HSA单域抗体、核苷酸序列及试剂盒制造技术

本发明专利技术公开一种HSA单域抗体、核苷酸序列及试剂盒，其中，该HSA单域抗体为包括四个框架区域以及三个互补决定区CDR1、CDR2、CDR3，其中，CDR1：Asp Tyr Ile Ile Gly；CDR2：Cys Ile Ser Arg Ser Asp Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Glu Ser Val Lys；CDR3：Ala Asp Arg Tyr Arg Ser Gly Phe Leu Gly Asn Gly Tyr Glu Tyr Asp。本发明专利技术技术方案通过结合基因工程的方法得到一种特异性结合HSA蛋白的单域抗体，该抗体特异性结合HSA蛋白的活性高，表达量高，成本低，易改造。

【技术实现步骤摘要】
HSA单域抗体、核苷酸序列及试剂盒
本专利技术涉及基因工程
，特别涉及一种HSA单域抗体、核苷酸序列及试剂盒。
技术介绍
人血清白蛋白(HSA)人体血液中的血清白蛋白，是人血浆中最丰富的蛋白质，占血清蛋白的55％。HSA由肝脏产生，在体内发挥着转运激素、脂肪酸和其他疏水化合物，缓冲pH，维持渗透压等多种功能。人血清白蛋白标记物可以作为多种疾病的检测方式，例如检测尿液中的白蛋白含量可以作为肾病的重要检测方式，是是糖尿症患者心血管病并发症的一个风险指标。人血清白蛋白可以使用多种方法检测和标记，而免疫组织化学法是最灵敏和特异的一种。其原理是通过利用白蛋白特异性抗体与血清白蛋白结合，不仅可用于如尿液中白蛋白的定量检测，还可用于其他体液中白蛋白的检测。现有技术中，HAS抗体结合活性低，特异性不佳。
技术实现思路
本专利技术的主要目的是提供一种HSA单域抗体，旨在解决现有HSA抗体结合活性低的问题。为实现上述目的，本专利技术提出一种HSA单域抗体，所述HSA单域抗体包括四个框架区域以及三个互补决定区CDR1、CDR2、CDR3，其中，CDR1：AspTyrIleIleGly；CDR2：CysIleSerArgSerAspGlyAsnThrTyrTyrAlaGluSerValLys；CDR3：AlaAspArgTyrArgSerGlyPheLeuGlyAsnGlyTyrGluTyrAsp。在一实施例中，所述四个框架区分别为FR1、FR2、FR3、FR4，其中，FR1：AspValGlnLeuGlnAlaSerGlyGlyAspLeuValGlnAlaGlyGlySerLeuArgLeuSerCysHisAlaSerGlyLeuAspFR2：TrpPheArgGlnAlaProGlyLysGluArgGluGlyLeuSerFR3：GlyArgPheThrIleSerSerAspAsnAlaLysAsnThrValTyrLeuGlnMetAspSerLeuLysProGluAspThrAlaValTyrTyrCysAlaFR4：TyrTrpGlyGlnGlyThrGlnValThrValSerSer。本专利技术还提供一种核苷酸序列，所述核苷酸序列编码HSA单域抗体，所述HSA单域抗体包括四个框架区域以及三个互补决定区CDR1、CDR2、CDR3，其中，CDR1：AspTyrIleIleGly；CDR2：CysIleSerArgSerAspGlyAsnThrTyrTyrAlaGluSerValLys；CDR3：AlaAspArgTyrArgSerGlyPheLeuGlyAsnGlyTyrGluTyrAsp。在一实施例中，所述核苷酸序列如下：GATGTGCAGCTGCAGGCGTCTGGGGGAGACCTGGTGCAGGCTGGAGGGTCTCTGAGACTCTCCTGCCACGCCTCTGGTTTGGATGATTATATCATTGGCTGGTTCCGCCAGGCCCCAGGGAAGGAGCGCGAGGGCCTCTCATGTATTAGTAGAAGTGATGGTAACACATACTATGCAGAGTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATTTCCAGTGACAACGCCAAGAACACGGTGTATCTGCAAATGGACAGCCTGAAACCTGAGGACACGGCTGTTTATTACTGTGCAGCAGATCGATATCGGTCGGGATTTTTGGGGAATGGATATGAGTATGACTACTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA。本专利技术还提供一种试剂盒，所述试剂盒包括HSA单域抗体，或者包括如核苷酸序列；所述HSA单域抗体包括四个框架区域以及三个互补决定区CDR1、CDR2、CDR3，其中，CDR1：AspTyrIleIleGly；CDR2：CysIleSerArgSerAspGlyAsnThrTyrTyrAlaGluSerValLys；CDR3：AlaAspArgTyrArgSerGlyPheLeuGlyAsnGlyTyrGluTyrAsp；所述核苷酸序列为：GATGTGCAGCTGCAGGCGTCTGGGGGAGACCTGGTGCAGGCTGGAGGGTCTCTGAGACTCTCCTGCCACGCCTCTGGTTTGGATGATTATATCATTGGCTGGTTCCGCCAGGCCCCAGGGAAGGAGCGCGAGGGCCTCTCATGTATTAGTAGAAGTGATGGTAACACATACTATGCAGAGTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATTTCCAGTGACAACGCCAAGAACACGGTGTATCTGCAAATGGACAGCCTGAAACCTGAGGACACGGCTGTTTATTACTGTGCAGCAGATCGATATCGGTCGGGATTTTTGGGGAATGGATATGAGTATGACTACTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA。本专利技术技术方案通过结合基因工程的方法得到一种特异性结合HSA蛋白的单域抗体，该抗体特异性结合HSA蛋白的活性高，表达量高，成本低，易改造。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。图1为本专利技术第一轮PCR单域抗体基因电泳图；图2为为图1中条带1中750bp-500bp范围内的第二轮PCR单域抗体基因电泳图；图3为蛋白表达纯化图；图4为本专利技术HSA单域抗体与HSA抗原结合活性图。本专利技术目的的实现、功能特点及优点将结合实施例，参照附图做进一步说明。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术实提出了一种HSA单域抗体、核苷酸序列及试剂盒。下述内容将针对所述HSA单域抗体及其筛选过程作详细介绍。首先，本专利技术的HSA单域抗体具有三个框架区和两个可变区。其中，三个互补决定区序列如下：CDR1：SerTyrThrMetGly；CDR2：GlyIleSerProSerGlyAlaTyrThrSerTyrAlaAspSerValLys；CDR3：AlaAspArgTyrGlyLeuLeuHisThrAlaGluAspValTyrPro。当然，HSA单域抗体的框架区序列可以有多种。下述内容中以如下四个框架区为具体实施例进行详细阐述。FR1：GluValGlnLeuValGluSerGlyGlyGlyLeuValGlnAlaGlyGlySerLeuArgLeuSerCysAlaAlaSerGlyGlyThrPheSer；FR2：TrpPheArgGlnAlaProGlyLysGluArgGluPheValThr；FR3：GlyArgPheThrIleSerArgAspAsnAlaLysAsnThrMetPheValGlnMetAsnSerLeuLysProGluAspThrAlaValTyrTyrCysGlu；F本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种HSA单域抗体，其特征在于，包括四个框架区域以及三个互补决定区CDR1、CDR2、CDR3，其中，CDR1：Asp Tyr Ile Ile Gly；CDR2：Cys Ile Ser Arg Ser Asp Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Glu Ser Val Lys；CDR3：Ala Asp Arg Tyr Arg Ser Gly Phe Leu Gly Asn Gly Tyr Glu Tyr Asp。

