一种利用大豆和黑豆发酵制备纳豆激酶的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用大豆和黑豆发酵制备纳豆激酶的方法，包括大豆和黑豆预处理、固体发酵培养基制备、蒸煮、纳豆菌种子液制备、接种发酵、后熟、分离纯化：大豆和黑豆的配比为大豆：黑豆＝5:1‑1:1，清洗浸泡为20‑25℃浸泡8‑10小时，破碎采用破碎机破碎大豆，破碎度为每个大豆破裂为5‑10片。本发明专利技术具有工艺简单、流程短、成本低的特点，适合大中小不同规模豆制品加工企业。

A Method for Preparing Nattokinase by Fermentation of Soybean and Black Bean

【技术实现步骤摘要】
一种利用大豆和黑豆发酵制备纳豆激酶的方法
本专利技术涉及纳豆激酶制作
，具体为一种利用大豆和黑豆发酵制备纳豆激酶的方法。
技术介绍
纳豆激酶的分离纯化工艺常采用传统的蛋白质纯化方法，如：有机溶剂沉淀、盐析、离心、凝胶色谱、疏水色谱、离子交换色谱等纯化方法。从固体发酵纳豆中分离纯化纳豆激酶的一种先前技术的工艺为：生理盐水抽提纳豆激酶，加入硫酸铵(硫酸氨铵)在25％饱和度下过夜，再于4℃，7000转/分钟离心40分钟，收集上清上5Butyl-Toyoperal疏水柱，收集活性峰再次进行饱和度25％的硫酸铵沉淀，取上清进行饱和度60％的硫酸铵沉淀，然后上CM-Toyopearl离子交换柱，收集活性峰再上Sephadex-G50，收集活性峰并透析过夜。采用上述工艺制造纳豆激酶，收率低，最终获得的产品很少；为此我们提出一种利用大豆和黑豆发酵制备纳豆激酶的方法，用以解决上述的问题。
技术实现思路
本专利技术提供一种利用大豆和黑豆发酵制备纳豆激酶的方法可以有效解决上述
技术介绍
中的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种利用大豆和黑豆发酵制备纳豆激酶的方法，包括大豆和黑豆预处理、固体本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用大豆和黑豆发酵制备纳豆激酶的方法，其特征在于，包括大豆和黑豆预处理、固体发酵培养基制备、蒸煮、纳豆菌种子液制备、接种发酵、后熟、分离纯化：A.所述大豆和黑豆预处理为：大豆和黑豆以一定配比混合、清洗浸泡、适度破碎；B.所述固体发酵培养基制备为：发酵培养基质量组成为：预处理大豆和黑豆85％—90％、葡萄糖10％‑15％、硫酸镁0.5％‑5％、氯化钙0.3％‑3％，PH值为7.1‑7.5；C.所述蒸煮为：采用蒸煮罐蒸煮；D.所述纳豆菌种子液制备为：斜面培养基配制：琼脂16g/L、蛋白胨8g/L、牛肉粉3g/L、氯化钠2.5g/L，121℃灭菌20分钟；种子液培养基配制：蛋白胨8g/L、牛...

【技术特征摘要】
1.一种利用大豆和黑豆发酵制备纳豆激酶的方法，其特征在于，包括大豆和黑豆预处理、固体发酵培养基制备、蒸煮、纳豆菌种子液制备、接种发酵、后熟、分离纯化：A.所述大豆和黑豆预处理为：大豆和黑豆以一定配比混合、清洗浸泡、适度破碎；B.所述固体发酵培养基制备为：发酵培养基质量组成为：预处理大豆和黑豆85％—90％、葡萄糖10％-15％、硫酸镁0.5％-5％、氯化钙0.3％-3％，PH值为7.1-7.5；C.所述蒸煮为：采用蒸煮罐蒸煮；D.所述纳豆菌种子液制备为：斜面培养基配制：琼脂16g/L、蛋白胨8g/L、牛肉粉3g/L、氯化钠2.5g/L，121℃灭菌20分钟；种子液培养基配制：蛋白胨8g/L、牛肉膏6g/L、氯化钠2.5g/L、葡萄糖12g/L、酵母膏6g/L，121℃灭菌20分钟；E.所述接种发酵为：按照6％的比例加入发酵种子液，36-40℃发酵24h-30h；F.所述后熟为：后熟温度为4℃，后熟时间为18-24h；G.所述分离纯化为：包括浸提、过滤、淳沉步骤。2.根据权利要求1所述的一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：金兴仓，徐永苗，林华良，金锋，陆庆方，
申请(专利权)人：江苏博晟康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32