一种核酸抗体修饰的免疫金探针及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种核酸抗体修饰的免疫金探针及其制备方法和应用。该方法综合使用了点击化学技术和寡核苷酸标记纳米金颗粒技术等一系列工艺，对抗体与DNA的偶联条件，标记寡核苷酸的纳米金颗粒的制备条件进行优化，最大限度地提高标记在纳米金颗粒上的寡核苷酸的稳定性和密度以及结合在纳米金颗粒上的抗体数量，以该方法制备的新型金纳米探针可以用于具有细胞靶向性的特异性检测，病毒的可视化检测，制备超灵敏的检测试纸条，相较于现有技术，以本发明专利技术制备的产品具有特异性高，稳定性好，应用领域广泛等特点，加之工艺简便，成本较低，因此有很好的推广前景。

An Immunogold Probe Modified by Nucleic Acid Antibody and Its Preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一种核酸抗体修饰的免疫金探针及其制备方法和应用
本专利技术属于免疫金探针制备
，具体涉及一种核酸抗体修饰的免疫金探针及其制备方法和应用。
技术介绍
早在很久以前，人们就对金溶胶开始研究，18世纪后，Faraday利用科学的方式对其进行研究，从此之后，人们对金溶胶的合成的研究方向开始转移到对其合成的方式和其应用方向等，随着纳米技术的不断发展，纳米材料和纳米结构获得了引人瞩目的成就，为生物医学的发展提供了新的契机。1996年，Mirkin团队发现了一种能将多价核酸与纳米金颗粒结合的方式，核酸与球形金颗粒表面共价连接，形成具有高密度富集和高度定向核酸的功能化纳米结构，这是第一个具有优良性质的球形核酸结构，由金芯和核酸外壳构成。该结构表现出纳米金颗粒和核酸两种物质的性能，因此，球形核酸相对于一些其他病毒载体和许多其他合成系统具有一定优势，包括低毒性、低免疫原性、抗酶降解、更稳定的基因敲除等等。这种结构能够在外壳核酸周围制造高盐浓度区，保护核酸不会被酶分解，并且能在细胞外环境中在表面富集清除蛋白，从而促进细胞内吞。这种球形核酸的功能，适用于各种类型的细胞，包括原代细胞，所以在后期研究中发本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种核酸抗体修饰的免疫金探针，其特征在于，所述的免疫金探针包括纳米金颗粒核心和表面修饰的核酸抗体结合物，所述核酸抗体结合物中的核酸为炔基修饰的长链DNA，所述长链DNA的核苷酸序列为：TT TAT ATA GAG GAG TTTTT TTTTT。

【技术特征摘要】
1.一种核酸抗体修饰的免疫金探针，其特征在于，所述的免疫金探针包括纳米金颗粒核心和表面修饰的核酸抗体结合物，所述核酸抗体结合物中的核酸为炔基修饰的长链DNA，所述长链DNA的核苷酸序列为：TTTATATAGAGGAGTTTTTTTTTT。2.根据权利要求1所述的核酸抗体修饰的免疫金探针，其特征在于，所述纳米金颗粒核心为结合了巯基修饰的反义长链DNA和短链DNA的纳米金颗粒，所述反义长链DNA的核苷酸序列为CTCCTCTATATAAATTTTTTTTTTTT，所述短链DNA的核苷酸序列为TTTTTTTTTT。3.根据权利要求1所述的核酸抗体修饰的免疫金探针，其特征在于，所述纳米金颗粒的粒径为15~30nm。4.权利要求1~3任一项所述的核酸抗体修饰的免疫金探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1）将抗体和叠氮化合物按一定比例混合，在室温环境下，摇晃结合一定时间得到样品；2）将步骤1）结合后的样品吸出，加入透析袋放置于PBS中透析过夜得到抗体叠氮结合物；3）将透析过夜的抗体叠氮结合物取出，加入炔基修饰的长链DNA和催化剂，室温下摇晃结合得到核酸抗体结合物；4）将结合好的核酸抗体结合物再次加入透析袋，放置于PBS中，透析过夜，中间换一次透析液，获得背景较为干净的核酸抗体结合物；5）将纳米金颗粒与巯基修饰的反义长链DNA和短链DNA按一...

【专利技术属性】
技术研发人员：周昕，袁嘉晟，张天宇，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32