血管内皮生长因子检测试剂盒及其使用方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种血管内皮生长因子检测试剂盒及其使用方法和应用。该血管内皮生长因子检测试剂盒包括第一连接物连接的第一抗体片段、第二连接物包被的磁珠和发光标记物标记的第二抗体片段。该血管内皮生长因子检测试剂盒中用于与血管内皮生长因子特异性结合的第一抗体片段与第二抗体片段中至少一个为血管内皮生长因子抗体的Fab片段，较之传统的IgG全片段抗体，可有效避免Fc片段的非特异性结合，因而检测特异性可显著提高；使用磁珠可以增大反应的灵敏度，并可进行独立单人份检测；使用直接化学发光标记物进行抗体片段标记，在检测时，无需加入酶促反应试剂，因而所需的检测时间短，检测效率高。该检测试剂盒易于制作，可广泛推广使用。

Detection Kit of Vascular Endothelial Growth Factor and Its Application

【技术实现步骤摘要】
血管内皮生长因子检测试剂盒及其使用方法和应用
本专利技术涉及免疫生物学检测领域，尤其是涉及一种血管内皮生长因子检测试剂盒及使用方法和应用。
技术介绍
血管内皮生长因子(VascpglarEndothelialGrowthFactor，VEGF)是一种由亚基内及亚基间二硫键交联形成的同型二聚体糖蛋白，其分子量约为34-45KDa。VEGF属于血小板生长因子家族，可特异性作用于血管内皮细胞，促进血管内皮细胞的增殖，增加血管的通透性。此外，有研究证明VEGF与淋巴管的增生存在显著关系，因此VEGF也被认为是促进血管形成和引起炎症反应的重要细胞因子。VEGF检测可用于辅助检测不同原因所引发的炎症患者的炎症进展情况，对于炎症的控制具有积极的意义，同时也可用于肿瘤的筛查、辅助诊断、治疗疗效的评估和监测、预后、以及复发的监测。传统的检测VEGF的方法为板式化学发光，固相包被载体为48/96孔板等，将包被抗体直接或者通过生物素链霉亲和素系统包被到载体上，通过辣根过氧化物酶来催化底物发光，根据检测到的发光值强度判定样本中待测物含量。传统的检测方法不便于独立进行单人份的检测，并且微孔板包被抗体，反应时间本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种血管内皮生长因子检测试剂盒，其特征在于，包括第一连接物连接的第一抗体片段、第二连接物包被的磁珠和发光标记物标记的第二抗体片段；所述第一连接物与所述第二连接物能够特异性结合；所述第一抗体片段和/或所述第二抗体片段为血管内皮生长因子抗体的Fab片段，且所述第一抗体片段与所述第二抗体片段与血管内皮生长因子特异性结合的位点不同；所述发光标记物为直接化学发光标记物。

【技术特征摘要】
1.一种血管内皮生长因子检测试剂盒，其特征在于，包括第一连接物连接的第一抗体片段、第二连接物包被的磁珠和发光标记物标记的第二抗体片段；所述第一连接物与所述第二连接物能够特异性结合；所述第一抗体片段和/或所述第二抗体片段为血管内皮生长因子抗体的Fab片段，且所述第一抗体片段与所述第二抗体片段与血管内皮生长因子特异性结合的位点不同；所述发光标记物为直接化学发光标记物。2.如权利要求1所述的血管内皮生长因子检测试剂盒，其特征在于，所述第一连接物为异硫氰酸荧光素，所述第二连接物为抗异硫氰酸荧光素抗体；所述第一连接物与所述第一抗体片段的氨基端连接；所述第二连接物的氨基端与所述磁珠表面固定的羧基连接。3.如权利要求1所述的血管内皮生长因子检测试剂盒，其特征在于，Fab片段的第一抗体片段和/或第二抗体片段是在酸性条件下使用胃蛋白酶消化处理血管内皮生长因子单克隆抗体，过柱分离后使用还原剂还原得到的。4.如权利要求3所述的血管内皮生长因子检测试剂盒，其特征在于，所述血管内皮生长因子单克隆抗体与所述胃蛋白酶的质量比为1:0.04；和/或消化处理的温度为37℃，时间为6h～24h；和/或所述还原剂为巯基乙醇。5.如权利要求1所述的血管内皮生长因子检测试剂盒，其特征在于，所述发光标记物为金刚烷、鲁米诺、异鲁米诺或吖啶酯。6.如权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚继承，刘海光，吴晗琪，王婷婷，赵海英，饶志明，
申请(专利权)人：威海威高生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37