转氨酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种转氨酶突变体及其应用。该转氨酶突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列，突变至少包括如下突变位点之一：第3位、第5位、第8位、第25位、第32位、第45位、第56位、第59位、第60位、第84位、第86位、第164位、第176位、第178位、第180位、第187位、第197位、第206位、第207位、第242位、第245位、第319位、第324位等；或者转氨酶突变体的氨基酸序列具有发生突变的氨基酸序列中的突变位点。突变体的应用可以提高反应速率，提高酶稳定性，减少了酶用量，降低了后处理的难度，使得其能够适合工业化生产。

Transaminase mutants and their applications

【技术实现步骤摘要】
转氨酶突变体及其应用
本专利技术涉及生物
，具体而言，涉及一种转氨酶突变体及其应用。
技术介绍
手性胺广泛存在于自然界中，是合成天然产物和手性药物的重要中间体。许多手性胺都含有一个或多个手性中心，不同手性药物的药理活性、代谢过程、代谢速率以及毒性有显著差异，通常一种对映体是有效的，而另一种对映体则是低效或无效的，甚至是有毒的。因此，如何高效立体选择性地构建含手性中心的化合物在医药研发中有着重要意义。手性胺是合成多种生物活性化合物和活性药物成分的重要组成部分，据估计，目前40％的药物都是手性胺及其衍生物，如神经类药物、心血管药物、抗高血压药物、抗感染药物及疫苗等的合成都是以手性胺作为中间体(Top.Catal.2014,57,284-300)，这使得手性胺化合物成为制药业的重要组成部分。手性胺的工业生产有多种，主要依赖于烯酰胺从酮前体的金属催化氢化，过程需要昂贵的过渡金属配合物作为催化剂，由于这些过渡金属配合物资源有限，因此难以实现可持续性。同时，从酮前体经不对称合成手性胺的过程需要胺的保护和脱保护步骤，增加步骤和废物，降低收率。催化加氢还原法合成手性胺的方法中催化剂的制备困难而本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种转氨酶突变体，其特征在于，所述转氨酶突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列，所述突变至少包括如下突变位点之一：第3位、第5位、第8位、第25位、第32位、第45位、第56位、第59位、第60位、第84位、第86位、第164位、第176位、第178位、第180位、第187位、第197位、第206位、第207位、第242位、第245位、第319位、第324位、第326位、第328位、第370位、第397位、第414位、第416位、第424位、第436位、第437位及第442位。

