子痫前期检测和治疗的方法和组合物技术

提供了诊断、治疗和/或预防子痫前期相关的方法、试剂盒和化合物。

Methods and compositions for detection and treatment of preeclampsia

【技术实现步骤摘要】
子痫前期检测和治疗的方法和组合物本申请是申请号为200980153533.0、申请日为2009年11月2日、专利技术名称为“子痫前期检测和治疗的方法和组合物”的中国专利技术专利申请的分案申请，原申请为国际申请号为PCT/US2009/005957的国家阶段申请，该国际申请要求申请日分别为2008年10月31日、2009年1月29日，申请号分别为61/197,914、61/206,534的美国临时申请的优先权。相关专利这个专利申请要求以下两个优先权：2008年10月31日递交的题为“子痫前期是一种以错误折叠蛋白质的特定超分子聚合为特征的疾病”的美国临时专利号61/197，914；2009年1月29日递交的题为“子痫前期是一种以错误折叠蛋白质的特定超分子聚合为特征的疾病，可以利用识别特定蛋白质低聚物构象的抗体进行检测”的美国临时专利号61/206,534，两者的全部内容通过引用的方式结合到本文中。专利技术背景在美国，有6-8％的孕妇被子痫前期困扰着(Hauth,J.C.etal.,ObstetGynecol.95(1):24-8,2000)，发病率为每1000个分娩中有23.6例(Samadi,A.R.etal.,ObstetGynecol.87(4):557-63,1996.)。子痫前期被认为应当为20％的孕妇相关女性死亡负责(MacKay,A.P.etal.,PaediatrPerinatEpidemiol.19(3):206-14,2005)，是治疗性早产(medicallyindicatedpretermdelivery)(MIPTD)的主要原因(Fronterhouse,W.etal.,JMaternFetalMed.10(3):162-5,2001.)，应当为所有早产的10％负责(Fronterhouse,W.etal.,JMaternFetalMed.10(3):162-5,2001.)。子痫前期(PE)是以怀孕后20周开始出现血压升高和蛋白尿为特征的(ACOGCommitteeonPracticeBulletins.ObstetGynecol.99(1):159-67,2002.)。如果血压和蛋白尿持续增加或者出现末端器官损坏(包括胎儿生长限制)的症状，就会被认为是严重子痫前期(sPE)。严重子痫前期的过程伴随着女性身体状况的渐行性恶化，医源性分娩依然是唯一明确的治疗方法。护理医师可采取的措施包括权衡对未成熟胎儿立即分娩的风险和母子都受到子痫前期困扰的风险。对此，现在的手段是紧密监控母亲和胎儿的状态,并且以人工生产作为最终的处理方法。(Zamorski,M.A.&Green,L.A.AmFamPhysician64:263-70,216,2001.)现今，还没有能够预测或者诊断子痫前期或者预计一个特定病人体内会发展到怎样严重程度的临床检测。早期症状包括持续头痛、视线模糊或者对光的敏感性以及腹部疼痛。然而，子痫前期通常在直到发现血压升高和尿液中的蛋白质(蛋白尿)之前不会被诊断出来，而这些一般是在怀孕二十周后的常规护理检查中发现的(RobertsJM,CooperDW.Pathogenesisandgeneticsofpre-eclampsia.Lancet.2001；357(9249):53-56)。在这种诊断后子痫前期的严重症状包括癫痫、大脑出血、消耗性血管内凝血和肾衰竭可能很快就会出现。这些方法是不准确的，而且对大部分严重症状发展的可能性只提供了很少的信息。而且，目前的诊断方法需要医生的监督和有损伤性的方法，进一步拖延早期和快速的诊断，并使之复杂化。因此急需开发一个更早期更准确的不需要医师进行监督的检测和诊断子痫前期及伴随着的蛋白尿高血压紊乱的方法。
技术实现思路
