抗二肽基肽酶4的单克隆抗体及其制备方法和用途技术

本发明专利技术涉及免疫学、药学及医学相关领域，公开了基于二肽基肽酶4(DPP‑4)的B细胞表位制备杂交瘤细胞株和单克隆抗体的方法和用途，特别涉及用分子内载体肽来偶联DPP‑4的B表位来制备小分子抗原肽并通过合成方法快速获得，其免疫小鼠产生强免疫应答，可用于制备免疫脾脏淋巴细胞，制备杂交瘤细胞和抗体等，本发明专利技术单克隆抗体由杂交瘤细胞株(保藏编号为CCTCC No：C2017227)分泌，为Th2型抗体，在小鼠为IgG1，其抑制DPP‑4酶活性，特异结合DPP‑4，可开发DPP‑4检测试剂及DPP‑4抑制剂，其显著降血糖和尿酸及肌酐血脂四项、升高GLP‑1、调节氧化应激和免疫平衡由Th1趋向Th2，减轻胰腺炎症，可制备药物用于防治糖尿病及其并发症、高尿酸、痛风、肾肝病、高血脂、AS、心血管疾病及Th1偏高相关疾病。

Monoclonal antibodies against dipeptidyl peptidase 4 and their preparation methods and Applications

【技术实现步骤摘要】
抗二肽基肽酶4的单克隆抗体及其制备方法和用途
本专利技术涉及免疫学、药学及医学相关领域。本专利技术涉及抗二肽基肽酶4(Dipeptidylpeptidase4，DPP-4)的单克隆抗体及其制备方法和用途，特别涉及用人二肽基肽酶4的B细胞表位作为半抗原，还特别涉及通过用一个小分子的分子内载体肽来偶联人二肽基肽酶4(DPP-4)的B细胞表位肽来制备多表位肽或抗原肽或肽免疫原并通过合成快速获得，肽免疫原免疫小鼠能产生强免疫应答，可用于制备免疫脾脏淋巴细胞，此免疫脾脏淋巴细胞可用于制备杂交瘤细胞制备单克隆抗体或通过已有技术提取其基因通过抗体库技术或基因工程来制备多种抗体。制备的单克隆抗体特异结合和抑制DPP-4活性，可开发DPP-4检测试剂及DPP-4抑制剂，所述单克隆抗体属于Th2亚型抗体(Th2亚型抗体在小鼠为IgG1亚型抗体，在人为IgG2a亚型抗体)，此单克隆抗体能抑制DPP-4活性，特异的和DPP-4及含此B细胞表位的肽或蛋白结合，可以开发DPP-4检测试剂及DPP-4抑制剂，所述单克隆抗体为Th2型抗体，能特异性识别结合及抑制DPP-4，升高GLP-1和胰岛素，降低胰高血糖素本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株分泌抗二肽基肽酶4(DPP‑4)的单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分类命名为：杂交瘤细胞株CPULTM‑4E9，于2017年10月24日保藏于中国武汉市武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO：C2017227。

【技术特征摘要】
1.一株分泌抗二肽基肽酶4(DPP-4)的单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分类命名为：杂交瘤细胞株CPULTM-4E9，于2017年10月24日保藏于中国武汉市武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCNO：C2017227。2.由权利要求1所述的杂交瘤细胞株分泌的抗二肽基肽酶4的单克隆抗体mAb，命名为CPU-KD4。3.权利要求2所述的单克隆抗体CPU-KD4的制备技术中免疫脾脏淋巴细胞的获得方法：是用二肽基肽酶4的B细胞表位D41(氨基酸序列见SEQIDNO.3)与分子内载体肽(含SEQIDNO.1和SEQIDNO.2，2个肽连接方法多样)偶联来制备小分子抗原肽或肽免疫原D41-IA2(5)-P2-1(氨基酸序列见SEQIDNO.4)并通过合成快速方便获得，小分子抗原肽不需偶联BSA或KLH，可直接作为免疫原免疫小鼠而产生强免疫应答，免疫动物可用于制备免疫脾脏淋巴细胞，此免疫脾脏淋巴细胞可用于制备杂交瘤细胞来制备单克隆抗体或提取免疫脾脏淋巴细胞基因通过常用抗体库或基因工程来制备多种抗体，抗原肽可用于筛选杂交瘤细胞克隆。4.根据权利要求3获得的免疫脾脏淋巴细胞通过杂交瘤技术制备杂交瘤细胞株CPULTM-4E9，再制备抗二肽基肽酶4的单克隆抗体CPU-KD4，此抗体为Th2型抗体，在小鼠为IgG1亚型，能特异性识别结合及抑制二肽基肽酶4活性，能升高GLP-1和胰岛素，降低胰高血糖...

【专利技术属性】
技术研发人员：李泰明，顾小骞，焦瑞，方金芝，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32