用于预防和治疗败血症的方法与组合物技术

本发明专利技术涉及一种通过向患者联合施用败血症预防或治疗量的一或多种补体抑制剂和败血症预防或治疗量的一或多种CD14途径抑制剂来预防或治疗败血症的方法。所述补体抑制剂较佳是可结合至并抑制诸如C5a等补体蛋白的抗体，且所述CD14途径抑制剂较佳是可结合至并抑制诸如CD14和LPS等CD14途径组分的抗体。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术概言之涉及用于预防和治疗败血症的方法和组合物，且具体而言，本专利技术涉及补体抑制剂和CD14途径抑制剂的组合在预防或治疗败血症中的用途。
技术介绍
补体免疫系统可保护身体免受病原细菌、病毒、寄生虫和其他有害生物体的侵害。免疫系统分为两个部分体液系统和细胞系统。一般而言，体液系统包括补体系统和可防御病原体的抗体的产生。补体系统或简言为补体涉及可协助抗体进行宿主防御的蛋白质的产生。 补体是包括至少30个表面结合可溶蛋白的一组蛋白。通过在56 °C下加热血清30分钟会破坏某些可溶蛋白的活性。补体蛋白参与用于吞噬作用的微生物调理作用、通过裂解来直接杀灭微生物、白细胞对于炎症位点的趋化吸引、白细胞的激活和免疫复合体的加工。补体蛋白可在一连锁反应中发挥作用，其中一蛋白质的结合可促进该连锁反应中下一蛋白质的结合。连锁反应的激活会引起释放可促成炎症反应的被称作过敏毒素(C3a、 Wa及最有效的C5a)的生物活性小肽，并最终形成一可裂解靶细胞的膜攻击复合体(rab-9 或MAC)。不同的补体分子可由不同细胞类型合成，例如，成纤维细胞和肠上皮细胞可生成 Cl，而大部分组成是在肝中合成。补体系统的组成和机制已为人们所熟知。基本上，存在三个补体途径传统途径、 凝集素途径和旁路途径。传统途径主要由含有抗原和IgG或IgM的免疫复合体触发，但也可由例如C-反应性蛋白等其他作用剂触发。凝集素途径通过甘露糖结合凝集素(MBL)或纤维胶凝蛋白结合到异质表面上的碳水化合物结构(例如，甘露聚糖)上来触发。旁路途径主要由重复多糖和其他聚合体结构(诸如发现于细菌上的那些聚合体结构)来触发。当Clq(Clqrs复合体的一部分)的球形结构域结合到IgM或多个IgG分子的Fc 片段上时，传统途径得到激活。在钙离子存在下，此结合会引起两个Clr分子的自身催化激活。Clr分子可激活两个Cls分子。Cls是一可使C4a自C4b解离的丝氨酸蛋白酶。C4b 立即结合到靶细胞表面上的邻近蛋白质或碳水化合物上，且随后在镁离子存在下结合到C2 上。Cls可使C2b从此复合体上解离下来，生成传统途径的C3转化酶，C4b2a0 C3转化酶可使许多C3分子解离成C3a和C3b。一些Ob分子返回结合到C4bh上以生成传统途径的 C5转化酶，C4b2a3b0 C5转化酶可将C5解离成Cfe和C5b。C5b可结合至细胞表面从而引发MAC的形成。C3a、C4a和Cfe皆是过敏毒素。C3a和Cfe也是化学吸引剂。C3a和Cfe具有结合肥大细胞和嗜碱性粒细胞的能力。Cfe也是一嗜中性粒细胞、嗜碱性粒细胞和巨嗜细胞的有效激活剂并可引起对血管内皮细胞上的黏附分子的诱导。Cfe也可下调嗜中性粒细胞和单核细胞。当C3a和⑶a将其受体结合到肥大细胞与嗜碱性粒细胞上时，这些细胞会向血液和组织中释放组胺及其他高活性肽。这些肽可增加血管壁的渗透性以使嗜中性粒细胞迁移至所述区域中。嗜中性粒细胞可进一步因C5a的有效趋化(吸引剂)作用受到激励而迁移至补体激活位点。嗜中性粒细胞可吞噬入侵的病原体，且也可释放能够将巨噬细胞吸引到感染位点的介质。这些细胞还能够吞噬入侵细胞并进一步促发炎症反应及有效消除大量感染微生物。“凝集素途径”除了由结合到细菌表面末端甘露糖基团的钙相依凝集素MBL引发外皆与传统途径类似。MBL类似于Clq。