如以下所述，专利申请人证明了子痫前期(PE)是一个以蛋白质错误折叠(形成异常或者错误折叠的蛋白质聚集物)为特点的局限于孕妇的病症。此外，他们还证明了颇具特征的异常蛋白质聚集物(我们也称之为错误折叠蛋白质聚集物或中间体)在尿液中出现并积累于得了子痫前期的孕妇(病人)的胎盘中并且是嗜刚果红的。这些异常蛋白质聚集物是伴随着子痫前期的出现，并且他们在尿液和/或胎盘组织中的出现也表明子痫前期的存在。在本说明书中，“错误折叠蛋白质的超分子聚集物”(supramolecularaggregatesofmisfoldedproteins)一词(简称为“超分子聚集物”)的意思包含可溶蛋白质聚集物和不可溶蛋白质聚集物。这里所描述的伴随着子痫前期出现的错误折叠蛋白质的超分子聚集物可用于判断孕妇子痫前期的出现，也可以判断一个孕妇患子痫前期的可能性或者风险。最近蛋白质组学的发现使得寻找生物标记分子和将子痫前期看做是一种错误折叠紊乱的新视角成为可能。正如这里所述的，申请人已经确定了PE中的蛋白质错误折叠的出现以及性质和水平。他们已经证明PE是以错误折叠蛋白的排泄量增加为特征的，这个现象可以使用错误折叠蛋白聚集物对于特定染料例如自组装偶氮染料刚果红(self-assemblingazodyeCongoRed(CR))的亲和力而被检测到。蛋白质构象紊乱疾病如老年痴呆症、轻链淀粉样变性和阮病毒疾病是通过由于细胞内蛋白质的防御性折叠为异常3D结构而造成的含淀粉纤维的形成和聚集形成的。专利申请人发现可溶性前淀粉蛋白低聚物(solublepre-amyloidoligomers)(纤维组装中的中间体，也就是错误折叠的蛋白质中间体)有可以导致内皮损伤和氧化性压力的蛋白质毒性作用，而这些正是在严重子痫前期(sPE)中起到致病性作用的过程。申请人发现检测到可溶性前淀粉蛋白低聚物的出现可以显示或者预示严重PE(severePE)和前严重PE(pre-severePE)(前子痫前期，也就是可以发展成为临床显性的sPE之前的亚临床状态)。所以，申请人发现和鉴定了这种孕妇特有的病症中尿里的可溶性前淀粉蛋白低聚物的性质。他们的成果是在世界上最先发现PE是以蛋白质的类淀粉蛋白组装为特征的构象紊乱疾病。这里描述的使用可以识别具有独特的折叠构象的蛋白质和蛋白质低聚物的抗体进行的进一步工作支持了错误折叠的蛋白质中间体倾向于组装为可能在临床性疾病的表现上发挥作用的孔状结构(淀粉蛋白通道)的发现。已经被诊断PE或者注定会得PE的病人的尿液和/或胎盘中积累着异常和/或过度错误折叠蛋白质聚集物，显示着这些异常蛋白质聚集物是这个疾病病理中的致病性因素。这项新发现为新的治疗(部分或全部降低疾病的发作或者发展、逆转)子痫前期的诊断和治疗策略提供了基础。例如，使用免疫学或者药理学手段阻止这样结构的形成、逆转(干扰、拆散)已经存在的超分子聚集物提供了治疗子痫前期的治疗性干涉的新途径。这样的异常蛋白聚集物(蛋白质的超分子类淀粉蛋白组装)除了对刚果红的亲和力之外的特征也在这里叙述了。在子痫前期病人的尿液和胎盘组织中发现的超分子聚集物的一个组分是SerpinA1(alpha-1抗胰蛋白酶)或SerpinA1的多肽片段。所以，子痫前期与其他疾病(如alpha-1抗胰蛋白酶缺乏症)有一个相似的特征：在alpha-1抗胰蛋白酶缺乏症里，错误折叠的alpha-1抗胰蛋白酶的积累导致了肝细胞的损伤和肝硬化(n.Engl本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.错误折叠蛋白质聚集物的标记试剂在制备用于诊断子痫前期或者预测子痫前期风险的体外诊断试剂中的应用。

【技术特征摘要】
2008.10.31 US 61/197,914;2009.01.29 US 61/206,5341.错误折叠蛋白质聚集物的标记试剂在制备用于诊断子痫前期或者预测子痫前期风险的体外诊断试剂中的应用。2.一种用于体外诊断子痫前期或者预测子痫前期风险的试剂盒，包括：错误折叠蛋白质聚集物的标记试剂；以及对蛋白质具有亲和性的支持表面。3.权利要求2中所述试剂盒，还包括用来去除未结合错误折叠蛋白聚集物的...

【专利技术属性】
技术研发人员：C·S·布希姆斯基，I·布希姆斯基，C·G·格莱柏，
申请(专利权)人：耶鲁大学，加利福尼亚大学董事会，
类型：发明
国别省市：美国,US