【技术特征摘要】
1.一种转氨酶突变体，其特征在于，所述转氨酶突变体的氨基酸序列是由SEQIDNO：1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列，所述突变至少包括如下突变位点之一：第3位、第5位、第8位、第25位、第32位、第45位、第56位、第59位、第60位、第84位、第86位、第164位、第176位、第178位、第180位、第187位、第197位、第206位、第207位、第242位、第245位、第319位、第324位、第326位、第328位、第370位、第397位、第414位、第416位、第424位、第436位、第437位及第442位。2.根据权利要求1所述的转氨酶突变体，其特征在于，所述转氨酶突变体的氨基酸序列是由SEQIDNO：1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列，所述突变至少包括如下突变位点之一：L3S，V5S，I8A，I8S，F25L，F25T，Q32N，I45W，L59V，F56M，C60F，C60Y，F84V，W86H，W86L，W86P，W86N，F164M，F164V，F176Y，F176S，A178L，I180V，S187A，T197P，L206M，K207T，V242A，T245A，T245V，R319C，R324A，R324G，E326M，V328A，V328G，L370A，L370D，L370K，T397A，P414G，Q416A，E424D，E424T，A436S，A436G，A436P，A436N，A436Y，A436Q，A436E，M437S，M437A，R442T，R442S，R442Q和R442V；或者所述转氨酶突变体的氨基酸序列具有所述发生突变的氨基酸序列中的所述突变位点，且与所述发生突变的氨基酸序列具有80％以上同源性的氨基酸序列。3.根据权利要求1所述的转氨酶突变体，其特征在于，所述突变至少还包括如下突变位点组合之一：C60Y+F164V、L3S+V5S、L3S+V5S+F164V、L3S+V5S+C60Y、L3S+V5S+C60Y+F164V、I180V+L370A及L3S+V5S+L59V；优选地，所述突变至少还包括如下突变位点组合之一：F164V+C60Y、E424D+A436G、C60Y+F164V+A436P、C60Y+F164V+A436N、W86P+F164V、F25L+L59V、F25T+F164V、C60Y+F164V+A436Y、C60Y+F164V+A436Q、C60Y+F164V+A436E、F164V+M437A、I8A+V328A、I8S+F164V、C60Y+F164V+L370A、C60Y+F164V+L370D、C60Y+F164V+L370K、I45W+F164V、C60Y+F164V+F176Y、C60Y+F176S+F164V、L3S+V5S+C60Y+F164V+L370A、C60Y+F164V+R442S、C60Y+F164V+R442Q、L3S+V5S+S187A+L370A+E424D、C60Y+F164V+R442T、L3S+V5S+E424D+L370A、L3S+V5S+F164V+C60Y+I180V+L370A、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+L370A、L3S+V5S+F164V+T197P+L370A、L3S+V5S+V328A+E424D、L3S+V5S+L59V+L206M+L370A、L3S+V5S+L370A+E424D、L3S+V5S+F164V+K207T+L370A、L3S+V5S+S244A+L370A、L3S+V5S+F164V+T245A+L370A、L3S+V5S+F164V+T245V+V328A、L3S+V5S+F164V+L370A+T397A、L3S+V5S+L59V+F164V+R319C+L370A+T397A、L3S+V5S+L59V+F164V+L370A、L3S+V5S+L59V+L370A+A436G+Q416A、L3+V5S+L59V+L370A+A436G+R442Q、L3S+V5S+L59V+V328A+L370A+R442Q、L3S+V5S+L59V+L370A+R442L、L3S+V5S+L59V+C60Y+F164V+L370A+R442V、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A、L3S+V5S+C60Y+F164V+I180V+S187A+L370A+R442L。4.根据权利要求1至3中任一项所述的转氨酶突变体，其特征在于，所述突变至少还包括如下突变位点之一：第7位、第32位、第96位、第164位、第171位、第186位、第252位、第384位、第389位、第391位、第394位、第404位、第411位、第420位、第423位、第424位、第442位、第452位及第456位；优选地，所述突变至少还包括如下突变位点之一：K7N、Q32L、K96R、V164L、E171D、S186G、V252I、Y384F、I389M、I389F、D391E、N394D、L404Q、L404Q、G411D、Q420R、Q420K、M423K、E424R、E424K、E424Q、R442H、R442L、G452S及K456R。5.根据权利要求4所述的转氨酶突变体，其特征在于，所述突变至少包括如下突变位点组合之一：G411D+S186G、G411D+S186G+Y384F、G411D+S186G+Y384F+V164L、G411D+S186G+Y384F+V164L+I389F及G411D+S186G+Y384F+V164L+I389F+V252I；优选地，所述突变至少还包括如下突变位点组合之一：L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+Y384F+G452S、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+S186G+Q420R、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+M423K、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+Q420K+E424R、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+K7N+E424Q、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+D391E、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+Q32L+E171D、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+I389M、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+I389F+N394D、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+L404Q、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+I389F+L404Q、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+V164L+K456R、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+K96R、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+Q32L+R442H、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+R442L、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+V252I、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+E424K、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A、L3S+V5S+C60Y+F164V+Q420R+L370A、L3S+V5S+F164V+C60Y+L370A+G452S、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+G411D+E424K、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+Y384F+L404Q、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+E424K+G411D、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+G411D+S186G、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+S186G+Q420R、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+I180V+L370A+G411D、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+G411D+V164L+I389F+E424Q+K96R、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+V164L+I389F+L404Q、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+I180V+L370A+G411D+M423K、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+G411D+S186G+I389F+L404Q、L3S+V5S+C60Y+F164L+A178L+S187A+I180V+L370A+G411D+S186G+Y384F、L3S+V5S+C60Y+F164V+A178L+S187A+I180V+L370A+G411D+S186G+Y384F+V164...

【专利技术属性】
技术研发人员：洪浩，詹姆斯·盖吉，张娜，刘芳，颜俊杰，刘冶，王祖建，
申请(专利权)人：凯莱英生命科学技术天津有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12