一种诱导辣椒疫霉卵孢子萌发的培养基及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种诱导辣椒疫霉卵孢子萌发的培养基及其应用，属于植物保护技术领域。所述培养基由以下原料组成：ATCC medium:343 V8 juice agar、酵母提取物和乙酰柠檬酸三乙酯。本发明专利技术在传统的V8培养基中引入了酵母提取物和乙酰柠檬酸三乙酯，这不仅能够缩短辣椒疫霉卵孢子的萌发时间，而且显著地提升了卵孢子的萌发率。因此，本申请的培养基可以有效促进辣椒疫霉卵孢子的萌发。

A Culture Medium for Inducing Oospore Germination of Phytophthora capsici and Its Application

The invention discloses a culture medium for inducing oospore germination of Phytophthora capsici and its application, which belongs to the technical field of plant protection. The medium consists of ATCC medium: 343 V8 juice agar, yeast extract and triethyl acetyl citrate. The invention introduces yeast extract and triethyl acetyl citrate into the traditional V8 medium, which can not only shorten the germination time of the oospores of Phytophthora capsici, but also significantly improve the germination rate of the oospores. Therefore, the application medium can effectively promote the oospore germination of Phytophthora capsici.

【技术实现步骤摘要】
一种诱导辣椒疫霉卵孢子萌发的培养基及其应用
本专利技术属于植物保护
，具体地说，涉及一种诱导辣椒疫霉卵孢子萌发的培养基及其应用。
技术介绍
辣椒是人们喜食的主要蔬菜品种之一，但由疫病危害造成的辣椒死秧问题十分严重。辣椒疫病于1918年在美国新墨西哥州首次发现，引起辣椒疫病的病原菌PhytophthoracapsiciLeonian由Leonian于1922年命名，称为辣椒疫霉。辣椒疫病是世界范围内危害最严重的植物病原菌之一，可危害辣椒、番茄、茄子、黄瓜等多种重要蔬菜作物，还可危害洋葱、可可、橡胶树、大波斯菊等多种草本和木本植物。由于辣椒疫病的流行，辣椒发病后表现出烂根、烂果、茎腐等症状，严重时整株枯死，重病田死秧率达30％-100％，造成严重的经济损失。辣椒疫霉属于异宗配合病原卵菌，存在A1、A2两种交配型，在田间可发生有性生殖产生卵孢子。辣椒疫霉的卵孢子是由有性世代产生的具有厚壁的一种休眠有性孢子，在自然界中可以抵抗不良环境，是辣椒疫霉越冬的主要方式。自然条件下，辣椒疫霉卵孢子形成后通常需要经过一段时间的休眠才能陆续萌发，但是在室内条件下，一些野生型菌株或诱导获得的突变体菌株卵孢子产生量少、萌发率低，给疫霉菌遗传学等相关研究带来了困难。遗传分析研究要求辣椒疫霉在室内培养条件下产生的卵孢子能够大量快速萌发，以缩短试验周期并保障研究结果的准确性。
技术实现思路
1、要解决的问题针对现有的培养基无法有效促进辣椒疫霉卵孢子萌发的问题，本专利技术提供一种诱导辣椒疫霉卵孢子萌发的培养基及其应用，它可以有效促进辣椒疫霉卵孢子的萌发。2、技术方案为解决上述问题，本专利技术采用如下的技术方案。一种诱导辣椒疫霉卵孢子萌发的培养基，所述培养基由以下原料组成，以重量份计，ATCCmedium:343V8juiceagar20份-30份，酵母提取物0.5份-1.0份，乙酰柠檬酸三乙酯0.02份-0.04份，其中ATCCmedium:343V8juiceagar购买于美国ELITE-MEDIA公司，产品目录号为M867-01；所述ATCCmedium:343V8juiceagar中包括V8汁、碳酸钙和琼脂三种原料；所述培养基的制备工艺如下：首先在水中加入V8汁、碳酸钙及酵母提取物，混合均匀，制得第一混合液；接着调整第一混合液的pH值至7.2；然后加入琼脂，并加热至完全溶解，121℃高压蒸汽灭菌15min，制得第二混合液；接着将通过0.22μm滤孔过滤的乙酰柠檬酸三乙酯注入到第二混合液中，即得培养基。优选地，所述培养基由以下原料组成，以重量份计，ATCCmedium:343V8juiceagar25份，酵母提取物0.8份，乙酰柠檬酸三乙酯0.03份。优选地，所述酵母提取物与所述乙酰柠檬酸三乙酯的重量份之比为20：1。