一种加强型高效治疗肺癌的NK免疫细胞的制备方法及应用技术

本发明专利技术实施例公开了一种加强型高效治疗肺癌的NK免疫细胞的制备方法及应用，该制备方法包括如下步骤：(a)将刺激因子包被培养瓶；(b)在人外周血液中分离单个核细胞；(c)在刺激因子包被的培养瓶中添加活化培养基，再将单个核细胞接种于刺激因子包被的培养瓶中进行培养；(d)待培养3‑4天后，将单个核细胞移入空培养瓶中，再向空培养瓶中添加活化培养基继续培养；(e)待培养7‑8天后，将单个核细胞移入培养袋中，再向培养袋中添加活化培养基继续培养，待培养14‑16天后，收集单个核细胞；上述方法将单个核细胞在体外共培养2‑3周，能使NK免疫细胞扩增500‑1000倍以上，且NK免疫细胞含量达到90％以上，并能够增强NK免疫细胞的活性，使其对K562瘤细胞的体外杀伤率达90％以上。

Preparation and application of NK immune cells for intensive and highly effective treatment of lung cancer

【技术实现步骤摘要】
一种加强型高效治疗肺癌的NK免疫细胞的制备方法及应用
本专利技术实施例涉及免疫细胞扩增
，具体涉及一种加强型高效治疗肺癌的NK免疫细胞的制备方法及应用。
技术介绍
细胞治疗是继化疗、手术、放疗之后的一个新兴生物医药领域，是治疗疾病最好的方法之一。肿瘤的细胞治疗是一种全身性的免疫疗法，是把人体自身或异体的免疫细胞，进行体外培养、增殖，形成数量众多，活性超强的免疫抗癌细胞，再回输到患者体内，发挥强大的抗癌作用。与手术、放疗及化疗对免疫损伤不同，细胞治疗能大大提高患者的抗癌免疫力，清除手术治疗不能触及的血液、淋巴或转移到其他组织中的癌细胞、甚至是休眠的癌细胞，相比之下治疗更加彻底。免疫活性细胞具有促进自身愈合和再生的能力，细胞治疗有长期的效果。用细胞治疗疾病，毒副作用小，安全有效。NK免疫细胞是机体抗肿瘤、抗病毒的主要免疫活性细胞。其他几个具有抗癌功能的细胞包括杀伤性T细胞、巨噬细胞、网状内皮细胞(DC)；由于巨噬细胞内含有很多炎症因子，目前还无法用于细胞治疗；DC是一类免疫调节细胞，主要作用是抗原加工并呈递给T细胞，再靠T细胞发挥抗癌作用；所以，DC一般是用于制备治疗性疫苗；美国F本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种加强型高效治疗肺癌的NK免疫细胞的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(a)将刺激因子包被培养瓶；(b)在人外周血液中分离单个核细胞；(c)在刺激因子包被的培养瓶中添加活化培养基，再将单个核细胞接种于刺激因子包被的培养瓶中进行培养；(d)待培养3‑4天后，将单个核细胞移入空培养瓶中，再向空培养瓶中添加活化培养基继续培养；(e)待培养7‑8天后，将单个核细胞移入培养袋中，再向培养袋中添加活化培养基继续培养，待培养14‑16天后，收集单个核细胞。

【技术特征摘要】
1.一种加强型高效治疗肺癌的NK免疫细胞的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(a)将刺激因子包被培养瓶；(b)在人外周血液中分离单个核细胞；(c)在刺激因子包被的培养瓶中添加活化培养基，再将单个核细胞接种于刺激因子包被的培养瓶中进行培养；(d)待培养3-4天后，将单个核细胞移入空培养瓶中，再向空培养瓶中添加活化培养基继续培养；(e)待培养7-8天后，将单个核细胞移入培养袋中，再向培养袋中添加活化培养基继续培养，待培养14-16天后，收集单个核细胞。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(a)中，刺激因子为CD16、TIL-9或4-1BBL。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(b)中，在人外周血液中采用密度梯度离心法分离单个核细胞。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述活化培养...

【专利技术属性】
技术研发人员：江良旗，
申请(专利权)人：中冠赛尔生物科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11