一种海藻内源温度诱导型启动子及其应用制造技术

本发明专利技术属于海藻基因工程技术领域，涉及一种海藻内源温度诱导型启动子及其应用。启动子含共存的高温热激元件HSE和低温冷激元件LTR。本发明专利技术采用染色体步移、基因克隆、DNA测序等技术得到大型海藻浒苔热激蛋白70基因(hsp70)启动子，具有SEQ ID NO:1所示的序列；进一步通过缺失突变和遗传转化鉴定了启动子内负责高、低温响应的顺式元件及其互作机制；在此基础上将克隆的热激蛋白70基因启动子插入报告基因GUS上游，构建转化载体导入浒苔叶状体检测到外源基因GUS基因的温度诱导表达。该技术可以提高浒苔转基因的可控性和生物安全性，对藻种的品种改良以及基因工程产品开发都具有重要意义。

An Endogenous Temperature-Induced Promoter from Algae and Its Application

The invention belongs to the field of algae genetic engineering technology, and relates to an endogenous temperature-inducible promoter of algae and its application. The promoter contains coexisting high temperature heat shock element HSE and low temperature cold shock element LTR. The promoter of heat shock protein 70 gene (hsp70) of Enteromorpha prolifera was obtained by chromosome walking, gene cloning, DNA sequencing and other techniques, which has the sequence shown by SEQ ID NO:1. The cis-elements responsible for high and low temperature response in the promoter and their interaction mechanism were further identified by deletion mutation and genetic transformation; on this basis, the cloned promoter of heat shock protein 70 gene was inserted. The temperature-induced expression of GUS gene was detected in the thallus of Enteromorpha proliferata by constructing a transformation vector upstream of GUS gene and introducing it into the thallus of Enteromorpha proliferata. This technology can improve the controllability and biosafety of Enteromorpha prolifera, and is of great significance to the improvement of algae species and the development of genetic engineering products.

【技术实现步骤摘要】
一种海藻内源温度诱导型启动子及其应用
本专利技术属于海藻基因工程
，涉及一种海藻内源温度诱导型启动子及其应用。
技术介绍
大型海藻属于低等植物，主要包括绿藻、褐藻与红藻。其中许多经济种类已实现规模化人工栽培，例如绿藻类的浒苔、石莼与礁膜，褐藻类的海带、裙带菜、羊栖菜，以及红藻类的紫菜、红毛菜、江蓠、石花菜和麒麟菜。目前全球大型海藻栽培总面积超过三百万亩，年产量超过600万吨鲜重，除部分作为营养食品外，也用于碘、甘露醇、藻胶等重要化工原料、以及海洋药物与蛋白试剂的提取原料，具有很高的经济价值。以大型海藻为对象建立遗传操作技术，既可以改变其经济性状，获得抗病抗逆的藻类新品种、提高产量和质量等，也可以将其开发成为具有海洋特色的表达系统，低成本地生产高附加值产品，如口服疫苗和药物等。大型海藻表达系统与其他表达系统(如大肠杆菌、酵母、哺乳动物和高等植物)相比，具有光合自养成本低廉、不占用耕地、养殖密度大等优势，并有着突出的海洋特色。为了实现上述目标，迫切需要发展高效、安全的海藻基因工程技术与全套方法。其中，针对导入基因的高效、安全和可控表达，启动子是一个重要的载体元件。启动子根据调控方式本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种海藻内源温度诱导型启动子，其特征在于：启动子含共存的高温热激元件HSE和低温冷激元件LTR。

【技术特征摘要】
1.一种海藻内源温度诱导型启动子，其特征在于：启动子含共存的高温热激元件HSE和低温冷激元件LTR。2.按权利要求1海藻内源温度诱导型启动子，其特征在于：所述高温热激元件HSE为浒苔热激蛋白70基因起始密码子ATG上游-179至-167所示的核苷酸；所述低温冷激元件LTR为浒苔热激蛋白70基因起始密码子ATG上游-999至-994所示的核苷酸。3.按权利要求1或2海藻内源温度诱导型启动子，其特征在于：所述启动子为SEQIDNO:1所示核苷酸序列；对SEQIDNO:1所示核苷酸序列进行一个或多个核苷酸的取代、缺失或添加所获得；或，与序列表中SEQIDNO:1限定的核苷酸序列具有90％以上同源性且具有转录起始作用的核苷酸序列。4.一种权利要求1所述的海藻内源温度诱导型启动子的应用，其特征在于：所...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜鹏，吴春辉，
申请(专利权)人：中国科学院海洋研究所，
类型：发明
国别省市：山东,37