丹叶大黄素在制备治疗脓毒症药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于医药技术领域，特别涉及丹叶大黄素在制备治疗脓毒症药物中的应用。本发明专利技术利用大肠杆菌(E.coli)及盲肠穿刺结扎术（CLP）诱导的脓毒症模型，注射丹叶大黄素药剂，筛选出了可降低脓毒症死亡率的丹叶大黄素剂量。实验结果表明，5毫克每千克体重～10毫克每千克体重剂量的丹叶大黄素可有效降低脓毒症小鼠死亡率，降低脓毒症小鼠腹腔灌洗液中肿瘤坏死因子α和白介素6及外周血中ALT和AST水平。

Application of Danye Emodin in the Preparation of Drugs for the Treatment of Sepsis

The invention belongs to the technical field of medicine, in particular to the application of emodin from Danye in the preparation of sepsis drugs. The present invention utilizes the sepsis model induced by E. coli and cecal puncture ligation (CLP) to inject emodin, and screens out the dosage of emodin which can reduce the mortality of sepsis. The results showed that 5 mg to 10 mg/kg body weight of emodin could effectively reduce the mortality of sepsis mice and the levels of TNF-a, IL-6 in peritoneal lavage fluid and ALT and AST in peripheral blood of sepsis mice.

【技术实现步骤摘要】
丹叶大黄素在制备治疗脓毒症药物中的应用
本专利技术属于医药
，特别涉及丹叶大黄素在制备治疗脓毒症药物中的应用。
技术介绍
脓毒症作为重症医学科病死率最高的病种之一，全球每年约有两千万患者罹患脓毒症，其中约百分之五十患者还可能合并脓毒症休克。虽然近十年来，对脓毒症的诊断及治疗研究取得了明显的进展，但仍然约有26%的患者死于脓毒症。因此，本领域迫切需要寻找新的诊疗方法。巨噬细胞作为机体重要的免疫效应细胞，在脓毒症的发生发展中具有重要的作用，其在过度炎症反应时分泌的大量炎症因子可加重脓毒症，导致不良结局。细胞色素P4501A1（CYP1A1）作为一种羟化酶，主要存在于肝脏，肠道及肺脏当中，可催化代谢多种内外源型物质。目前有研究表明，CYP1A1与支原体感染，肺部氧化应激损伤及空气污染中的细颗粒物代谢有关，但其与脓毒症的关系仍不明确。有研究指出，在脂多糖或者脓毒症打击时，小鼠体内多个脏器及巨噬细胞中CYP1A1均高表达，提示可能将CYP1A1作为干预脓毒症进程的靶点。丹叶大黄素(Rhapontigenin)作为CYP1A1的特异性抑制剂，其结构与白藜芦醇有一定的相似性，可抑制前列腺癌细胞，但目前尚无临床应用。有研究报道，丹叶大黄素可明显降低脂多糖诱导的J774巨噬细胞所分泌的白介素6及一氧化氮水平，提示丹叶大黄素在体外对巨噬细胞有一定的抗炎效应，但其在体内的调控效应，尤其对脓毒症的保护效应仍然未知。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种新的治疗脓毒症药物的药物，具体是丹叶大黄素在制备治疗脓毒症药物中的应用。所述药物通过抑制CYP1A1的表达降低脓毒症的死亡率。所述药物以注射剂给药所述丹叶大黄素在药物中的浓度为5毫克每千克体重～10毫克每千克体重。进一步的技术方案是所述丹叶大黄素在药物中的浓度为5毫克每千克体重或10毫克每千克体重。丹叶大黄素分子量:258.27g/mol，分子式:C15H14O4，分子结构式：本专利技术利用大肠杆菌(E.coli)及盲肠穿刺结扎术（CLP）诱导的脓毒症模型，腹腔注射丹叶大黄素药剂，筛选出了可降低小鼠脓毒症死亡率的丹叶大黄素剂量。通过观察小鼠生存率，检测其腹腔灌洗中肿瘤坏死因子α和白介素6水平，检测其外周血清中丙氨酸转移酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)水平。