一种β2-微球蛋白检测试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及一种β2‑微球蛋白检测试剂盒，属于免疫检测分析技术领域。所述试剂盒含有样本稀释液、洗涤液、显色液及终止液、酶标记物，酶标记物为辣根过氧化物酶标记的β2‑微球蛋白多克隆抗体，多个不同浓度的可溶性β2‑微球蛋白标准品、可溶性β2‑微球蛋白质控品、以及微孔反应板，所述微孔反应板包被可溶性β2‑微球蛋白多克隆抗体。所述试剂盒中的多种不同浓度的可溶性β2‑微球蛋白标准品无需进行稀释处理可以直接使用，简化了操作步骤，缩短了检测时间，实现了高效、快速检测，同时可溶性β2‑微球蛋白质控品可以鉴定检测结果是否准确，不同浓度的β2‑微球蛋白标准品可以得到不同规格的检测试剂盒，适应不同客户的使用需求。

A Kit for Detecting Beta 2-Microglobulin

The invention relates to a beta 2 -microglobulin detection kit, which belongs to the field of immunoassay and analysis technology. The kit contains sample diluent, detergent, chromogenic and terminating liquids, enzyme markers, polyclonal antibodies to beta 2 microglobulin labelled by horseradish peroxidase, multiple soluble beta 2 microglobulin standard products with different concentrations, soluble beta 2 microglobulin control products, and microporous reaction plate. The microporous reaction plate is coated with soluble beta 2 microglobulin. Polyclonal antibody. The various soluble beta 2_microglobulin standard products with different concentrations in the kit can be directly used without dilution treatment, simplifying the operation steps, shortening the detection time, realizing efficient and rapid detection. At the same time, the soluble beta 2_microglobulin control products can identify whether the test results are accurate, and different concentrations of beta 2_microglobulin standard products can be obtained with different specifications. Qualified test kit, to meet the needs of different customers.

