【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于药物分析，具体涉及一种新型多巴胺激动剂中异构体杂质的检测方法。
技术介绍
1、盐酸普拉克索(pramipexole dihydrochloride)，化学名为(s)-2-氨基-4，5，6，7-四氢-6-丙胺-苯并噻唑二盐酸一水合物，cas号：191217-81-9，分子式为c10h17n3s·2hcl·h2o，分子量为302.26，结构式如下所示：
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3、盐酸普拉克索是一种新型多巴胺受体激动剂，可用于治疗各期帕金森病。该药可以有效改善pd患者的症状，既可单独使用，也可以与左旋多巴联合应用，是目前美国神经病学会、运动障碍学会以及各国pd治疗指南推荐的一线治疗药物。本品也用于中度到重度特发性不宁腿综合征的症状治疗。有效性方面，通过药效学的体内和体外研究表明普拉克索对多巴胺d2受体亚家族具有很高的亲和力，对多巴胺d3受体有优先亲和力，并且对多巴胺和左旋多巴诱导的神经元损伤有保护作用。安全性方面，综合一般毒性、急性毒性、生殖毒性，致突变，致癌试验等毒理试验结果均表明，普拉克索临床用量无致畸、致癌、致突变作用，具有良好的安全性。
4、国内外关于盐酸普拉克索缓释片异构体的研究尚无公开资料，缓释片或普通片相关法定标准也未收录。对于异构体研究，业内常规方法是正相色谱法，但本品所含高粘度的羟丙甲纤维素和卡波姆占比近50％，采用正相色谱法会增大供试品溶液主成分提取的难度，正相色谱法所用试剂异丙醇、正己烷有一定毒性，对环境和实验人员有危害性。
5、若采用反向色谱法，不经过预处理直接配置
技术实现思路
1、本专利技术的主要目的是提供一种新型多巴胺激动剂中异构体杂质的检测方法。
2、本专利技术技术方案所要检测的异构体是盐酸普拉克索缓释片生产过程中所产生的异构体杂质，具体结构如下：
3、
4、上述异构体杂质在原料药和制剂的生产中普遍存在，对盐酸普拉克索制剂产品的最终纯度和质量有严重影响。因此，有必要检测异构体杂质进而严格控制产品质量。
5、为了实现上述目的及解决目前盐酸普拉克索缓释片分析中所存在的问题，本申请采用了以下技术方案：
6、一种新型多巴胺激动剂中异构体杂质的检测方法，所述检测方法采用高效液相色谱法，色谱柱以环糊精为填充剂，流动相a为高氯酸钠缓冲液，流动相b为乙腈，将供试品溶液注入高效液相色谱仪进行等度洗脱。本专利技术的检测方法适用于盐酸普拉克索缓释片，流动相a的ph为1.5～2.5，优选为2。流动相a和流动相b的体积比为85～95：15～5，优选90:10。
7、进一步的，流动相a中的高氯酸钠缓冲液由一水合高氯酸钠加水溶解，再通过高氯酸调节ph而制成。高氯酸钠缓冲液的浓度一般选择为0.1～0.5mol/l。
8、进一步的，所述供试品溶液的配制方法为：取盐酸普拉克索缓释片，加崩解剂使所述片剂崩解，再用稀释剂定量稀释，过滤，取续滤液，即得。
9、进一步的，所述崩解剂为甲醇-乙腈-磷酸(60～70:39～29:1，体积比)混合溶液。该浓度范围内的崩解剂均能使盐酸普拉克索缓释片溶解，优选地，所述崩解剂为甲醇-乙腈-磷酸(66:33:1)混合溶液。
10、进一步的，所述稀释剂为硫酸铝、氯化钾、硫酸锌、氯化镁溶液当中的一种或几种的混合，优选地，所述稀释剂的浓度为0.01～1g/ml，进一步优选为0.01g/ml。配制供试品溶液时，稀释剂采用无机盐溶液，可以解决盐酸普拉克索缓释片配制供试品溶液时易凝胶化而导致的检测困难的问题，同时能够达到主成分盐酸普拉克索和异构体的完全提取进而提高检测准确度。
11、进一步的，色谱柱采用的型号为chiral cd-ph。
12、进一步的，在色谱柱前可以添加一根保护柱，其型号优选为chiral cd-ph10mm×4.0mm，s-5。保护柱设置在色谱柱前面，供试品溶液中的少量胶凝状物质在保护柱中沉积，可以用于延长色谱柱的使用寿命，降低分析成本。
13、进一步的，本专利技术技术方案中液相色谱的分析条件包括以下(ⅰ)至(ⅶ)中的一项或者多项：
14、(ⅰ)色谱柱的规格为250mm×4.6mm，5μm，
15、(ⅱ)色谱柱的型号为chiral cd-ph或效能相当的色谱柱，
16、(ⅲ)保护柱的规格为10mm×4.0mm，s-5，
17、(ⅳ)保护柱的型号为chiral cd-ph或效能相当的色谱柱，
18、(ⅴ)色谱柱温度为40±5℃，
19、(ⅵ)流动相初始比例的变换范围：±5％，
