用于癌症免疫疗法的组合物和方法技术

本发明专利技术提供用于治疗癌症的用于联合疗法的组合物和方法，该联合疗法包括向有需要的患者施用耐药性免疫疗法、免疫检查点抑制剂和化学治疗。

Compositions and methods for cancer immunotherapy

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于癌症免疫疗法的组合物和方法相关申请本申请要求2016年8月18日提交的第62/376,680号美国临时专利申请的优先权，上述申请的全部教导通过引用并入本文。
技术介绍
尽管在癌症检测和治疗领域已经取得了显著进展，但晚期和转移性癌症的治疗仍然是一项重大挑战。细胞毒性化学治疗剂仍然是最常用和成功使用的抗癌治疗之一。然而，它们不是一致有效的，并且这些试剂与引入的新疗法诸如免疫疗法是存在问题的。例如，由于药剂的非特异性毒性特征，化学治疗剂可能对强健的抗肿瘤免疫活性细胞的建立是有害的。靶向细胞增殖途径的基于小分子的疗法也可能妨碍抗肿瘤免疫的建立。在免疫治疗方法中发现的进一步并发症是肿瘤细胞通过下调MHC-I类抗原表达，在肿瘤或效应细胞表面呈递免疫检查点分子或将可溶性肿瘤配体脱落到血浆中导致效应细胞受体下调，从而超过身体免疫反应的能力。这些过程导致肿瘤看起来正常，但导致逃避免疫系统攻击。然而，如果暂时性有效的化学治疗方案可以与新的免疫活性细胞疗法和免疫检查点抑制剂组合，那么可以实现抗肿瘤疗法的显著改善。已经鉴定了几种可以潜在地用于赋予靶向免疫细胞耐药性的耐药性基因，并且基因治疗技术的进步使得可以测试在耐药性基因治疗研究中使用这些基因的可行性。例如，shRNA策略用于降低次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT)的水平，其对6-硫鸟嘌呤(6-thioquanine)具有抗性。此外，编码人烷基鸟嘌呤转移酶(hAGT)的耐药性基因MGMT是一种DNA修复蛋白，其对诸如亚硝基脲和替莫唑胺(TMZ)的烷化剂的细胞毒性作用具有抗性。6-苄基鸟嘌呤(6-benzylguanine)(6-BG)是AGT的抑制剂，其可增强亚硝基脲的毒性，并与TMZ共同施用以增强该药剂的细胞毒性作用。编码AGT变体的MGMT的几种突变形式对6-BG的失活具有高度抗性，但保留了修复DNA的能力。基于P140KMGMT的耐药性基因疗法已显示赋予小鼠、犬、恒河猴和人类细胞、尤其是造血细胞的化学保护。肿瘤细胞通常表达揭示其癌性的细胞表面分子。然而，这些相同的细胞也可以在其表面上呈现模拟正常细胞的免疫检查点分子，从而避免免疫攻击。免疫检查点通常通过特异性受体/配体对(包括CTLA-4和PD-1)之间的相互作用来调节。CTLA-4、PD-1及其配体是共信号分子的CD28-B7家族的成员，其在T-细胞功能和其他细胞功能的所有阶段中起重要作用。PD-1受体在活化的T-细胞(和B细胞)表面表达，并且在正常情况下与其在抗原呈递细胞(例如树突细胞或巨噬细胞)表面上表达的配体(PD-L1和PD-L2)结合。这种相互作用将信号发送到T-细胞并基本上将其关闭或抑制它。癌细胞通过在其表面上驱动高水平的PD-L1表达来利用该系统。这允许它们获得对PD-1途径的控制并关闭T-细胞表达可能进入肿瘤微环境的PD-1，从而抑制抗癌免疫应答。检查点抑制剂通过阻断受体/配体对(例如CTLA-4或PD-1)使T-细胞产生免疫应答，从而提供了揭露肿瘤细胞的手段。已获得美国食品和药物管理局(U.S.FoodandDrugAdministration)加速批准的六种免疫检查点抑制剂是伊匹单抗(ipilimumab)派姆单抗(pembrolizumab)阿特珠单抗(atezolizumab)度伐单抗(durvalumab)(IMFINZITM)、阿维鲁单抗(avelumab)(BAVENCIO)和纳武单抗(nivolumab)是一种单克隆抗体，可靶向T-细胞表面的CTLA-4，并被批准用于治疗黑色素瘤。