当MBL结合到其靶标上时，其会释放并因此激活已知为MASPl、MASP2和MASP3 (与甘露聚糖结合凝集素相关的丝氨酸蛋白酶)的三个相关丝氨酸蛋白酶，其类似于Clr和ClS。其中，MASP2在使C4解离成C4b和Wa及使C2解离成 C2b和C2a的过程中发挥重要作用。C4和C2激活之后，凝集素途径与传统途径相同。旁路补体途径涉及一利用由传统途径产生的C3b的放大环路。一些由传统途径 C3转化酶生成的Ob分子集中到旁路途径中。表面结合的Ob可结合B因子以生成C!3bB， C3bB可成为D因子的底物。D因子是一可解离Ba片段的丝氨酸蛋白酶，其中C3bm3仍结合至靶细胞表面上。Obrn3通过备解素(P)得到稳定，形成可作为旁路途径C3转化酶的复合体C3bBbP。同传统途径中一样，此C3转化酶参与一放大环路以解离许多C3分子，从而引起 C3b分子在靶细胞上的沉积。一些此等C!3b分子返回结合到CIBbm3上从而形成C3bBb3b，即旁路途径C5转化酶。C5转化酶可将C5解离成Cfe*C5b。rab结合到细胞表面以引发膜攻击复合体的形成。传统、凝集素和旁路途径皆随着C5转化酶的形成而结束。C5转化酶可经由裂解途径引起MAC的组装。组分C5至C8以串联形式相互连接，并促进一或多个C9单体插入至靶细胞的脂双层中。此插入会导致可引起钙流入的孔的形成及随后的有核细胞的细胞激活或者如果攻击足够强会引起细胞解离及死亡。CD14 途径⑶14是一 53kD的经糖磷脂酰肌醇(PI)连接的糖蛋白并可作为单核细胞、巨噬细胞和粒细胞表面上的高亲和性内毒素(LPQ受体来发挥作用。由于CD14是一经GPI连接的蛋白质，因此其不具有可传递信号的跨膜或细胞内部分。CD14也可以可溶形式存在于人类血清和其他体液中。可溶CD14(sCD14)可直接分泌或衍生自膜结合分子的蛋白酶相依性排毒。s⑶14会与膜结合⑶14(mCD14)竞争结合LPS，并能够中和LPS诱发的活体外和活体内反应。s⑶14可调介由LPS诱发的不表达⑶14的内皮、表皮和平滑肌细胞的激活。LBP(脂多糖结合蛋白)是一 58kD急性期糖蛋白并可以高亲和性结合到LPS的脂质A部分，并可催化LPS导致的⑶14相依性细胞激活。MD2是一分泌型附属蛋白，其很可能通过稳定TLR4 二聚体来结合toll样受体TLR4的胞外结构域并可促进LPS反应性。⑶14/MD2/TLR4复合体似乎是分离自大部分革兰氏阴性生物体的LPS的主要且可能是唯一的受体。已知⑶14途径在预防和治疗败血症方面起重要作用，且已知抗⑶14抗体可通过 CD14 途径减轻败血症，例如，Leturcq DJ, J Clin Invest 1996 Oct 1 ；98 (7) :1533-8 和美国专利第6，495，332号与第6，四7，049号中所述。⑶14途径包括若干步骤。一般而言， 来自革兰氏阴性细菌外膜的LPS可通过与血浆中LPS结合蛋白(LBP)形成一复合体来启6动所述途径的顺序。所述LPS-LBP复合体可将LPS单体传递给吞噬细胞细胞膜中的CD14。 ⑶14和MD2可促进LPS与可向细胞内传导信号的TLR4的结合。LPS与TLR4的结合可将衔接分子MyD88募集到受体胞质结构域上，且随后MyD88可结合至肿瘤坏死因子受体相关因子6 (TRAF6)。TRAF6可结合丝氨酸-苏氨酸激酶IRAK。据信，TRAF6/IRAK复合体可激活 NFkB激酶(NIK)两个亚基的磷酸化，并使其形成异二聚体——I κ B激酶(IKK)。随后IKK 二聚体使I κ B磷酸化并使其从NF κ B上解离下来。随后NF κ B可迁移至细胞核中、结合至 DNA上并激活编码炎症介质的基因的转录。败血症败血症是一种其特征为对感染产生强烈全身性炎症反应的疾病。细菌性败血症是一种由血液中具侵害性细菌感染引起的复杂的全身性本文档来自技高网...