【技术实现步骤摘要】
一种β2-微球蛋白检测试剂盒
本专利技术涉及一种β2-微球蛋白检测试剂盒，属于免疫检测分析

技术介绍
β2-微球蛋白(β2-microglobin,β2-MG)是人体组织相容抗(HLA)的一个β轻链，由淋巴细胞及有核细胞合成和分泌，相对分子质量为11800。正常人β2-微球蛋白的合成率及从细胞膜上的释放量相对恒定，β2-微球蛋白可以从肾小球自由滤过，99.9％在近端肾小管吸收，并在肾小管上皮细胞中分解破坏，故而正常情况下β2-微球蛋白的排出是很微量的。测定血清和尿液中的β2-微球蛋白可了解肾小球滤过功能以及肾小管的重吸收功能，是泌尿系统疾病中评价肾功能的灵敏指标。另外，β2-微球蛋白因其能在免疫活性细胞的识别和激活中起主要作用，也是一种肿瘤标志物，恶性血液病或其他实质性恶性肿瘤细胞能合成和分泌β2-微球蛋白，且其量超过正常细胞，使患者血β2-微球蛋白含量明显升高。临床上血清β2-微球蛋白的检测主要有以下几个方而的作用：(1)作为肾脏功能的灵敏指标，用于评价泌尿系统疾病中肾脏的功能；(2)作为反映高血压和糖尿病肾脏受损的敏感指标，动态观察、诊断早期肾移植排斥反应；(3)作为一种肿瘤标志物辅助诊断恶性肿瘤，评价骨髓瘤的预后及治疗效果；(4)病毒感染及自身免疫性疾病时血清中β2-微球蛋白会升高。因此，对β2-微球蛋白的快速、全面、准确、特异检测显得尤为重要。到目前为止，商品的β2-微球蛋白检测手段都尚存在一定局限性。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种β2-微球蛋白检测试剂盒，所述试剂盒可对β2-微球蛋白进行快速、全面、准确、特异的检测。为实现本专利技术的目的，提供以下技术方案。一种β2-微球蛋白检测试剂盒，所述试剂盒包含有样本稀释液、洗涤液、显色液及终止液、酶标记物，所述酶标记物为辣根过氧化物酶(HRP)标记的可溶性β2-微球蛋白多克隆抗体；所述检测试剂盒还包括：多个不同浓度的可溶性β2-微球蛋白标准品、可溶性β2-微球蛋白质控品、以及微孔反应板，所述微孔反应板包被可溶性β2-微球蛋白多克隆抗体。所述多个不同浓度的可溶性β2-微球蛋白标准品的浓度依次为0ng/ml、6.4ng/ml、16ng/ml、40ng/ml、100ng/ml和200ng/ml。优选的，所述可溶性β2-微球蛋白标准品的制备方法为：以胎牛血清处理基质对可溶性β2-微球蛋白抗原进行稀释，配制得到可溶性β2-微球蛋白标准品。优选的，所述可溶β2-微球蛋白质控品包括低值范围质控品和高值范围质控品，所述低值范围质控品浓度为24～36ng/ml，所述高值范围质控品浓度为48～72ng/ml。优选的，所述低值范围质控品浓度为30ng/ml，所述高值范围质控品浓度为60ng/ml。优选的，所述质控品的制备方法为：以胎牛血清处理基质对可溶β2-微球蛋白抗原进行稀释，配制得到可溶性β2-微球蛋白质控品。一种本专利技术所述β2-微球蛋白检测试剂盒的制备方法，包括如下步骤：(1)制备可溶性β2-微球蛋白标准品和可溶性β2-微球蛋白质控品：使用胎牛血清处理基质将可溶性β2-微球蛋白抗原稀释得到可溶性β2-微球蛋白标准品，同时使用胎牛血清处理基质将可溶性β2-微球蛋白抗原稀释得到质控品；(2)制备可溶性β2-微球蛋白多克隆抗体包被的微孔反应板：吸取可溶性β2-微球蛋白多克隆抗体，加入0.01mol/L，pH＝7.2的磷酸盐溶液中进行稀释，4℃储存备用；取微孔板，每孔加入100μL稀释后的可溶性β2-微球蛋白多克隆抗体，覆膜后置于4℃包被18～22小时；甩去孔内液体，每孔加入200μL内含1～3％牛血清白蛋白、3～5％蔗糖、0.05～0.15％Priclin300的0.01mol/L，pH＝7.4的磷酸盐溶液，覆膜后置于4℃封闭18～22小时；甩去孔内液体，并在吸水纸上拍干，室温下干燥2～4天后真空密封包装，得到可溶性β2-微球蛋白多克隆抗体包被的微孔反应板，所述微孔反应板保存于4℃。(3)制采用高碘酸钠氧化法制备β2-微球蛋白酶标记物。称取1mgHRP溶于0.1mL双蒸水中，搅拌下加入0.1mL新鲜配制的0.06mol/L高碘酸钠(NaIO)水溶液，4℃静置30min；取出，搅拌下加入0.1mL0.16mol/L的乙二醇水溶液，室温下静置30min。将1.0mg500μLβ2-微球蛋白的水溶液加入上述溶液中，混匀后，装入透析袋对0.05mol/LpH9.5的碳酸盐缓冲液4℃透析过夜。