靶向PD-L1，用于治疗黑色素瘤和非小细胞肺癌。也靶向PD-1，并被批准用于治疗黑色素瘤、肾细胞癌和非小细胞肺癌。可能被证明有效的其他检查点靶标为TIM-3、LAG-3、各种B-7配体、CHK1和CHK2激酶、BTLA、A2aR等。通常，与检查点抑制剂治疗相关的活性和高客观缓解率(ORR)与具有高突变负荷的肿瘤有关。突变频率通常与高的新抗原信号传导相关，导致肿瘤免疫原性增加。2017年5月，美国食品和药物管理局(FDA)准予加速批准派姆单抗用于成人和儿童患者，他们罹患无法切除的或已转移的、在先前的治疗之后已经进展的微卫星不稳定性高(MSI-H)或错配修复缺陷(dMMR)实体瘤，并且对替代治疗选择不满意，或者罹患在用氟嘧啶、奥沙利铂和伊立替康治疗后已经进展的MSI-H或dMMR结肠直肠癌。这是FDA首次批准用于组织/部位不可知的指征。dMMR患者存在缺陷，无法纠正导致超突变状态的基因突变。临床数据已经证明，在诸如结肠直肠癌的癌症中，用检查点抑制剂治疗的ORR通常为0％，由于其高突变负荷，dMLR患者的ORR增加至62％(LeDT,etal.ASCO2015.AbstractLBA100)。同样，Hodges等人的分析(Neuro-Oncology,19(8),1047-1057,2017)证明成胶质细胞瘤(GBM)通常具有低突变负荷，仅分析了3.5％的那些GBM，证明了高肿瘤突变负荷。然而，在那些具有dMMR的GBM患者中，Boufett等人发现它们具有比其他高级别肿瘤更高的突变负荷(JCO,201634:19,2206-2211)。Boufett等人描述了两名患有复发性多病灶性GBM的儿科患者的显著和持久的反应，这些患者在用单药剂纳武单抗治疗时以目前的标准疗法很难治疗。dMMR突变使这两名患者对检查点抑制有反应，但他们对标准疗法的反应失败也可能是由于dMMR。这支持了表明通常GBM不具有显著的免疫原性并且当用检查点抑制剂治疗时不太可能表现出显著的ORR的数据。自2005年以来，第一线的GBM的标准化护理治疗一直是Stupp协议，涉及用化学疗法替莫唑胺(TMZ)的治疗(Stuppetal.,NEnglJMed2005；352:987-996March10,2005)。TMZ是一种烷化剂，可导致双链DNA断裂。TMZ通过在DNA中产生O6-甲基鸟嘌呤(O6MeG)加合物起作用，这将导致错配和形成GC至AT点突变(Roosetal.,CancerLetters332(2013)237)。用TMZ有效治疗的抗性机制是O6-甲基鸟嘌呤-甲基转移酶(MGMT)，其从O6位置去除甲基加合物。在具有功能性MMR系统的细胞中，GC至AT点突变将在两次DNA复制循环后引起双链断裂。正如Roos所说，“O6MeG不直接引发细胞凋亡；它需要MMR和DNA复制”。因此，那些新诊断的GBM患者，由于高突变负荷和新抗原负担，最有可能对免疫疗法和/或检查点抑制作出反应，也是最不可能对常规烷化化学治疗有反应的患者。这种认识将解释观察到MMR和MLH1突变实际上是GBM患者存活的阴性预后因子(Draaismaetal.,ActaNeuropatholCommun.2015；3:88)。这些患者对用TMZ的常规治疗没有应答。本专利技术提供了针对该挑战的解决方案。虽然由dMMR引起的超突变可以导致更强的免疫原性(immunogeneic)信号传导，但它们也可能导致对标准化学治疗剂的低反应和低存活率。通过引起双链DNA断裂，TMZ已经证明能够驱动肿瘤中的超突变和更强的免疫原性信号传导。