一种对突背蔗犀金龟具有致病力的白僵菌菌株及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种对突背蔗犀金龟具有致病力的白僵菌菌株及其应用，所述对突背蔗犀金龟具有致病力的白僵菌菌株为球孢白僵菌Bb‑YMM菌株，已于2015年9月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.11464，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。该对突背蔗犀金龟具有致病力的白僵菌菌株培养简单，生长快速，产孢量大，孢子萌发率高；其分生孢子对突背蔗犀金龟幼虫致病力强，环保无污染、不易产生抗药性，可以广泛地用于突背蔗犀金龟的防治。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物技术防治领域，涉及一种白僵菌菌株及其应用，具体地说是涉及一种对突背蔗犀金龟具有致病力的白僵菌菌株及其应用。
技术介绍
突背蔗犀金龟(Alissonotum impressicolle Arrow)又名突背犀金龟、突背蔗龟、黑色蔗龟，属鞘翅目，犀金龟科，蔗犀金龟属，是我国最重要的糖料作物——甘蔗的主要地下害虫之一，在我国的广西、广东、云南、贵州、台湾等甘蔗产区严重发生。该虫1年发生1代，幼虫和成虫均为害甘蔗，成虫在甘蔗苗期咬食蔗芽及蔗苗基部，造成蔗苗枯心死亡且不能再分蘖，严重时蔗苗受害率达40％以上，缺苗断垄严重；幼虫取食蔗根，将蔗头蛀食成洞穴状，影响甘蔗后期生长及宿根年限，引起严重倒伏，一般减产15％-25％，严重者达50％以上，甚至绝收，甘蔗产业面临严重威胁。2013-2015年连续三年调查发现，在广西平果县发现突背蔗犀金龟发生严重地区达2万多头/亩，甘蔗产业面临严重威胁。目前，生产上仍以化学农药为主来防治突背蔗犀金龟。但由于该虫生存环境较为隐蔽，化学防治效果相对较差，且大量化学农药的使用，高残留、抗药性、污染环境等一系列问题越来越突出。随着环境污染的加重、人类环保意识的增强以及绿色农业发展的需求，生物防治显得尤为重要。因此，探寻突背蔗犀金龟高效、环保、无公害的生物防治途径是目前生产上的迫切需求。白僵菌作为农作物害虫的一类重要致病菌，以其对人畜及作物安全性高、无环境污染及残留、害虫不易产生抗性、显著的流行潜力等优点，在害虫生物防治中占有重要的地位和良好的应用前景，而其对突背蔗犀金龟幼虫的侵染还未见报道。
技术实现思路
针对以上技术问题，本专利技术提供了一种对突背蔗犀金龟具有致病力的白僵菌菌株及其应用，其分生孢子对突背蔗犀金龟幼虫致病力强，环保无污染、不易产生抗药性，可以广泛地用于突背蔗犀金龟的防治。对此，本专利技术的技术方案为：一种对突背蔗犀金龟具有致病力的白僵菌菌株，所述对突背蔗犀金龟具有致病力
的白僵菌菌株为球孢白僵菌(Beauveria bassiana)Bb-YMM菌株，已于2015年9月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.11464，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。其分类命名为球孢白僵菌。该球孢白僵菌(Beauveria bassiana)Bb-YMM具有以下特征：该菌株从广西壮族自治区农业科学院武鸣里建基地玉米地中采集的玉米螟幼虫僵虫虫体上分离得到。保存方式为低温斜面保存。在PDA培养基上27±1℃下生长5天，菌落直径22.92mm，10天达70.75mm。菌落白色至乳白色，初期为疏茸状或棉絮状，后期形成乳粉状的孢子层。菌丝分枝，有隔，无色光滑，宽2.7μm～3.6μm，分生孢子梗单生或分枝，长形、圆柱状或长瓶状，长度变化大，顶生或侧生多个产孢细胞。产孢细胞呈球形，有时圆柱状或瓶形，直或略弯，呈麦穗轴状屈曲；分生孢子无色，单胞，球形至卵圆形，大小为1.8～2.2μm×1.9～2.5μm。最佳生长温度范围为24～28℃。进一步的，所述球孢白僵菌Bb-YMM的序列如SEQ ID NO:1所示。本专利技术公开了如上所述的对突背蔗犀金龟具有致病力的白僵菌菌株的应用，其应用在突背蔗犀金龟的防治中。本专利技术公开了一种杀虫菌剂，其包括如上所述的对突背蔗犀金龟具有致病力的白僵菌菌株。本专利技术具有以下有益效果：本专利技术是初次分离到对突背蔗犀金龟幼虫具有致病力的白僵菌菌株，培养简单，生长快速，产孢量大，孢子萌发率高；其分生孢子对突背蔗犀金龟幼虫致病力强，环保无污染、不易产生抗药性，可以广泛地用于突背蔗犀金龟的防治。附图说明图1为球孢白僵菌Bb-YMM菌株在PDA培养基上27±1℃下培养15天的菌落形态图。图2为突背蔗犀金龟幼虫图。图3为突背蔗犀金龟幼虫被球孢白僵菌Bb-YMM感染症状图。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发
