【技术实现步骤摘要】
一种快速检测犬瘟热病毒抗原的检测卡及其制备方法
本专利技术涉及一种适用于国内市场的定性检测犬瘟热病毒抗原的检测卡及其制备方法，属于生物检测
技术介绍
犬瘟热是一种急性、传染性极强的病毒病，在幼犬中本病的死亡率较任何其他传染病为高。犬瘟热也是水貂的一种传染病，又称貂瘟，死亡率很高，引起严重的经济损失。10多年来，中国的犬貂市场越来越大，在宠物店，我们能看到琳琅满目的写着英文字母的诊断产品，可食用产品，治疗性用品，喜爱宠物的人们不计价钱的高低信赖进口的产品。即使是开发抗原诊断试纸产品的原材料--单克隆抗体，也是依赖进口，几年来芬兰HyTest，韩国金诺JBT等品牌几乎如垄断性的占据了中国大部分市场，但是由于他们开发抗体用的免疫原都是分离的他们本国本土的病毒，众所周知，在不同国家，不同区域都可以分离获得多株病毒，变异程度随区域而改变。市场客户反馈的问题大多是某些株型出现漏检现象，灵敏度逊色于进口产品。技术专利CN207601094Y公开了一种犬瘟热病毒试剂卡，包括试剂卡壳体及上下叠设于壳体内的多个试纸条；所述试纸条的靠近所述样品垫的一端固定有拉手；加样孔上层叠...
【技术保护点】
1.一种快速检测犬瘟热病毒病原的检测卡，所述检测卡包括依次相连接的吸水垫、基膜、金标垫和样品垫，其特征在于，所述基膜上设置有C线和T线，所述C线上包被有羊抗鼠IgG的抗体，所述金标垫中含有胶体金标记的第一单克隆抗体，所述T线上包被有第二单克隆抗体；所述第一单克隆抗体由保藏编号为CCTCC NO: C2018146的杂交瘤细胞株分泌得到。
【技术特征摘要】
1.一种快速检测犬瘟热病毒病原的检测卡，所述检测卡包括依次相连接的吸水垫、基膜、金标垫和样品垫，其特征在于，所述基膜上设置有C线和T线，所述C线上包被有羊抗鼠IgG的抗体，所述金标垫中含有胶体金标记的第一单克隆抗体，所述T线上包被有第二单克隆抗体；所述第一单克隆抗体由保藏编号为CCTCCNO:C2018146的杂交瘤细胞株分泌得到。2.根据权利要求1所述的快速检测犬瘟热病毒病原的检测卡，所述第二单克隆抗体由保藏编号为保藏编号为CCTCCNO:C2018147的杂交瘤细胞株分泌得到。3.权利要求1或2所述的快速检测犬瘟热病毒病原的检测卡的制备方法，包括以下步骤：步骤一，抗体制备及纯化：采用动物体内腹水诱生法制备单克隆抗体36D9和37C7；采用SPA柱法对腹水进行纯化，即得抗犬瘟热病毒单克隆抗体36D9和37C7；步骤二，胶体金溶液的熬制；步骤三，抗犬瘟热病毒37C7单克隆抗体的标记：每1ml金液先加45微升1%K2CO3，然后再加入37C7单克隆抗体，按照每1mL胶体金溶液加入6μg抗犬瘟热病毒单克隆抗体37C7，室温下120rpm摇30min，加入10%牛血清白蛋白20μL，室温下120rpm摇30min，12000rpm离心20min，弃上清，用0.01MPBS溶解沉淀，即得到标记好的抗犬瘟热病毒37C7单克隆抗体标记物；步骤四，金标垫处理及胶体金膜的制备：选择聚脂纤维6613作为金标结合垫；将金标垫浸泡在处理液A中5min，处理液A为0.01MPBS，pH7.4，0.2%TritonX-100，取出37℃烘干，备用；将标记好的抗犬瘟热病毒37C7单克隆抗体标记物用划膜仪以5μL/cm的浓度喷涂在处理好的金标垫上，室温自然晾干或者37℃烘干，制成含有抗犬瘟热病毒37C7单克隆抗体标记物的胶体金膜；步骤五，样品垫处理：选择DL42为样品垫，将样品垫，浸泡在处理液B中5min，处理液B为0.01MPBS，pH7.4，1%TritonX-100，1%BSA，0.05%NaN3，取出37℃烘干，备用；步骤六，C、T线确定：选择SartoriusCN140膜，分别将抗犬瘟热病毒36D9单克隆抗体和羊抗鼠二抗作为T线和C线划在NC膜上，浓度分别为1mg/mL和0.6mg/mL...
【专利技术属性】
技术研发人员：武玉香，于金枝，孙珊珊，唐世云，刘捷，
申请(专利权)人：山东绿都生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37
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