利用角蛋白酶进行金纳米粒子制备的方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种生物法制备金纳米粒子，即采用角蛋白酶进行金纳米粒子制备的方法，属于工业生物技术领域。基于本专利所采用的角蛋白酶突出的还原性能，将角蛋白酶液加入到配制好的不同浓度氯金酸溶液中，通过控制氯金酸溶液浓度、酶液添加量和反应时间等因素逐步进行合成反应优化，成功制备获得金纳米粒子，粒径为30nm左右，Zeta电位为‑13mV。该生物法制备金纳米粒子，可以有效解决传统的物理法所需设备的限制和化学法存在环境污染等问题，同时，该方法周期短，工艺简单，适合于工业化大规模的生产。另外，金纳米粒子独特的光学特性以及增强效应，使其被广泛应用于生物及医学检测等领域，具有良好的应用前景。

Preparation and Application of Gold Nanoparticles by Keratinase

The invention discloses a biological method for preparing gold nanoparticles, that is, a method for preparing gold nanoparticles by keratinase, belonging to the field of industrial biotechnology. Based on the prominent reductive properties of keratinase used in this patent, keratinase solution was added to the prepared chlorauric acid solution of different concentrations. The synthesis reaction was optimized by controlling the concentration of chlorauric acid solution, the amount of enzyme solution and reaction time. Gold nanoparticles were successfully prepared with a particle size of about 30 nm and Zeta potential of 13 mV. The biological preparation of gold nanoparticles can effectively solve the problems of equipment limitation required by traditional physical methods and environmental pollution in chemical methods. At the same time, this method has short cycle, simple process and is suitable for large-scale industrial production. In addition, the unique optical properties and enhancement effect of gold nanoparticles make them widely used in biological and medical detection and other fields, and have good application prospects.

【技术实现步骤摘要】
利用角蛋白酶进行金纳米粒子制备的方法及其应用
本专利技术属于工业生物
，涉及一种生物法制备金纳米粒子技术，即采用角蛋白酶法进行金纳米粒子的生物制备。
技术介绍
角蛋白酶是一种能分解普通蛋白酶难以降解的不溶性角蛋白底物的特殊蛋白酶。近年来，角蛋白酶在各领域的应用越来越广泛。刘柏宏等人从菌株StenotrophomonasmaltophiliaBBE11-1所产角蛋白酶的研究发现，该菌的角蛋白降解活性由三种酶共同作用，其中一种酶蛋白(K3：16kDa)具有二硫键还原能力(两种产角蛋白酶菌株的酶学性质研究及其发酵优化,中国生物发酵产业年会论文集,上海,2013)；黄林等对弗氏链霉菌S-221变种降解角蛋白的生化机制进行研究发现，该菌诱导产生的角蛋白酶是一种复合蛋白酶,含有二硫键还原酶，具有较高的二硫键还原活性(链霉菌降解角蛋白的生化机制研究.微生物学通报,2006,4:36-42)。近年来，随着金纳米制备技术的不断发展，金纳米的应用越来越广泛。金纳米具有良好的光学特性、生物相容性及催化活性等独特的物理、化学性质，被广泛用于化学、生物、医药、食品等重要领域：因金纳米粒子有着易制备，表征本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于金纳米粒子制备的重组角蛋白酶及其发酵产酶方法，其特征在于：(1)采用重组枯草芽孢杆菌进行液体发酵，发酵培养基组成成分包括：甘油5‑50g/L，复合氮源5‑50g/L由酵母粉：蛋白胨重量比例为1:4‑2:1构成，磷酸盐10‑200mmol/L，无机盐1‑10mmol/L，pH6.0‑8.0；(2)发酵培养条件为：培养温度20‑40℃、转速为50‑300rpm，发酵周期为15‑60h。

【技术特征摘要】
1.一种用于金纳米粒子制备的重组角蛋白酶及其发酵产酶方法，其特征在于：(1)采用重组枯草芽孢杆菌进行液体发酵，发酵培养基组成成分包括：甘油5-50g/L，复合氮源5-50g/L由酵母粉：蛋白胨重量比例为1:4-2:1构成，磷酸盐10-200mmol/L，无机盐1-10mmol/L，pH6.0-8.0；(2)发酵培养条件为：培养温度20-40℃、转速为50-300rpm，发酵周期为15-60h。2.一种利用角蛋白酶进行金纳米粒子制备的方法，其特征在于：将权利要求1所述的重组角蛋白酶置于氯金酸溶液中...

【专利技术属性】
技术研发人员：虞海惠，史劲松，许正宏，龚劲松，李会，李恒，叶金鹏，邢文慧，刘爽，翟珅，曾云凤，孙雅婕，王雨，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32