【技术实现步骤摘要】
血浆DNA的建库方法和建库试剂盒
本专利技术涉及血浆DNA建库领域，具体而言，涉及一种血浆DNA的建库方法和建库试剂盒。
技术介绍
随着技术进步和人们对肿瘤和遗传病认识的深入，传统技术已经不能满足精准诊断的需求。精准诊断越来越依赖二代测序技术解决问题，二代技术也不断进步，测序通量越来越多，测序成本越来越低。目前市场主流二代测序仪主要有三家公司，分别是Illumina各型号测序仪，华大智造(MGI)测序仪和life公司的测序仪。Illumina的测序仪和华大智造的测序仪建库过程都是依赖T-A克隆的方式建库，区别在于Illumina是Y型接头，华大智造中间鼓泡型互补接头，这两种接头都能充分利用连接产物。Life的接头是平端连接，连接产物只有1/2模板是被测序仪测序，同时Life的测序仪对连续的碱基测序质量不高，一些精确应用受到限制。外周血中的血浆是血液的一部分，血液经过低速离心可以分成三部分，主要部分是上层血浆和下层红细胞，中间是白细胞层。基因组DNA主要集中在白细胞中，血浆中含有碎片DNA，DNA碎片是体内细胞凋亡的代谢产物，DNA碎片的长度是缠绕核小体的核酸片段长...
【技术保护点】
1.一种基于MGI测序平台的血浆DNA的建库方法，所述建库方法包括：对血浆DNA进行末端修复及加A，得到修复DNA；采用带有唯一标签序列的接头对所述修复DNA依次进行接头连接和PCR扩增，得到所述血浆DNA的测序文库。
【技术特征摘要】
1.一种基于MGI测序平台的血浆DNA的建库方法，所述建库方法包括：对血浆DNA进行末端修复及加A，得到修复DNA；采用带有唯一标签序列的接头对所述修复DNA依次进行接头连接和PCR扩增，得到所述血浆DNA的测序文库。2.根据权利要求1所述的建库方法，所述带有唯一标签序列的接头采用A1所示的第一Y接头和B1所示的第二Y接头的混合接头；A1：第一Y接头B1：第二Y接头其中，N为A、T、C或G，所述第一Y接头中的NNNNN序列与所述第二Y接头中的NNNNNN序列均代表所述唯一标签序列；优选地，所述唯一标签序列包括下表1所示的16个所述第一Y接头的5bp标签序列和16个所述第二Y接头的6bp标签序列：表1：接头序号5bp标签序列接头序号6bp标签序列MGI-5bp-15'Phos-GCTAG-3'MGI-6bp-15'Phos-GACGAT-3'MGI-5bp-25'Phos-GAGCA-3'MGI-6bp-25'Phos-GCTCTT-3'MGI-5bp-35'Phos-AGCGT-3'MGI-6bp-35'Phos-CGGAAT-3'MGI-5bp-45'Phos-CTCCA-3'MGI-6bp-45'Phos-GCATGA-3'MGI-5bp-55'Phos-TGGAC-3'MGI-6bp-55'Phos-CATCAC-3'MGI-5bp-65'Phos-CAAGC-3'MGI-6bp-65'Phos-GACATC-3'MGI-5bp-75'Phos-TCGTG-3'MGI-6bp-75'Phos-CTAGTC-3'MGI-5bp-85'Phos-GTACG-3'MGI-6bp-85'Phos-CGATCG-3'MGI-5bp-95'Phos-CGAGT-3'MGI-6bp-95'Phos-CATTGC-3'MGI-5bp-105'Phos-GCACT-3'MGI-6bp-105'Phos-CTGATG-3'MGI-5bp-115'Phos-TACCG-3'MGI-6bp-115'Phos-CAACTG-3'MGI-5bp-125'Phos-GTCAG-3'MGI-6bp-125'Phos-CTCTGT-3'MGI-5bp-135'Phos-GACTC-3'MGI-6bp-135'Phos-GCCTAT-3'MGI-5bp-145'Phos-TGTCC-3'MGI-6bp-145'Phos-GCCTTA-3'MGI-5bp-155'Phos-ACCGA-3'MGI-6bp-155'Phos-...
【专利技术属性】
技术研发人员：唐守运，曲艳，汪彪，胡玉刚，郑文莉，吴强，
申请(专利权)人：纳昂达南京生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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