抗CK20蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用技术

技术编号:21079811 阅读:162 留言:0更新日期:2019-05-11 06:11
本发明专利技术涉及生物检测领域,提供了一种抗CK20蛋白单克隆抗体,其重链和轻链可变区的氨基酸序列分别是SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列。发明专利技术人还提供了抗CK20蛋白单克隆抗体的制备方法,选取人CK20氨基酸第411‑424位蛋白并与KLH偶联,作为免疫原。发明专利技术人还提供了一株分泌抗CK20蛋白的杂交瘤细胞系,所述细胞系为小鼠杂交瘤细胞系10F6B12A9,保藏号为:CGMCC NO.16204。抗CK20蛋白单克隆抗体,具有高特异性、敏感性,可以特异性识别表达CK20蛋白的细胞,适用于免疫学检测,特别是免疫组化检测。

Monoclonal Antibodies Against CK20 Protein, Cell Lines and Their Preparation and Application

The invention relates to the field of biological detection, and provides a monoclonal antibody against CK20 protein. The amino acid sequences of the heavy chain and light chain variable regions of the monoclonal antibody are SEQ ID NO.4 and SEQ ID NO.5 respectively. The inventor also provided a method for the preparation of monoclonal antibodies against CK20 protein. The 411 424 protein of human CK20 amino acid was selected and coupled with KLH as an immunogen. The inventor also provided a hybridoma cell line secreting anti-CK20 protein. The cell line is a mouse hybridoma cell line 10F6B12A9 and its preservation number is CGMCC NO.16204. Anti-CK20 monoclonal antibody has high specificity and sensitivity. It can specifically recognize cells expressing CK20 protein and is suitable for immunological detection, especially immunohistochemical detection.

【技术实现步骤摘要】
抗CK20蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用
本专利技术涉及生物检测领域,特别涉及抗CK20蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用。
技术介绍
细胞角蛋白(Cytokeratin,CK)是分布于外胚层起源细胞中的中间纤维丝,为细胞骨架的组分之一。分为CK1~CK20等20种。细胞角蛋白主要分布于上层组织细胞中,但是在骨髓、血液、淋巴结等表达能力较弱,肿瘤细胞能够保留其来源的胚层特性,细胞角蛋白已经成为肿瘤细胞较为敏感和特异的标志物,被用来检测恶性肿瘤细胞。蛋白细胞角蛋白20(Cytokeratin20,CK20)是Ⅰ型细胞角蛋白的一种,相对分子质量为48000,编码DNA总长18kb,含8个外显子,7个内含子。CK20的合成首先出现于第8周胚胎的粘膜上皮中,后广泛分布于杯状细胞和绒毛细胞中。在CK系列中CK20具有严格的上皮组织特异性。正常组织中,如乳腺、平滑肌、血细胞、淋巴细胞、造血细胞CK20表达都均为阴性,其阳性表达仅见于肠粘膜细胞、胃粘膜及幽门腺体细胞、十二指肠粘膜、泌尿系伞状细胞、表皮Merkel细胞。CK20的表达在细胞发生化生、恶变、肿瘤转移、体外培养等改变时持本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗CK20蛋白单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体重链和轻链可变区的氨基酸序列分别是SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种抗CK20蛋白单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体重链和轻链可变区的氨基酸序列分别是SEQIDNO.4和SEQIDNO.5所示的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体重链和轻链可变区氨基酸序列分别是SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示的核苷酸序列所编码。3.根据权利要求1所述的单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体特异性识别CK20蛋白。4.根据权利要求3所述的单克隆抗体,其特征在于,所述单克隆抗体特异性识别CK20蛋白中SEQIDNO.1所示的氨基酸序列。5.一种抗CK20蛋白单克隆抗体,由保藏号为CGMCCNO.16204的杂交瘤细胞系产生。6.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员:李恢波吴茂李玲玲黄信超
申请(专利权)人:福州迈新生物技术开发有限公司
类型:发明
国别省市:福建,35

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