【技术保护点】
合片段、抗Ｃ５ｂ抗体或其结合片段、Ｃ５ａ受体拮抗剂、抗Ｂ因子抗体或其结合片段、抗ＭＢＬ抗体或其结合片段、或抗ＭＡＳＰ抗体或其结合片段。１．一种可用于预防或治疗败血症的组合物，其包括一或多种补体抑制剂和一或多种ＣＤ１４途径抑制剂，其中所述一或多种补体抑制剂包括：抗Ｃ１抗体或其结合片段、抗Ｃ２抗体或其结合片段、抗Ｃ３抗体或其结合片段、抗Ｃ４抗体或其结合片段、抗Ｃ４ａ抗体或其结

【技术特征摘要】
2003.05.15 US 60/470,6811.一种可用于预防或治疗败血症的组合物，其包括一或多种补体抑制剂和一或多种 ⑶14途径抑制剂，其中所述一或多种补体抑制剂包括抗Cl抗体或其结合片段、抗C2抗体或其结合片段、抗C3抗体或其结合片段、抗C4抗体或其结合片段、抗Wa抗体或其结合片段、抗rab抗体或其结合片段、Cfe受体拮抗剂、抗B因子抗体或其结合片段、抗MBL抗体或其结合片段、 或抗MASP抗体或其结合片段。2.如权利要求1所述的组合物，其中所述补体抑制剂包括抗C2抗体或其结合片段。3.如权利要求2所述的组合物，其中所述补体抑制剂进一步包括抗D因子抗体或其结合片段。4.如权利要求1所述的组合物，其中所述CD14途径抑制剂包括LPS拮抗剂，LBP拮抗剂，CD14 反义核酸序列、CD14 siRNA，或 CD14 RNAi。5.如权利要求1所述的组合物，其中所述CD14途径抑制剂包括抗体或其结合片段。6.如权利要求5所述的组合物，其中所述CD14途径抑制剂包括抗LPS抗体或其结合片段、抗LBP抗体或其结合片段、抗CD14抗体或其结合片段、抗MD2抗体或其结合片段、抗 TLR2抗体或其结合片段、抗TLR4抗体或其结合片段、或抗TLR6抗体或其结合片段。7.如权利要求6所述的组合物，其中所述CD14途径抑制剂包括抗CD14抗体或其结合片段。8.如权利要求6所述的组合物，其中所述CD14途径抑制剂包括抗LPS抗体或其结合片 段。9.如权利要求1所述的组合物，其中所述补体抑制剂包括Cfe受体拮抗剂，且所述 CD14途径抑制剂包括抗CD14抗体或其结合片段。10.如权利要求1所述的组合物，其中所述补体抑制剂包括Cfe受体拮抗剂，且所述 CD14途径抑制剂包括抗LPS抗体或其结合片段。11.如权利要求3所述的组合物，其中所述CD14途径抑制剂包括抗CD14抗体或其结合片段。12.如权利要求3所述的组合物，其中所述CD14途径抑制剂包括抗LPS抗体或其结合片段。13.如权利要求1或6所述的组合物，其中所述抗体是单克隆抗体。14.如权利要求13所述的组合物，其中所述抗体是人类抗体或人源化抗体。15.如权利要求1或6所述的组合物，其中所述组合物包括具有改变的效应子功能的抗体。16.一种组合物，包括双特异性抗体，所述双特异性抗体包括 第一结合片段，其为补体抑制剂，和第二结合片段，其为CD14途径抑制剂，其中所述补体抑制剂包括抗Cl抗体或其结合片段、抗C2抗体或其结合片段、抗C3抗体或其结合片段、抗C4抗体或其结合片段、抗Wa抗体或其结合片段、抗rab抗体或其结合片段、⑶a受体拮抗剂、抗B因子抗体或其结合片段、抗MBL抗体或其结合片段、或抗MASP抗体或其结合片段；且其中所述⑶14途径抑制剂包括LPS拮抗剂，LBP拮抗剂，⑶14反义核酸序列、⑶14siRNA,⑶14 RNAi、抗LPS抗体或其结合片段、抗LBP抗体或其结合片段、抗⑶14抗体或其结合片段、抗MD2抗体或其结合片段、抗TLR2抗体或其结合片段、抗TLR4抗体或其结合片段、或抗TLR6抗体或其结合片段。17.如权利要求1或16所述的组合物，其进一步包括一或多种医药上可接受的佐剂、载剂、赋形剂、和/或稀释剂。18.如权利要求1或16所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：丰锡中，汤姆·埃里克·莫尔内斯，
申请(专利权)人：唐纳士公司，梅迪诺瓦公司，
类型：发明
国别省市：US