用于生产疫苗的化学限定无血清培养基中的MDCK悬浮细胞系制造技术

本文公开了改良的马丁达比狗肾细胞系以及用于培养改良的MDCK细胞系的化学限定培养基，所述改良的马丁达比狗肾细胞能够在不存在血清的条件下悬浮培养。本文还公开了使改良的MDCK细胞系生长的培养方法以及由在化学限定培养基中生长的改良的MDCK细胞系生产疫苗的方法。

MDCK Suspension Cell Lines in Chemically Limited Serum-Free Medium for Vaccine Production

In this paper, an improved Martin's Darby canine kidney cell line and a chemically limited medium for culturing the modified MDCK cell line are disclosed. The modified Martin's Darby canine kidney cell can be suspended in the absence of serum. This paper also discloses the culture methods for the growth of modified MDCK cell lines and the production of vaccines from modified MDCK cell lines grown in chemically limited medium.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于生产疫苗的化学限定无血清培养基中的MDCK悬浮细胞系
本专利技术总体上涉及疫苗病毒生产领域，并且具体涉及马丁达比狗肾(MDCK)细胞系在化学限定无血清培养基中的生长和悬浮培养。
技术介绍
目前使用多种方法生产疫苗，包括在鸡蛋、初始细胞或细胞系中进行培养。这些方法涉及与成本、风险和维持大规模工业生产水平的能力相关的很多问题。马丁达比狗肾(MDCK)细胞是一种用于生产疫苗的细胞系，具体而言，用于生产流感疫苗。用于疫苗生产的细胞培养物相对于鸡蛋具有优势，这是因为细胞培养物不依赖于鸡蛋的利用度并且可较大规模生产。然而，MDCK细胞的培养存在许多缺点。MDCK细胞需要非限定补充物，例如，培养用血清，其非常昂贵并且在制备人类使用的药物产品时是不理想的。MDCK细胞还需要频繁更换培养基，这进一步增加了成本。而且，MDCK细胞以贴壁培养的方式生长，无论是在培养皿中生长(这需要非常大的表面积)还是在微载体中生长(这不符合成本效益、并且是劳动密集的，以及会造成细胞损伤的风险)。美国专利US6,825,036和US8,846,932以及美国专利申请US2013/0183741公开了用于无血清悬浮培养和本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.包含改良的马丁达比狗肾(MDCK)细胞和生长培养基的组合物，所述生长培养基包含化学限定的且无动物成分的培养基，其中，所述改良的MDCK细胞处于悬浮培养物中无需微载体。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.10.30 US 62/248,9541.包含改良的马丁达比狗肾(MDCK)细胞和生长培养基的组合物，所述生长培养基包含化学限定的且无动物成分的培养基，其中，所述改良的MDCK细胞处于悬浮培养物中无需微载体。2.如权利要求1所述的组合物，其中，所述改良的MDCK细胞具有约30小时至约35小时的平均倍增时间。3.如权利要求1或2所述的组合物，其中，所述改良的MDCK细胞适于生产疫苗用病毒。4.如权利要求3所述的组合物，其中，所述病毒维持抗原性。5.如权利要求3或4所述的组合物，其中，所述病毒是流感病毒。6.如上述权利要求中任一项所述的组合物，其中，所述改良的MDCK细胞在培养过程中无需更换培养基。7.如权利要求1或2所述的组合物，其中，所述改良的MDCK细胞是保藏在Leibniz-InstitutDSMZ-DeutscheSammlungvonMikro-organismenundZellkulturenGmbH的保藏号为---的细胞。8.在无需微载体的条件下以悬浮形式培养改良的马丁达比狗肾(MDCK)细胞的方法，所述方法包括：使所述改良的MDCK细胞与化学限定的且无动物成分的生长培养基接触，其中，所述改良的MDCK细胞能够以悬浮培养物的形式在无需微载体的条件下生长，并且所述改良的MDCK细胞能够在5％CO2条件下生长。9.如权利要求8所述的方法，其中，所述改良的MDCK细胞具有约30小时至约35小时的平均倍增时间。10.如权利要求8或9所述的方法，其中，所述改良的MDCK细胞适于生产人疫苗用病毒。11.如权利要求10所述的方法，其中，所述病毒维持抗原性。12.如权利要求10或11所述的方法，其中，所述病毒是流感病毒。13.如权利要求8-12中任一项所述的方法，其中，所述改良的MDCK细胞在培养过程中无需更换培养基。14.用于在改良的马丁达比狗肾(MDCK)细胞中生产疫苗生产用病毒的方法，所述改良的MDCK细胞能够在无需微载体的条件下以悬浮形式培养，所述方法包括使所述改良的MDCK细胞与化学限定的且无动物成分的生长培养基接触，采用病毒感染细胞以及收获所述病毒。15.如权利要求14所述的方法，其中，不向所述培养基中加入额外的葡萄糖。16.如权利要求14或15所述的方法，其中，所述改良的MDCK细胞是保藏在Leibniz-InstitutDSMZ-Deutsch...

【专利技术属性】
技术研发人员：方珍妮，倪孝慈，胡勇志，翁彩娟，
申请(专利权)人：富士胶片欧文科技有限公司，尔湾科学销售公司，
类型：发明
国别省市：中国台湾,71