一种尼可地尔三聚体杂质的检测方法技术

本发明专利技术涉及一种尼可地尔三聚体杂质的检测方法，所述方法采用高效液相色谱法。本发明专利技术以十八烷基硅烷键合硅胶作为色谱柱填料，酸性水溶液和有机溶剂的混合溶液作为流动相，具有简便、专属、准确、灵敏度高的特点。本发明专利技术解决了尼可地尔三聚体杂质的分离和测定问题，为确保尼可地尔质量以及后续的药品安全性提供了技术保障。技术保障。技术保障。

【技术实现步骤摘要】
一种尼可地尔三聚体杂质的检测方法


[0001]本专利技术属于化学分析领域，特别涉及一种尼可地尔三聚体杂质的检测方法。

技术介绍

[0002]任何影响药物纯度的物质统称为杂质。杂质研究是药品研发的一项重要内容。药品在临床使用中产生的不良反应除了与药品本身的药理活性有关，与药品杂质也有很大关系。所以规范地进行杂质研究，将杂质控制在一个安全、合理的限度范围之内，直接关系到上市药品质量及安全性。
[0003]尼可地尔，化学名称为乙
‑
烟酰胺基硝酸乙酯。尼可地尔属于硝酸酯类化合物，具有阻止细胞内钙离子游离，增加细胞膜对钾离子的通透性，扩张冠状血管，持续性增加冠状动脉血流量，抑制冠状动脉痉挛的作用，在扩张冠状血管时，并不影响血压、心率、心肌收缩力以及心肌耗氧量，还具有抑制血小板聚集防止血栓形成的作用。尼可地尔临床上用于冠心病，心绞痛的治疗。
[0004]尼可地尔是烟酰胺的衍生物，其侧链有个硝基，降解过程中容易发生聚合，生成尼可地尔三聚体。
[0005]尼可地尔及相关杂质的结构式见下表：
。
[0006]关于尼可地尔三聚体杂质的检测未见报道，因此，提供一种尼可地尔三聚体杂质的检测方法具有重要意义。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于提供一种尼可地尔三聚体杂质的检测方法，该方法能够有效测定尼可地尔相关产品，如原料药、制剂中三聚体杂质的含量，具有简便、专属、准确、灵敏度
高的特点，适用于尼可地尔中三聚体杂质的的检测。
[0008]为实现上述目的，本专利技术通过以下技术方案来实现：一种尼可地尔三聚体的检测方法，采用高效液相色谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶作为色谱柱填料，酸性水溶液和有机溶剂的混合溶液作为流动相，进行等度洗脱；所述尼可地尔三聚体，结构式如下：。
[0009]进一步的，所述流动相分为流动相A、流动相B，以三氟乙酸溶液
‑
甲醇
‑
乙腈（960:25:15）为流动相A，甲醇为流动相B。
[0010]进一步的，所述流动相A中三氟乙酸溶液的pH值为2.4~2.8。
[0011]进一步的，所述流动相A与流动相B的比例为（83：17）~（87：13）。
[0012]进一步的，所述高效液相色谱法的色谱条件还包括以下Ⅰ~Ⅲ中的一项或者多项：Ⅰ.检测波长为249 nm ~259nm；Ⅱ.流动相的流速为0.7~1.0ml/min；Ⅲ.色谱柱温度为30℃
±
5℃。
[0013]进一步的，所述色谱条件优选为：Ⅰ.检测波长为254nm；Ⅱ.流动相的流速为0.8ml/min；Ⅲ.色谱柱温度为30℃。
[0014]此外，所述方法还包括将样品采用稀释剂溶解后得到样品溶液，所述稀释剂为三氟乙酸溶液
‑
甲醇
‑
乙腈（960:25:15），稀释剂中三氟乙酸溶液的pH值为2.0。
[0015]本专利技术的尼可地尔三聚体的检测方法，采用高效液相色谱法，包括如下步骤：（1）样品溶液配制：取水1000ml加入三氟乙酸1.0ml调pH值至2.0，得pH2.0的三氟乙酸溶液，取pH2.0的三氟乙酸溶液、甲醇、乙腈按960:25:15混合得到稀释剂，取样品适量用稀释剂溶解，供检测；（2）色谱检测：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，规格为4.6
×
150mm，3.0μm；流动相分为流动相A、流动相B，取水1000ml加入三氟乙酸1.0ml调pH值至2.6，得pH2.6的三氟乙酸溶液，以pH2.6三氟乙酸溶液、甲醇、乙腈按960:25:15混合作为流动相A，甲醇为流动相B，流动相A：流动相B的比例为85:15；等度洗脱；流速为0.8ml/min，柱温30℃，检测波长254nm，进样体积10
µ
l。
[0016]本专利技术的有益效果如下：1、本专利技术采用高效液相法检测尼可地尔的三聚体杂质，三聚体与相邻杂质峰能有效分离，分离度大于1.5，符合检测要求。
[0017]2、高效液相检测采集时长合理，试验效率高。