实验结果表明，5毫克每千克体重～10毫克每千克体重剂量的丹叶大黄素可有效降低脓毒症小鼠死亡率，降低脓毒症小鼠腹腔灌洗液中肿瘤坏死因子α和白介素6及外周血中ALT和AST水平。以下通过实施例进一步说明本专利技术，但不作为本专利技术的限制。附图说明图1为丹叶大黄素对E.coli诱导的脓毒症的生存保护；图2为丹叶大黄素对CLP诱导的脓毒症的生存保护；图3为丹叶大黄素对E.coli打击后，小鼠腹腔灌洗液中肿瘤坏死因子α和白介素6及外周血中ALT和AST的影响；图4为丹叶大黄素对CLP打击后，小鼠腹腔灌洗液中肿瘤坏死因子α和白介素6及外周血中ALT和AST的影响。具体实施方式本专利技术使用的丹叶大黄素粉末购自美国西格玛(Sigma)公司,货号为PHL83903。丹叶大黄素溶液配制方法（以10毫克每千克体重剂量为例，其他剂量配法相似）：用125微升DMSO溶解5毫克纯丹叶大黄素粉末并充分混匀，取80微升混匀后液体加入1.52毫升胎牛血清中充分混匀，再加入14.4毫升1640培养基充分混匀，得到浓度为0.2毫克每毫升的储备液，对每只小鼠（20克）取1毫升储备液于腹腔注射。对照液配制除不含丹叶大黄素粉末外，其他同上。实施例1丹叶大黄素对两种脓毒症模型的生存保护将80只雄性C57BL/6小鼠分为四组，每组20只。其中药物治疗组为三组，对照组为一组。大肠杆菌（E.coli）诱导的脓毒症模型：药物治疗组分为三种丹叶大黄素不同剂量组：2.5毫克每千克体重、5毫克每千克体重及10毫克每千克体重。药物治疗组每组按上述剂量分别腹腔注射丹叶大黄素溶液，对照组腹腔注射等量对照液。注射完毕后，马上对每只小鼠腹腔注射大肠杆菌（3x1010CFUs每千克体重）及等量对照液。造模后按每小时观察一次对小鼠生存情况进行观察。盲肠穿刺结扎术（CLP）诱导的脓毒症模型：分组及给药量同E.coli诱导的脓毒症实施例，按照文献描述的CLP造模标准方法(参考文献PubMedID:28850247)进行造模，对照组只开腹不穿刺结扎盲肠。造模后马上腹腔注射丹叶大黄素溶液，按每小时观察一次对小鼠生存情况进行观察。结果表明，本研究使用的丹叶大黄素剂量为5毫克每千克体重及10毫克每千克体重时对脓毒症小鼠有明显的生存保护作用，可有效降低小鼠死亡率。参见图1和图2（*,p值小于0.05；ns，p值大于0.05）实施例2丹叶大黄素对两种脓毒症模型小鼠腹腔灌洗液中肿瘤坏死因子α和白介素6及外周血中ALT和AST的影响。E.coli诱导的脓毒症模型和CLP诱导的脓毒症模型的建立及对照液使用均同实施例1，丹叶大黄素剂量为10毫克每千克体重。每组小鼠为3只雄性C57BL/6小鼠，每只重约20克。给药后8小时眼球放血法处死小鼠，并收集每只小鼠眼球血约1毫升，于室温下静置半小时后，以300g，五分钟参数下离心，取100微升上清，检测ALT及AST水平。放血后立即用5毫升冷无菌生理盐水冲洗小鼠腹腔，取出腹腔灌洗液后于300g，五分钟参数下离心，取1毫升上清用于ELISA检测其中肿瘤坏死因子α和白介素6。结果表明，本专利技术使用的丹叶大黄素剂量（5毫克每千克体重及10毫克每千克体重）可有效降低腹腔灌洗中肿瘤坏死因子α和白介素6水平及外周血中ALT和AST水平。参见图3，图4（*,p值小于0.05）。结论：通过上述实施例，我们初步证实丹叶大黄素在5毫克每千克体重及10毫克每千克体重剂量时对脓毒症小鼠具有明显的保护效应，可显著降低脓毒症小鼠死亡率，降低脓毒症小鼠腹腔灌洗液中肿瘤坏死因子α和白介素6水平及外周血中ALT和AST水平。这为今后丹叶大黄素在制备治疗脓毒症药物中的应用奠定了基础。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.丹叶大黄素在制备治疗脓毒症药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.丹叶大黄素在制备治疗脓毒症药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述药物通过抑制CYP1A1的表达降低脓毒症的死亡率。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述药物以注射剂给药。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所...

【专利技术属性】
技术研发人员：田李星，罗莉，杨雪，唐婉琦，梁华平，
申请(专利权)人：中国人民解放军陆军特色医学中心，
类型：发明
国别省市：重庆,50