The invention discloses a molecular marker, a kit for identifying Culicoides flavus and a method for its use. The molecular marker includes a CO I gene with SEQ ID NO:5 nucleotide sequence and a Cyt B gene with SEQ ID NO:6 nucleotide sequence. The kit can amplify the CO I gene and Cyt B gene simultaneously. The method of combining two different molecular markers to identify Culicoides luteus is advantageous to realize accurate identification of Culicoides luteus and shorten identification time.
【技术实现步骤摘要】
一种鉴定趋黄库蠓的试剂盒及方法
本专利技术涉及物种鉴定领域，具体涉及一种鉴定趋黄库蠓的试剂盒及方法。
技术介绍
库蠓在动物分类上属节肢动物门(Arthropoda)昆虫纲(Insecta)双翅目(Diptera)蠓科(Ceratopogonidae)库蠓属(Culicoides)，是蠓科中最大的一个属，也是吸血蠓属中分布最广，种类最多，与人畜关系最密切的一个属，是多种重要动物虫媒病的传播媒介。近年来，随着全球气候变暖，在一定程度上使库蠓传播虫媒病病毒的能力提高，也使库蠓的分布范围向地球两极和高海拔地区扩大，库蠓种群传播虫媒病毒给动物的能力增强，一些传统的“非媒介”库蠓种类具备了传播疫病的能力。由库蠓传播的虫媒病如蓝舌病、水泡性口炎等，在全球一些国家或地区的传播流行，造成了巨大的经济损失，对畜牧业发展构成了严重威胁。趋黄库蠓(Culicoidesparaflavescens)属库蠓属的三囊亚属，在我国分布于福建、海南、江苏、广东、广西、云南、台湾等地。对吸血蠓的鉴定和识别，是监测与控制蠓传疾病发生的基础，也是疾病预防与控制领域的核心步骤。目前，对吸血蠓的鉴定主要依靠...
【技术保护点】
1.一种鉴定趋黄库蠓的分子标记，其特征在于，所述分子标记包括具有SEQ ID NO:5所示核苷酸序列的CO I基因和具有SEQ ID NO:6所示核苷酸序列的Cyt b基因。
【技术特征摘要】
1.一种鉴定趋黄库蠓的分子标记，其特征在于，所述分子标记包括具有SEQIDNO:5所示核苷酸序列的COI基因和具有SEQIDNO:6所示核苷酸序列的Cytb基因。2.一种鉴定趋黄库蠓的试剂盒，其特征在于，包括能够扩增权利要求1所述COI基因的第一引物组和能够扩增权利要求1所述Cytb基因的第二引物组，所述第一引物组包括具有SEQIDNO:1所示核苷酸序列的第一上游引物和具有SEQIDNO:2所示核苷酸序列的第一下游引物，所述第二引物组包括具有SEQIDNO:3所示核苷酸序列的第二上游引物和具有SEQIDNO:4所示核苷酸序列的第二下游引物。3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，还包括dNTPs、缓冲液和DNA聚合酶。4.一种鉴定未知库蠓是否为趋黄库蠓的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)提取未知库蠓的总DNA；2)利用权利要求1所述的第一引物组和第二引物组分别以步骤1)获取的总DNA为模板进行PCR扩增；3)对第一引物组的扩增产物和第二引物组的扩增产物分别进行测序，如果第一引物组扩增得到的序列与SEQIDNO:5具有98％以上的相似性，并且第二引物组扩增得到的序列与SEQIDNO:6具有98％以上的相似性，则该未知库蠓为趋黄库蠓。5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤2)中利用第一引物组进行PCR扩增的PCR反应体系为25μL，其中：模板DNA1μL，第一上游引物0.5μL，第一下游引物0.5μL，2×Mastermix4.25μL，加d...
【专利技术属性】
技术研发人员：闫冀焕，林妙端，肖颖，谢婧，沈军，黄恩炯，张灵玲，李云，史玲莉，高志云，刘晓辉，廉国胜，田洁，慈颖，王胜启，张苗，石顺利，兰景，李薇，付晓昀，
申请(专利权)人：河北国际旅行卫生保健中心，
类型：发明
国别省市：河北,13
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