20、(ⅶ)流速为0.7～0.9ml/min，
21、(ⅷ)进样量为50～100μl，
22、(ⅸ)检测波长为262nm。
23、在进行本技术方案摸索的过程中，出现了一些技术难点，首先是并无先例进行参考，需要研发人员自己对方法进行摸索。再者，基于本项目的特点，盐酸普拉克索缓释片因为含高粘度的辅料占比近50％，不经过预处理直接配置成的供试品水溶液会成凝胶状，无法进样或进样后堵塞色谱系统，而缓释片进口注册标准中收录的有关物质和含量方法采用的是纤维素酶和淀粉酶水解辅料的方法，本专利技术采用环糊精填料的色谱柱，供试品溶液中残留的酶会破坏色谱柱，不适用于酶解的预处理方法。而如果改用其他色谱柱，又面临无法有效检测分离出盐酸普拉克索缓释片中异构体的问题，达不到目的。
24、由于采用以上技术方案，本专利技术的有益效果在于：
25、(1)本技术方案弥补了盐酸普拉克索缓释片中异构体检测的缺失，是一种全新的异构体测定方法。
26、(2)采用环糊精为填充剂的色谱柱，主峰与异构体峰能达到基线完全分离，检测重复性和准确度良好。
27、(3)本技术方案克服了异构体检测需正相色谱法的技术偏见，流动相仅需使用乙腈、高氯酸钠水溶液即可，且为等度洗脱，试剂简单易得，相比正相试剂正己烷、二乙胺对环境和实验人员危害更小。
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1.一种新型多巴胺激动剂中异构体杂质的检测方法，所述新型多巴胺激动剂为盐酸普拉克索缓释片，所述异构体杂质结构式为：
2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相A的pH为2.0，所述流动相A与流动相B的体积比为90:10。
3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相A中的高氯酸钠缓冲液由一水合高氯酸钠加水溶解，再通过高氯酸调节pH而制成。
4.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述供试品溶液的配制方法为：取盐酸普拉克索缓释片，加崩解剂使所述片剂崩解，再用稀释剂定量稀释，过滤，取续滤液，即得。
5.如权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述崩解剂为甲醇-乙腈-磷酸（60~70:39~29:1）混合溶液。
6.如权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述稀释剂为硫酸铝、氯化钾、硫酸锌、氯化镁溶液当中的一种或几种的混合。
7. 如权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述稀释剂的浓度为0.01 ~1g/ml。
8.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在色谱柱前添加一根保
9. 如权利要求8所述的检测方法，其特征在于，所述色谱柱采用的型号为Chiral CD-Ph；所述保护柱的型号为Chiral CD-Ph。
10.如权利要求1～9任一项所述的检测方法，其特征在于，
...【技术特征摘要】
1.一种新型多巴胺激动剂中异构体杂质的检测方法，所述新型多巴胺激动剂为盐酸普拉克索缓释片，所述异构体杂质结构式为：
2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相a的ph为2.0，所述流动相a与流动相b的体积比为90:10。
3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相a中的高氯酸钠缓冲液由一水合高氯酸钠加水溶解，再通过高氯酸调节ph而制成。
4.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述供试品溶液的配制方法为：取盐酸普拉克索缓释片，加崩解剂使所述片剂崩解，再用稀释剂定量稀释，过滤，取续滤液，即得。
5.如权利要求4所述的检测方法，其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员：孙俊，钟林，何婷，
申请(专利权)人：湖南九典制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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