通过采用化学治疗来人工创建超突变，可以保持肿瘤对本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于治疗有需要的患者的癌症的方法，其包括以下步骤：i.获得包含γδT‑细胞、天然杀伤(NK)细胞或其任何组合的分离的细胞毒性免疫细胞群，其中所述细胞毒性免疫细胞群经遗传修饰以对一种或多种治疗剂具有抗性；ii.向患者施用有效量的一种或多种治疗剂，其中步骤(i)的遗传修饰的细胞毒性免疫细胞对所述治疗剂具有抗性；iii.向患者施用步骤(i)的经遗传修饰的细胞毒性免疫细胞群；和iv.向患者施用有效量的至少一种免疫检查点抑制剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.08.18 US 62/376,6801.一种用于治疗有需要的患者的癌症的方法，其包括以下步骤：i.获得包含γδT-细胞、天然杀伤(NK)细胞或其任何组合的分离的细胞毒性免疫细胞群，其中所述细胞毒性免疫细胞群经遗传修饰以对一种或多种治疗剂具有抗性；ii.向患者施用有效量的一种或多种治疗剂，其中步骤(i)的遗传修饰的细胞毒性免疫细胞对所述治疗剂具有抗性；iii.向患者施用步骤(i)的经遗传修饰的细胞毒性免疫细胞群；和iv.向患者施用有效量的至少一种免疫检查点抑制剂。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述癌症选自神经胶质瘤、成胶质细胞瘤、淋巴瘤、黑色素瘤、成神经细胞瘤、非小细胞肺癌、肾细胞癌和小细胞肺癌。3.根据权利要求2所述的方法，其中所述癌症为神经胶质瘤、成胶质细胞瘤或成神经细胞瘤。4.根据权利要求1所述的方法，其中所述分离的细胞毒性免疫细胞包括γδT-细胞、NK细胞，并且进一步任选地包括其他免疫活性细胞。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述分离的细胞毒性免疫细胞经遗传修饰以编码烷基鸟嘌呤转移酶(AGT)、P140KMGMT、O6甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)、L22Y-DHFR、胸苷酸合成酶、二氢叶酸还原酶或多重耐药性-1蛋白(MDR1)。6.根据权利要求5所述的方法，其中所述分离的细胞毒性免疫细胞经遗传修饰以编码P140KMGMT。7.根据权利要求1所述的方法，其中所述免疫检查点抑制剂靶向CTLA-4、PDL1、PDL2、PD1、B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、CD160(也称为BY55)、CGEN-15049、CHK1激酶、CHK2激酶、A2aR、OX40或B-7家族配体。8.根据权利要求7所述的方法，其中所述检查点抑制剂靶向PD-1、PDL1、PDL2或CTLA-4。9.根据权利要求1所述的方法，其中所述免疫检查点抑制剂选自曲美母单抗、抗OX40、PD-L1单克隆抗体(抗B7-H1；MEDI4736)、MK-3475、/纳武单抗、CT-011、BY55单克隆抗体、AMP224、BMS-936559、MPLDL3280A、MSB0010718C、/伊匹单抗和派姆单抗10.根据权利要求1所述的方法，其中所述治疗剂选自烷化剂；代谢拮抗剂；DNA去甲基化剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：史蒂文·A·里希，威廉·何，劳伦斯·S·兰姆，
申请(专利权)人：UAB研究基金会，因赛瑟斯医疗有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US