一种诱导辣椒疫霉卵孢子萌发的培养基的应用，包括以下步骤：(1)将辣椒疫霉的卵孢子接种到上述所述的培养基中，25℃-28℃和黑暗条件下培养5d-8d；(2)采用质量分数为0.05％-0.10％的次氯酸钠处理步骤(1)培养后的卵孢子；(3)将步骤(2)处理后的卵孢子在16h日光灯/8h黑光灯交替照射下放置上述所述的培养基中培养3d-5d。优选地，步骤(1)中27℃和黑暗条件下培养7d。优选地，步骤(2)中次氯酸钠的质量分数为0.08％。优选地，步骤(2)中所述处理的方法为：将步骤(1)培养后的卵孢子制成悬浮液，向悬浮液中加入次氯酸钠，超声处理30s-40s。优选地，步骤(3)中25℃-28℃下培养4d。3、有益效果相比于现有技术，本专利技术的有益效果为：本专利技术在传统的V8培养基中引入了酵母提取物和乙酰柠檬酸三乙酯，这不仅能够缩短辣椒疫霉卵孢子的萌发时间，而且显著地提升了卵孢子的萌发率。因此，本申请的培养基可以有效促进辣椒疫霉卵孢子的萌发。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术进一步进行描述。实施例1本实施例的诱导辣椒疫霉卵孢子萌发的培养基，所述培养基由以下原料组成，以重量份计，ATCCmedium:343V8juiceagar20份，酵母提取物1.0份，乙酰柠檬酸三乙酯0.02份，其中ATCCmedium:343V8juiceagar购买于美国ELITE-MEDIA公司，产品目录号为M867-01；所述ATCCmedium:343V8juiceagar中包括V8汁、碳酸钙和琼脂三种原料；所述培养基的制备工艺如下：首先在水中加入V8汁、碳酸钙及酵母提取物，混合均匀，制得第一混合液；接着调整第一混合液的pH值至7.2；然后加入琼脂，并加热至完全溶解，121℃高压蒸汽灭菌15min，制得第二混合液；接着将通过0.22μm滤孔过滤的乙酰柠檬酸三乙酯注入到第二混合液中，即得培养基。上述诱导辣椒疫霉卵孢子萌发的培养基的应用，包括以下步骤：(1)将辣椒疫霉的卵孢子接种到上述所述的培养基中，25℃和黑暗条件下培养8d；(2)采用质量分数为0.05％的次氯酸钠处理步骤(1)培养后的卵孢子，具体如下：将步骤(1)培养后的卵孢子制成悬浮液，向悬浮液中加入次氯酸钠，超声(超声功率为250W，工作频率为40KHz)处理40s；(3)将步骤(2)处理后的卵孢子在16h日光灯/8h黑光灯交替照射下放置上述所述的培养基中25℃下培养3d。实施例2本实施例的诱导辣椒疫霉卵孢子萌发的培养基，所述培养基由以下原料组成，以重量份计，ATCCmedium:343V8juiceagar30份，酵母提取物0.5份，乙酰柠檬酸三乙酯0.04份，其中ATCCmedium:343V8juiceagar购买于美国ELITE-MEDIA公司，产品目录号为M867-01；所述ATCCmedium:343V8juiceagar中包括V8汁、碳酸钙和琼脂三种原料；所述培养基的制备工艺如下：首先在水中加入V8汁、碳酸钙及酵母提取物，混合均匀，制得第一混合液；接着调整第一混合液的pH值至7.2；然后加入琼脂，并加热至完全溶解，121℃高压蒸汽灭菌15min，制得第二混合液；接着将通过0.22μm滤孔过滤的乙酰柠檬酸三乙酯注入到第二混合液中，即得培养基。上述诱导辣椒疫霉卵孢子萌发的培养基的应用，包括以下步骤：(1)将辣椒疫霉的卵孢子接种到上述所述的培养基中，28℃和黑暗条件下培养5d；(2)采用质量分数为0.10％的次氯酸钠处理步骤(1)培养后的卵孢子，具体如下：将步骤(1)培养后的卵孢子制成悬浮液，向悬浮液中加入次氯酸钠，超声(超声功率为250W，工作频率为40KHz)处理30s；(3)将步骤(2)处理后的卵孢子在16h日光灯/8h黑光灯交替照射下放置上述所述的培养基中28℃下培养5d。实施例3本实施例的诱导辣椒疫霉卵孢子萌发的培养基，所述培养基由以下原料组成，以重量份计，ATCCmedium:343V8juiceagar25份，酵母提取物0.8份，乙酰柠檬酸三乙酯0.03份，其中ATCCmedium:343V8juiceagar购买于美国ELITE-MEDIA公司，产品目录号为M867-01；所述ATCCmedium:343V8juiceagar中包括V8汁、碳酸钙和琼脂三种原料；所述培养基的制备工艺如下：首先在水中加入V8汁、碳酸钙及酵母提取物，混合均匀，制得第一混合液；接着调整第本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种诱导辣椒疫霉卵孢子萌发的培养基，其特征在于：所述培养基由以下原料组成，以重量份计，ATCC medium:343V8juice agar 20份‑30份，酵母提取物0.5份‑1.0份，乙酰柠檬酸三乙酯0.02份‑0.04份，其中ATCC medium:343V8juice agar购买于美国ELITE‑MEDIA公司，产品目录号为M867‑01；所述ATCC medium:343V8juice agar中包括V8汁、碳酸钙和琼脂三种原料；所述培养基的制备工艺如下：首先在水中加入V8汁、碳酸钙及酵母提取物，混合均匀，制得第一混合液；接着调整第一混合液的pH值至7.2；然后加入琼脂，并加热至完全溶解，121℃高压蒸汽灭菌15min，制得第二混合液；接着将通过0.22μm滤孔过滤的乙酰柠檬酸三乙酯注入到第二混合液中，即得培养基。