明进行进一步详细说明。此处所描述的具体实施例仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。实施例1病原菌的分离、鉴定。将采集到的自然感染的玉米螟僵虫先用75％酒精浸没3～5s，再用0.1％升汞表面消毒3min，灭菌水冲洗3次，在无菌条件下，用灭菌刀具将感染虫体切3mm见方小块接种于PDA平板上，放入28℃培养箱中培养，长出菌丝后按常规方法进行单孢分离、培养获得纯的球孢白僵菌菌株Bb-YMM，转移到PDA斜面上培养7天，在4℃冰箱保藏。形态学鉴定：将分离纯化的球孢白僵菌菌株在直径为90mm的平板PDA培养基上于27±1℃条件下培养，4-5天后挑取白色菌丝制片在显微镜下观察菌株的菌丝和分生孢子梗形态；10-12天后挑取成熟分生孢子制片观察分生孢子的形态与大小。15天左右观察记录菌落形态特征，如图1所示，菌落白色至乳白色，初期为疏茸状或棉絮状，后期形成乳粉状的孢子层。菌丝分枝，有隔，无色光滑，宽2.7μm～3.6μm，分生孢子梗单生或分枝，长形、圆柱状或长瓶状，长度变化大，顶生或侧生多个产孢细胞；产孢细胞呈球形，有时圆柱状或瓶形，直或略弯，呈麦穗轴状屈曲；分生孢子无色，单胞，球形至卵圆形，大小为1.8～2.2μm×1.9～2.5μm。最佳生长温度范围为24～28℃。菌株的ITS序列测定及分子鉴定：利用Bb-YMM菌株的菌丝体提取总DNA，以提取的DNA为模板，以真菌ITS5区通用引物进行PCR扩增、测序，经中国农业微生物菌种保藏管理中心鉴定为球孢白僵菌Beauveria bassiana，所述球孢白僵菌Bb-YMM的序列如下：(如序列表中SEQ ID NO:1所示)GACCTATGCGACGCGGAGGGACATTACCGAGTTTTCACTCCCCAACCCTTCTGTGAACCTACCTATCGTTGCTTCGGCGGACTCGCCCCAGCCCGGACGCGGACTGGACCAGCGGCCCGCCGGGGACCTCAAACTCTTGTATTCCAGCATCTTCTGAATACGCCGCAAGGCAAAACAAATGAATCAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGCTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATCCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCGCCAGCATTCTGGCGGGCATG
CCTGTTCGAGCGTCATTTCAACCCTCGACCTCCCCTTGGGGAGGTCGGCGTTGGGGACCGGCAGCACACCGCCGGCCCTGAAATGGAGTGGCGGCCCGTCCGCGGCGACCTCTGCGTAGTAATACAGCTCGCACCGGAACCCCGACGCGGCCACGCCGTAAAACACCCAACTTCTGAACGTTGACCTCGAATCAGGTAGGACTACCCGCTGAACTTAAGCATATCAAA实施例2球孢白僵菌(Beauveria bassiana)Bb-YMM的生物学特性。菌落生长速率和产孢量的测定：用点滴法将球孢白僵菌(Beauveria bassiana)菌株Bb-YM本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种对突背蔗犀金龟具有致病力的白僵菌菌株，其特征在于：所述对突背蔗犀金龟具有致病力的白僵菌菌株为球孢白僵菌Bb‑YMM菌株，已于2015年9月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.11464，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

【技术特征摘要】
1.一种对突背蔗犀金龟具有致病力的白僵菌菌株，其特征在于：所述对突背蔗犀金龟具有致病力的白僵菌菌株为球孢白僵菌Bb-YMM菌株，已于2015年9月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.11464，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。2.根据权利要求1所述的对突背蔗犀金龟具有致病力的白僵菌菌株，其特征在于：所述对突背蔗犀金龟具有致病力的白僵菌菌株的菌落为白色至乳白色，初期为疏茸状或棉絮状，后期形成乳粉状的孢子层...

【专利技术属性】
技术研发人员：龙秀珍，于永浩，曾宪儒，高旭渊，江小冬，韦德卫，曾涛，
申请(专利权)人：广西壮族自治区农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：广西;45