The invention discloses a preparation method of human umbilical cord Huatong gum mesenchymal stem cells (WJMSCs). The WJMSCs of the invention are derived from the umbilical cord of healthy full-term newborns. The umbilical cord Huatong gum mesenchymal stem cells of the invention have strong proliferation and differentiation ability, stable biological performance, no expression of MHC II, MHC I is much lower than that of bone marrow mesenchymal stem cells, and have wide sources, convenient materials, painless donors, easy collection, extraction and preservation, relatively pure, less pollution, and broad clinical application prospects.
【技术实现步骤摘要】
一种人脐带华通胶间充质干细胞的制备方法
本专利技术属于医药领域，具体涉及一种人脐带华通胶间充质干细胞的制备方法。
技术介绍
间充质干细胞是来源于中胚层的干细胞，是一种非造血来源的多向分化潜能的干细胞。由于其免疫源性弱，并能向多种组织增殖分化，因此，已经成为组织工程
及细胞移植治疗中理想的种子细胞来源。最早，在人骨髓中发现间充质干细胞，然而，骨髓中还存在大量其他细胞，如造血细胞、成纤维细胞、脂肪细胞等，间充质干细胞含量相对较少，分离纯化相对困难，同时发现，随着年龄的增长，骨髓间充质干细胞的数量和增殖分化能力均显著下降。同时，获取骨髓组织对供者带来较大困苦和创伤，难以广泛应用于临床。相比于骨髓间充质干细胞，华通胶间充质干细胞，来源于新生儿脐带，属于医疗废弃组织，对供者不产生困苦和损伤，且来源广泛，因此更容易得到推广应用于临床。华通胶组织是脐带动静脉之间的胶冻样间质，含有较多胶原纤维，胶原酶能够水解华通胶组织的胶原纤维结构，但不会对WJMSCs造成损伤。
技术实现思路
为了较少对供者的创伤，获取生物纯度及活性更高的间充质干细胞，本专利技术提供一种WJMSCs的制备方法...
【技术保护点】
1.一种人脐带华通胶间充质干细胞的制备方法，其特征在于，采用以下方法制备：取新生儿脐带，用平衡盐溶液洗去脐带残留血液，取血管之间以及血管与外膜之间的华通胶组织，剪切成小碎块，平衡盐溶液冲洗后，浸于0.2％Ⅱ型胶原酶溶液中消化；消化离心弃上清两次后，加DMEM/F12培养基和胎牛血清培养；细胞于贴壁生长后，用DMEM/F12完全培养基进行换液，待细胞融合达到80‑90％时，进行传代培养。
【技术特征摘要】
1.一种人脐带华通胶间充质干细胞的制备方法，其特征在于，采用以下方法制备：取新生儿脐带，用平衡盐溶液洗去脐带残留血液，取血管之间以及血管与外膜之间的华通胶组织，剪切成小碎块，平衡盐溶液冲洗后，浸于0.2％Ⅱ型胶原酶溶液中消化；消化离心弃上清两次后，加DMEM/F12培养基和胎牛血清培养；细胞于贴壁生长后，用DMEM/F12完全培养基进行换液，待细胞融合达到80-90％时，进行传代培养。2.根据权利要求1所述的人脐带华通胶间充质干细胞的制备方法，其特征在于，其使用的新生儿脐带，是足月产新生儿，且产妇的乙肝表面抗原、丙肝抗体、梅毒抗体、艾滋病抗体免疫4项均为阴性的健康产妇。3.根据权利要求1所述的人脐带华通胶间充质干细胞的制备方法，其特征在于，将脐带在超净台中用平衡盐溶液洗去脐带残留血液，用手术剪将脐带剪成4cm大小节段，进入下一工序。4.根据权利要求1所述的人脐带华通胶间充质干细胞的制备方法，其特征在于，取每一节段，手术剪纵行剪开脐带外膜，仔细游离2条脐带动脉和1条脐带静脉并丢弃，取血管之间以及血管与外膜之间的华通胶组织，剪切成约1mm3大小碎块，平衡盐溶液冲洗后，浸于浓度为0.2％胶原酶溶液中，置37℃恒温消化18小时，进入下一工序。5.根据权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员：朱迪·德瓦库玛，焦阳，王铁，杨丽华，李靖，
申请(专利权)人：江苏瑞思坦生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32
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