一种Treg细胞的扩增培养基以及体外扩增方法技术

为克服现有培养Treg细胞方法存在Treg细胞占比低以及扩增效率低的问题，本发明专利技术提供了一种Treg细胞的扩增培养基，所述扩增培养基中加入有CD3和/或CD28抗体以及孕激素。本发明专利技术还提供了一种Treg细胞体外扩增方法，包括以下操作步骤：获取含有Treg细胞的血样，由血样分离单个核细胞；通过培养基对单个核细胞继续培养，所述培养基中加入有CD3和/或CD28抗体以及孕激素。本发明专利技术提供的Treg细胞体外扩增方法在模拟的妊娠微环境条件下，极大提高了体外扩增Treg细胞的效率。

An Amplification Medium for Treg Cells and Its Expansion Method in Vitro

【技术实现步骤摘要】
一种Treg细胞的扩增培养基以及体外扩增方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种Treg细胞的扩增培养基以及体外扩增方法。
技术介绍
Treg细胞(调节T细胞)，或称为抑制性T细胞，是免疫调节系统维持对自身抗原的耐受性和预防自身免疫疾病的T细胞亚群。Treg细胞是免疫抑制性的，并长抑制或下调效应T细胞的诱导和增殖。Treg细胞的表面标志物是CD4、CD25和Foxp3，由于效应T细胞也表达CD4和CD25，所以Treg细胞很难有效的从CD4+效应细胞中分辨。最近的研究发现，细胞因子TGF-β对于Treg从幼稚CD4+细胞分化至关重要，并且对于维持Treg稳态非常重要。有多项研究表明，对Treg细胞进行调控可以治疗自身免疫性疾病和癌症，并有利于器官移植和伤口愈合。临床上应用Treg细胞治疗疾病，单次至少需输注1×109个细胞，而外周血中的Treg细胞仅占单个核细胞的1-2％，至少需扩大培养50-100倍才能满足临床需要。而现有培养Treg细胞常用的手段为使用CD3+/CD28+磁珠或抗体对外周血分离的单个核细胞进行激活刺激，并在培养基中添加IL-2和TGF-β。但由于外周血Tre本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种Treg细胞的扩增培养基，其特征在于，所述扩增培养基中加入有CD3和/或CD28抗体以及孕激素。

【技术特征摘要】
1.一种Treg细胞的扩增培养基，其特征在于，所述扩增培养基中加入有CD3和/或CD28抗体以及孕激素。2.根据权利要求1所述的Treg细胞的扩增培养基，其特征在于，所述扩增培养基的主体为含有5％自体血清的AIM-V培养基。3.根据权利要求1所述的Treg细胞的扩增培养基，其特征在于，所述CD3和/或CD28抗体的添加量为0.5～10μg/mL，所述孕激素的添加量为0.5～10μg/mL；所述孕激素选自于黄体酮。4.根据权利要求1所述的Treg细胞的扩增培养基，其特征在于，所述扩增培养基中还添加有雌激素，所述雌激素选自17β-estradiol，所述雌激素的添加量为0.1～10ng/mL。5.根据权利要求1所述的Treg细胞的扩增培养基，其特征在于，所述扩增培养基中还添加有rIL-2和TGF-β，所述rIL-2的添加量为0.1～300μg/mL，所述TGF-β的添加量为0.1～40ng/mL。6.根据权利要求1所述的Treg细胞的扩增培养基，其特征在于，所述扩增培养基中还添加有rIL-1β、rIL-4、rIL-5、rIL-6、rIL-7、rIL-8、rIL-9、rIL-10、rIL-17和rIL-22中的一种或多种，所述rIL-1β的添加量为0.1～1ng/mL，所述rIL-4的添加量为0.01～0.5ng/mL，所述rIL-5的添加量为1～100ng/mL，所述rIL-6的添加量为1～100ng/mL，所述rIL-7的添加量为1～100pg/mL，所述rIL-8的添加量为1～100ng/mL，所述rIL-9的添加量为1～100ng/mL，所述rI...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾宪卓，党智笙，汪月，
申请(专利权)人：深圳爱生再生医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44