次日，将溶液自透析袋取出，加入5g/L新配制的NaBH4蒸馏水溶液0.04ml，混匀，4℃静置2h；取出反应液，装入透析袋对0.02mol/LpH7.4的磷酸缓冲液4℃透析过夜，取出透析液，加等体积甘油，得到辣根过氧化物酶标记的可溶性β2-微球蛋白多克隆抗体，-20℃贮存备用。(4)制备样本稀释液：取磷酸二氢钠1.409g、磷酸氢二钠4.372g、氯化钠8.5g、牛血清白蛋白5g、吐温-200.5mL、加水定容至1L，用氢氧化钠调pH至7.4±0.1；(5)制备洗涤液：取磷酸二氢钠28.18g、磷酸氢二钠87.44g、氯化钠170g、吐温-2010mL，加水定容至1L，使用时用水稀释20倍；(6)制备显色液：称取100gTMB，用10mLDMSO和10mL无水乙醇配成的混合液溶解，4℃避光保存备用；配制0.1mol/LpH4.0～5.0的柠檬酸溶液；向1000mL所述配制的柠檬酸溶液中加入100～200mg过氧化氢尿素；溶解充分后，加入PVP，使其终浓度为0.2～0.6％，4℃放置18～22小时；加入事先溶解的TMB混合液，并加入2～4％聚乙二醇，加水定容至1000mL，4℃避光保存；(7)制备终止液：量取50mL浓硫酸沿烧杯壁缓慢地注入870mL水中，混匀，使其被稀释18.4倍，4℃保存。有益效果本专利技术提供了一种β2-微球蛋白检测试剂盒，试剂盒中的多种不同浓度的可溶性β2-微球蛋白标准品无需进行稀释处理可以直接使用，简化了操作步骤，缩短了检测时间，实现了高效、快速检测，同时可溶β2-微球蛋白质控品可以鉴定检测结果是否准确，多个不同浓度的可溶性β2-微球蛋白微孔反应板使用的β2-微球蛋白多克隆抗体具有高度特异性，且可溶性β2-微球蛋白标准品可以实现对样本中的可溶性β2-微球蛋白分子进行专一的定量检测；提供的不同浓度的可溶性β2-微球蛋白标准品可以得到标准曲线，根据标准曲线可以得到待测样品中可溶性β2-微球蛋白的浓度；试剂盒可与全自动酶联反应分析仪相结合，可以进一步有效缩短检测时间，降低检测成本和人力花费。具体实施方式一种β2-微球蛋白检测试剂盒，包含有微孔反应板、酶标记物、样本稀释液、显色液、终止液、洗涤液、可溶性β2-微球蛋白标准品、可溶性β2-微球蛋白质控品，其中，酶标记物为辣根过氧化物酶标记的可溶性β2-微球蛋白多克隆抗体，可溶性β2-微球蛋白标准品是以胎牛血清处理基质对可溶性β2-微球蛋白抗原进行稀释得到，可溶性β2-微球蛋白质控品是以胎牛血清处理基质对可溶性β2-微球蛋白抗原进行稀释得到，微孔反应板为包被可溶性β2-微球蛋白多克隆抗体；本试剂盒中的不同浓度可溶性β2-微球蛋白标准品可以直接使用绘制标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线得到样品对应的浓度，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种β2‑微球蛋白检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包含有样本稀释液、洗涤液、显色液及终止液、酶标记物，所述酶标记物为辣根过氧化物酶或标记的可溶性β2‑微球蛋白多克隆抗体；所述检测试剂盒还包括：多个不同浓度的β2‑微球蛋白标准品、可溶性β2‑微球蛋白质控品、以及微孔反应板，所述微孔反应板包被可溶性β2‑微球蛋白多克隆抗体；所述多个不同浓度的可溶性β2‑微球蛋白标准品的浓度依次为0ng/ml、6.4ng/ml、16ng/ml、40ng/ml、100ng/ml和200ng/ml。

【技术特征摘要】
1.一种β2-微球蛋白检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包含有样本稀释液、洗涤液、显色液及终止液、酶标记物，所述酶标记物为辣根过氧化物酶或标记的可溶性β2-微球蛋白多克隆抗体；所述检测试剂盒还包括：多个不同浓度的β2-微球蛋白标准品、可溶性β2-微球蛋白质控品、以及微孔反应板，所述微孔反应板包被可溶性β2-微球蛋白多克隆抗体；所述多个不同浓度的可溶性β2-微球蛋白标准品的浓度依次为0ng/ml、6.4ng/ml、16ng/ml、40ng/ml、100ng/ml和200ng/ml。2.根据权利要求1所述的一种β2-微球蛋白检测试剂盒，其特征在于：所述可溶β2-微球蛋白质控品包括低值范围质控品和高值范围质控品，所述低值范围质控品浓度为24～36ng/ml，所述高值范围质控品浓度为48～72ng...

【专利技术属性】
技术研发人员：兰成杰，陶剑，
申请(专利权)人：天津康尔克生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12