[0018]3、三聚体的回收率在99~102%之间，回收率RSD为0.39%，准确度好。
[0019]4、流动相仅为三氟乙酸溶液及少量甲醇、乙腈，不含无机盐，有效避免实验过程中无机盐析出对仪器和色谱柱造成损坏。试剂简单易得，流动相配制简单，操作方便。
附图说明
[0020]图1为实施例1空白溶剂色谱图。
[0021]图2为实施例1系统适用性溶液色谱图。
[0022]图3为实施例1供试品溶液色谱图。
[0023]图4为实施例2空白溶剂色谱图。
[0024]图5为实施例2系统适应性溶液色谱图。
[0025]图6为实施例2供试品溶液色谱图。
[0026]图7为实施例3空白溶剂色谱图。
[0027]图8为实施例3系统适应性溶液色谱图。
[0028]图9为实施例3供试品溶液色谱图。
[0029]图10为实施例4空白溶剂色谱图。
[0030]图11为实施例4系统适应性溶液色谱图。
[0031]图12为实施例4供试品溶液色谱图。
[0032]图13为实施例5空白溶剂色谱图。
[0033]图14为实施例5系统适应性溶液色谱图。
[0034]图15为实施例5供试品溶液色谱图。
[0035]图16为对比例1系统适应性溶液色谱图。
[0036]图17为对比例6系统适用性溶液色谱图。
[0037]图18为对比例7系统适用性溶液色谱图。
[0038]图19为尼可地尔三聚体线性图。
具体实施方式
[0039]为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，下面将通过实例对专利技术作进一步详细说明，下述实例仅用以解释本专利技术，并不代表本专利技术所限定的权利保护范围，本专利技术的权利保护范围以权利要求书为准。
[0040]本专利技术所用的试剂和原辅料均市售可得。
[0041]杂质检测均采用主成分外标法计算杂质含量。
[0042]实施例1本专利技术的一种尼可地尔三聚体杂质的检测方法，包括以下步骤：1、溶液配制（1）三氟乙酸溶液配制三氟乙酸溶液
①
：取水1000ml，加三氟乙酸1.0ml，用三乙胺调pH值至2.0。
[0043]三氟乙酸溶液
②
：取水1000ml，加三氟乙酸1.0ml，用三乙胺调pH值至2.60
±
0.02。
[0044]（2）稀释剂的配制取三氟乙酸溶液
①
、甲醇、乙腈按960:25:15的比例混合，即得。
[0045]（3）流动相的配制以三氟乙酸溶液
②‑
甲醇
‑
乙腈（960:25:15）为流动相A，甲醇为流动相B，将流动相A：流动相B按85:15的比例混合，即得。
[0046]（4）供试品溶液的配制
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种尼可地尔三聚体的检测方法，其特征在于，所述方法采用高效液相色谱法，色谱条件为：十八烷基硅烷键合硅胶作为色谱柱填料，以酸性水溶液和有机溶剂的混合溶液作为流动相，进行等度洗脱；所述尼可地尔三聚体，结构式如下：。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相分为流动相A、流动相B，以三氟乙酸溶液
‑
甲醇
‑
乙腈（960:25:15）为流动相A，甲醇为流动相B。3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述流动相A中三氟乙酸溶液的pH值为2.4~2.8。4.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述流动相A与流动相B的比例为（83：17）~（87：13）。5.根据权利要求1~4任一项所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的色谱条件还包括以下Ⅰ~Ⅲ中的一项或者多项：Ⅰ.检测波长为249 nm ~259nm；Ⅱ.流动相的流速为0.7~1.0ml/min；Ⅲ.色谱柱温度为30℃
±
5℃。6.根据权利要求1~4所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的色谱条件还包括以下Ⅰ~Ⅲ中的一项或者多项：Ⅰ.检测波长为254nm；Ⅱ.流动相的流速为0.8ml/min；Ⅲ.色谱柱温度为30...

【专利技术属性】
技术研发人员：王仲达，张国丽，刘嘉君，
申请(专利权)人：湖南九典制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：