一种新型雌激素受体蛋白ERβX制备方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种新型雌激素受体蛋白ERβX制备方法及应用，应用分子生物学技术制备ERβX蛋白；采用分子筛凝胶色谱、离子交换树脂与哇胶色谱分离并纯化；通过液质联用仪、氨基酸序列分析仪或核磁共振仪进行鉴定及结构分析；建立小鼠及大鼠的动物模型，进行ERβX的毒理学实验；明确ERβX的给药剂量及途径；高效液相色谱法(HPLC)进行ERβX蛋白活性及药代动力学研究；分析ERβX与雌二醇(E2)、它莫昔酚(TAM)等配体的特异性、亲合性等生化特性；生物学及分子生物学实验研究ERβX在乳腺癌、前列腺癌、宫颈癌、卵巢癌、结直肠癌等多种激素相关肿瘤中的作用及作用机制。本发明专利技术毒副作用小、生产成本低、避免患者因手术而放、化疗造成的痛苦。

【技术实现步骤摘要】
一种新型雌激素受体蛋白ERβX制备方法及应用
本专利技术涉及生物医疗领域，尤其是一种新型雌激素受体蛋白ERβX制备方法及应用。
技术介绍
雌激素是人体内重要和作用广泛的类固醇激素之一，其主要是通过雌激素受体(ER)发挥其广泛的生物学效应。它作为甾体激素，主要还是通过经典的配体-受体结合模式，介导ER的活化和二聚化，促使其入核并作为转录因子调节靶基因的转录活化过程。雌激素与ER结合后，可以直接与靶基因启动子上的雌激素反应元件(ERE)结合，促进靶基因的转录活化；还可以与其它的转录因子，如活化蛋白1(AP1)、特异蛋白1(SP1)、核因子-кB(NF-кB)、cAMP反应元件结合蛋白(CREB)、runt相关转录因子1(RUNX1)、p53和STAT5等，通过蛋白-蛋白间的活化机制，间接促进靶基因的转录激活。雌激素受体β(ERβ)的发现，为雌激素发挥生物学效应开启了新的途径。ERβ分别被定位于染色体ESR2上，在子宫、卵巢、乳腺、前列腺，肺及脑等多种组织中广泛表达，在调控细胞生长和组织器官发育中具有重要作用。ER表达的水平、亚型是决定组织特异性雌激素反应的主要因素。Bardin等转染ER本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种新型雌激素受体蛋白ERβX制备方法及应用，其特征在于，所述方法包括以下步骤：S1，应用分子生物学技术制备ERβX蛋白；采用分子筛凝胶色谱、离子交换树脂与哇胶色谱分离并纯化；通过液质联用仪、氨基酸序列分析仪或核磁共振仪进行鉴定及结构分析；S2，建立小鼠及大鼠的动物模型，进行ERβX的毒理学实验；明确ERβX的给药剂量及途径；S3，高效液相色谱法(HPLC)进行ERβX蛋白活性及药代动力学研究；分析ERβX与雌二醇(E2)、它莫昔酚(TAM)等配体的特异性、亲合性等生化特性；S4，生物学及分子生物学实验研究ERβX在乳腺癌、前列腺癌、宫颈癌、卵巢癌、结直肠癌等多种激素相关肿瘤中的作用及作用...

【技术特征摘要】
1.一种新型雌激素受体蛋白ERβX制备方法及应用，其特征在于，所述方法包括以下步骤：S1，应用分子生物学技术制备ERβX蛋白；采用分子筛凝胶色谱、离子交换树脂与哇胶色谱分离并纯化；通过液质联用仪、氨基酸序列分析仪或核磁共振仪进行鉴定及结构分析；S2，建立小鼠及大鼠的动物模型，进行ERβX的毒理学实验；明确ERβX的给药剂量及途径；S3，高效液相色谱法(HPLC)进行ERβX蛋白活性及药代动力学研究；分析ERβX与雌二醇(E2)、它莫昔酚(TAM)等配体的特异性、亲合性等生化特性；S4，生物学及分子生物学实验研究ERβX在乳腺癌、前列腺癌、宫颈癌、卵巢癌、结直肠癌等多种激素相关肿瘤中的作用及作用机制。2.根据权利要求1所述的一种ERβX制备方法及应用，其特征在于：S1的内容包括如下内容：1、筛选1.1hERβ各功能区基因的获得以测序结果正确的pEGFP-C1-hERβ重组质粒作为模板，钓取hERβ功能区的基因片段；PCR产物通过1％琼脂糖凝胶电泳鉴定，所得片段的长度与对应功能区所含碱基的数目相符；hERβ各个功能区的基因长度分别为AB(444bp)、AC(642bp)、AD(912bp)、C(198bp)、CD(468bp)、CE(1056bp)、CF(1149bp)、D(270bp)、DE(858bp)、DF(951bp)、E(588bp)、EF(681bp)、F(93bp)；1.2hERβ各功能区基因重组质粒的鉴定提取质粒经HindIII和BamHI双酶切鉴定，其酶切产...

【专利技术属性】
技术研发人员：李峰，赵丽晶，郭丽荣，熊文激，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：吉林,22