一种采用免标记银纳米簇分子信标的方法痕量检测ATP技术

本发明专利技术公开了一种免标记银纳米簇分子信标的方法痕量检测ATP。一种检测ATP的荧光生物传感器，它涉及荧光生物传感器的制备方法，用途及检测方法。本发明专利技术的目的是：构建并制备一种新型的可用于检测ATP的荧光生物传感器，将银纳米簇材料与DNA T4连接酶相结合，通过对显著下降的荧光强度的检测实现对ATP的痕量检测。

Trace Detection of ATP Using Label-Free Silver Nanocluster Molecular Beacon

【技术实现步骤摘要】
一种采用免标记银纳米簇分子信标的方法痕量检测ATP
本专利技术涉及荧光生物传感器技术
，更具体的说是涉及免标记银纳米簇分子信标的方法检测痕量ATP。
技术介绍
目前，三磷酸腺苷(AdenosineTri-Phosphate,ATP）在所有的生物细胞体中都存在，且ATP是所有生物体能量的源泉，能够帮助生物体完成新陈代谢，并且能够为生物体提供能量。对生物体的存在扮演着很重要的作用。ATP含量的多少也直接影响生物体的健康，因此建立一种快速准确检测ATP的方法是十分重要的。传统的检测ATP的方法主要有生物发光法、化学发光法、色谱法、电化学分析法和分子信标法。荧光分析是一种先进的分析方法，它比电子探针法、质谱法、光谱法、极谱法等都应用的较广泛和普及，这同荧光分析具有很多优点分不开的。荧光分析所用的设备较简单，如目测荧光仪和荧光光度计构造非常简单完全可以自己制造。比起质谱仪、极谱仪和电子探针仪来它在造价上要便宜很多倍，而且荧光分析的最大特点是：分析灵敏度高、选择性强和使用简便。近年来,分子信标因具有灵敏度高,特异结合性好等优点而被广泛应用于生物学和生物分析领域。在注重功能基因研究的后基因组本文档来自技高网...

【技术保护点】
1. 用于免标记检测的多功能银纳米簇分子信标的设计与合成的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：（1）制备双链DNA模板：①将单链DNA AA(浓度为10µM～100µM)与50µL 100mmol L

【技术特征摘要】
1.用于免标记检测的多功能银纳米簇分子信标的设计与合成的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：（1）制备双链DNA模板：①将单链DNAAA(浓度为10µM～100µM)与50µL100mmolL-1的Tris缓冲溶液（PH7.6）混合，在25OC下反应10min；②将单链DNAC1（浓度为10µM～100µM）和DNAC2（浓度为10µM～100µM）分别加入到该体系中；在25OC下反应10min；③然后，将DNAT4连接酶（5U）1uL、不同浓度的10µLATP、分别加入到该体系中；在37OC下反应20min；（2）合成DNA-Ag纳米簇①将50µL的Tris缓冲溶液（PH7.6）(100mmolL-1～150mmolL-1)加入到上述双链DNA溶液中；②经过振动搅拌后，将10µLAgNO3溶液(浓度为40µM～200µM)、10µLNaBH4(浓度为40µM～200µM)加入到混合溶液中，该混合溶液在25OC下震荡6h，荧光Ag纳米簇形成；（3）根据上述步骤，进行ATP检测；（4）绘制标准曲线：首先将10µLDNA1分别加入到编号为a到j的10个小管中，其中，a号不加ATP溶液，b号加入0.01µMATP溶液，c号加入0.05µMATP溶液，d号加入0.1µMATP溶液，e号加入0.5µMATP溶液，f号加入2µMATP溶液，g号加入4µMATP溶液，h号加入6µMATP溶液，i号加入8µMATP溶液，j号加入10µMATP溶液，其次分别向...

【专利技术属性】
技术研发人员：娄大伟，李晓双，张浩，连丽丽，王希越，高文秀，祝波，
申请(专利权)人：吉林化工学院，
类型：发明
国别省市：吉林,22