剂，特别是相关凝胶贴膏剂型检测当中存在的问题，本申请采用了以下技术方案：一种洛索洛芬或其钠盐中有关物质的检测方法，有关物质杂质包括杂质DP-3，检测方法为高效液相色谱法，色谱条件如下：色谱柱选自反向色谱柱，流动相为加入了磷酸并调节溶液pH值为2.0～4.6的磷酸二氢钠溶液和甲醇组成，进行梯度洗脱；梯度洗脱条件为:以甲醇溶液为流动相A，加入磷酸调节pH值为2.0～4.6的磷酸二氢钠溶液为流动相B，优选为2.2～2.8，更优选为2.5；以体积比计，0分钟时，流动相A为80～85%，流动相B为15～20%；26分钟时，流动相A为80～85%，流动相B为15～20%；36分钟时，流动相A为90～92%，流动相B为8～10%；47分钟时，流动相A为80～85%，流动相B为15～20%；且26分钟时的流动相与47分钟时的流动相体积数值保持一致。或者表示为如下表所示形式，梯度洗脱程序如下：A：甲醇；B：0.01mol/L磷酸二氢钠溶液，加磷酸调节pH值为2.0～4.6。时间（min）AB0-2680～8515～2026-3690～928～1036-4780～8515～20其中，检测波长为222nm；流速为0.9～1.1ml/min，优选为1.0ml/min。优选的，洛索洛芬或其钠盐的剂型包括有贴膏剂、贴剂、凝胶剂。优选的，反向色谱柱包括有C18、C16、C8色谱柱。优选的，高效液相色谱仪的色谱柱型号为AgilentEclipseXDB-C18，色谱柱尺寸为4.6*150mm，5μm。我方实验人员经过多次实验，找出了检测杂质DP-3的较优实验方案，如下：一种洛索洛芬钠盐中有关物质的检测方法，包括以下步骤：（1）对照品溶液的制备：取杂质DP-3对照品，加甲醇溶解制成每1ml中含DP-3的质量为5ug的溶液；（2）供试品溶液的制备：取洛索洛芬钠凝胶贴膏1贴，剪取中间部分35cm2（其重量相当于25mg洛索洛芬钠），剪碎放入锥形瓶中，加入甲醇50ml，精密称定，超声30分钟，放冷，再加甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液，得到供试品溶液；（3）测定：采用C18反向色谱柱，以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，加入磷酸调节pH值为2.5的0.01mol/L磷酸二氢钠溶液和甲醇为流动相，流速为1.0ml/min，洗脱方式为梯度洗脱；梯度洗脱的程序如下表所示：A：甲醇；B：0.01mol/L磷酸二氢钠溶液，加磷酸调节pH值为2.5时间（min）AB0～26802026～36901036～478020精密量取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入色谱仪，记录色谱图。本申请还包括了此检测方法在药物杂质检测当中的应用。由于采用以上技术方案，本申请的有益效果在于：（1）可以对纯甲醇提取的洛索洛芬钠凝胶贴膏中的杂质DP-3有效检测；并且峰形较好，与相邻色谱峰分离度高，重现性好。（2）流动相仅需使用甲醇及磷酸二氢钠及磷酸溶液即可，试剂简单易得，并且在经济上收益很大。附图说明图1是我方实施例1所用色谱条件所测得的色谱图；图2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种洛索洛芬或其钠盐中有关物质的检测方法，所述有关物质杂质为杂质DP‑3，所述方法为高效液相色谱法，其特征在于，色谱柱选自反向色谱柱，流动相由加入磷酸调节pH值为2.0～4.6的磷酸二氢钠溶液和甲醇组成，并进行梯度洗脱，其中，杂质DP‑3的结构如下式所示：

【技术特征摘要】
1.一种洛索洛芬或其钠盐中有关物质的检测方法，所述有关物质杂质为杂质DP-3，所述方法为高效液相色谱法，其特征在于，色谱柱选自反向色谱柱，流动相由加入磷酸调节pH值为2.0～4.6的磷酸二氢钠溶液和甲醇组成，并进行梯度洗脱，其中，杂质DP-3的结构如下式所示：。2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述的梯度洗脱条件为:以甲醇溶液为流动相A，加入磷酸调节pH值为2.0～4.6的磷酸二氢钠溶液为流动相B；以体积比计，0分钟时，流动相A为80～85%，流动相B为15～20%；26分钟时，流动相A为80～85%，流动相B为15～20%；36分钟时，流动相A为90～92%，流动相B为8～10%；47分钟时，流动相A为80～85%，流动相B为15～20%；且26分钟时的流动相与47分钟时的流动相体积数值保持一致。3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述洛索洛芬或其钠盐的剂型包括有贴膏剂、贴剂、凝胶剂。4.如权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的流速为0.9～1.1ml/mi...

【专利技术属性】
技术研发人员：文凤，何莉，谢超君，殷报云，王奕，彭靖，
申请(专利权)人：湖南九典制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南,43