一种监测miRNA表达变化报告基因影像探针及其构建方法技术

本发明专利技术公开了一种监测miRNA表达变化报告基因影像探针及其构建方法。所述的探针包括pcDNA3.1载体、基因片段A和B以及pG5 luc载体，所述的基因片段A、B按照A‑B顺序与线性化的pcDNA3.1载体重组，所述的片段A由CopT、BD、AD和4xmiR targets序列组成，所述的片段B为CopA，所述的pG5 luc载体包含Fluc基因。本发明专利技术的报告基因分子影像探针可以实时监测活体miRNA的表达变化，为活体miRNA表达的动态变化提供了一种实时、无创的监测工具。

A Reporter Gene Image Probe for Monitoring the Change of MicroRNA Expression and Its Construction Method

【技术实现步骤摘要】
一种监测miRNA表达变化报告基因影像探针及其构建方法
本专利技术属于分子生物学和基因工程
，涉及一种监测miRNA表达变化的报告基因影像探针及其构建方法，具体为一种CopT-BD-AD-4xmiRtargets-CopA/pG5luc报告基因影像探针系统的构建及其在体分子显像监测。
技术介绍
微小RNA(miRNA)是一类由长度约为22个核苷酸组成的小分子单链非编码RNA。它们广泛存在于真核生物中，具有高度保守性及时空特异性，通过与mRNA的3’端非编码区(3’UTR)互补配使mRNA发生降解或干扰其转录后翻译，从而实现对靶基因转录后调控。miRNA参与细胞增殖、凋亡、分化等多种生物学进程，超过30％的基因受到miRNA调控。miRNA与细胞分化密切相关，如miR-9和miR-124a与神经分化过程密切相关，miR-1和miR-133与肌肉分化过程密切相关，并随着分化进程的变化，其表达也会发生变化。酵母表达质粒转录激活因子的DNA结合结构域(bindingdomain,BD)和转录激活结构域(activationdomain，AD)形成的杂合蛋白可激活pG5luc载体(该载体本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种监测miRNA表达变化的报告基因影像探针，其特征在于，所述的探针包括pcDNA3.1载体、基因片段A和B以及pG5 luc载体，所述的基因片段A、B按照A‑B顺序与线性化的pcDNA3.1载体重组，所述的片段A由CopT、BD、AD和4xmiR targets序列组成，所述的片段B为CopA，所述的pG5 luc载体包含Fluc基因。

【技术特征摘要】
1.一种监测miRNA表达变化的报告基因影像探针，其特征在于，所述的探针包括pcDNA3.1载体、基因片段A和B以及pG5luc载体，所述的基因片段A、B按照A-B顺序与线性化的pcDNA3.1载体重组，所述的片段A由CopT、BD、AD和4xmiRtargets序列组成，所述的片段B为CopA，所述的pG5luc载体包含Fluc基因。2.根据权利要求1所述的一种监测miRNA表达变化的报告基因影像探针，其特征在于，所述的片段A的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，所述的片段B的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。3.根据权利要求1所述的一种监测miRNA表达变化的报告基因影像探针，其特征在于，所述的探针的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示。4.权利要求1所述的监测miRNA表达变化的报告基因影像探针的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：1)用NheI和HindIII酶切载体pcDNA3.1，使其线性化；2)P...

【专利技术属性】
技术研发人员：王福，陈思，王希楠，郑海锋，解锦荣，毛文杰，郭镔，施潇蕊，
申请(专利权)人：西安电子科技大学，
类型：发明
国别省市：陕西,61