【技术特征摘要】
1.一种HSA单域抗体，其特征在于，包括四个框架区域以及三个互补决定区CDR1、CDR2、CDR3，其中，CDR1：AspTyrIleIleGly；CDR2：CysIleSerArgSerAspGlyAsnThrTyrTyrAlaGluSerValLys；CDR3：AlaAspArgTyrArgSerGlyPheLeuGlyAsnGlyTyrGluTyrAsp。2.如权利要求1所述的HSA单域抗体，其特征在于，所述四个框架区分别为FR1、FR2、FR3、FR4，其中，FR1：AspValGlnLeuGlnAlaSerGlyGlyAspLeuValGlnAlaGlyGlySerLeuArgLeuSerCysHisAlaSerGlyLeuAspFR2：TrpPheArgGlnAlaProGlyLysGluArgGluGlyLeuSerFR3：GlyArgPheThrIleSerSerAspAsnAlaLysAsnThrValTyrLeuGlnMetAspSerLeuLysProGluAspThrAlaValTyrTyrCysAlaFR4：TyrTrpGlyGlnGlyThrGlnValThrValSerS...

【专利技术属性】
技术研发人员：李胜华，包朝乐萌，许莎莎，李莹莹，余祥，刘文涛，
申请(专利权)人：深圳普瑞金生物药业有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44