【技术特征摘要】
1.一种诱导辣椒疫霉卵孢子萌发的培养基，其特征在于：所述培养基由以下原料组成，以重量份计，ATCCmedium:343V8juiceagar20份-30份，酵母提取物0.5份-1.0份，乙酰柠檬酸三乙酯0.02份-0.04份，其中ATCCmedium:343V8juiceagar购买于美国ELITE-MEDIA公司，产品目录号为M867-01；所述ATCCmedium:343V8juiceagar中包括V8汁、碳酸钙和琼脂三种原料；所述培养基的制备工艺如下：首先在水中加入V8汁、碳酸钙及酵母提取物，混合均匀，制得第一混合液；接着调整第一混合液的pH值至7.2；然后加入琼脂，并加热至完全溶解，121℃高压蒸汽灭菌15min，制得第二混合液；接着将通过0.22μm滤孔过滤的乙酰柠檬酸三乙酯注入到第二混合液中，即得培养基。2.根据权利要求1所述的诱导辣椒疫霉卵孢子萌发的培养基，其特征在于：所述培养基由以下原料组成，以重量份计，ATCCmedium:343V8juiceagar25份，酵母提取物0.8份，乙酰柠檬酸三乙酯0.03份。3.根据权利要求1所述的诱导辣椒疫霉卵孢子萌...

【专利技术属性】
技术研发人员：高智谋，刘枭，王艺烨，陈方新，潘月敏，
申请(专利权)人：安徽农业大学，
类型：发明
国别省市：安徽,34