前导序列修饰的葡糖淀粉酶多肽和具有增强的生物产物产生的工程化的酵母菌株制造技术

本发明专利技术涉及能够将显著量的葡糖淀粉酶分泌到发酵培养基中的非天然酵母。所述葡糖淀粉酶可以促进淀粉材料的降解，从而产生葡萄糖以用于发酵成所期望的生物产物，如乙醇。所述葡糖淀粉酶可以具有分泌信号的葡糖淀粉酶融合蛋白的形式提供，所述分泌信号衍生自SEQ ID NO:73的至少AA 1‑19；(ii)SEQ ID NO:74的至少AA 1‑19的氨基酸序列；(iii)SEQ ID NO:77(An aa)；(iv)SEQ ID NO:75(Sc IV)；(v)SEQ ID NO:76(Gg LZ)；或(vi)SEQ ID NO:78(Hs SA)。

Glucoamylase Polypeptide Modified by Lead Sequence and Engineering Yeast Strain with Enhanced Biological Products

The present invention relates to an unnatural yeast capable of secreting a significant amount of glucoamylase into a fermentation medium. The glucose amylase can promote the degradation of starch materials, thereby producing glucose for fermentation into desired biological products, such as ethanol. The glucose amylase can be provided in the form of a glucose amylase fusion protein having secretion signals derived from at least AA 1 19; (ii) SEQ ID NO: 73 NO: 73 derived from at least AA 1 19; (ii) SEQ ID NO: ID NO: 74 at least AA 1 19 amino acid sequence; (ii II ii) SEQ ID NO: NO: 77 (An aa); (iv) SEQ ID NO: NO: 75 (Sc IV IV IV IV IV; (v) SEQ ID NO: NO: 76 (Gg LZ); or (vi) SEQ ID ID: NO: GGGGGG Z; or (vi vi) SEQ: SEQ: SAHQ: 78 (SAHQ: SAHQ: SA(2) The results of the study are as follows:1) The results of the study are as follows:1) The results of the study are as follows:1) The results of the study are as follows:1.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】前导序列修饰的葡糖淀粉酶多肽和具有增强的生物产物产生的工程化的酵母菌株相关申请的交叉引用本申请要求2016年8月05日提交并且名称为“前导序列修饰的葡糖淀粉酶多肽和具有增强的生物产物产生的工程化的酵母菌株(LEADER-MODIFIEDGLUCOAMYLASEPOLYPEPTIDESANDENGINEEREDYEASTSTRAINHAVINGENHANCEDBIOPRODUCTPRODUCTION)”的美国临时专利申请序列号62/371,681的权益，该申请在此以引用的方式整体并入本文。序列表在2017年8月04日创建的名称为“N00485_ST25.txt”并且具有440千字节的大小的ASCII文本文件的全部内容以引用的方式整体并入本文。
本专利技术涉及修饰的葡糖淀粉酶(GA)、表达这些酶的微生物以及用于生产乙醇的发酵方法。
技术介绍
通过发酵生产乙醇是公知的工业过程。然而，增加乙醇收率在技术上可能是困难的。有各种因素使得微生物在被设计用于增加乙醇产量的发酵条件下生长具有挑战性。举例来说，发酵培养基可以具有更高的底物浓度以促进乙醇产生，但是这些条件可能对细胞生长具有负面影响。此外，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种工程化的多肽，所述工程化的多肽包含：(a)包含5‑8个连续疏水性氨基酸残基的分泌信号氨基酸序列；以及(b)来自酵母、真菌或细菌葡糖淀粉酶多肽的葡糖淀粉酶氨基酸序列，其中所述分泌信号氨基酸序列与所述葡糖淀粉酶氨基酸序列是异源的，并且其中所述工程化的多肽具有葡糖淀粉酶活性。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.08.05 US 62/371,6811.一种工程化的多肽，所述工程化的多肽包含：(a)包含5-8个连续疏水性氨基酸残基的分泌信号氨基酸序列；以及(b)来自酵母、真菌或细菌葡糖淀粉酶多肽的葡糖淀粉酶氨基酸序列，其中所述分泌信号氨基酸序列与所述葡糖淀粉酶氨基酸序列是异源的，并且其中所述工程化的多肽具有葡糖淀粉酶活性。2.根据权利要求1所述的工程化的多肽，其中所述5-8个连续疏水性氨基酸残基的氨基酸选自丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和/或缬氨酸。3.根据权利要求1所述的工程化的多肽，其中所述5-8个连续疏水性氨基酸残基包含选自以下的序列：AVLFAA、AFLFLL、LVLVLL、LLFLF或FILAAV。4.根据权利要求1-3中任一项所述的工程化的多肽，所述工程化的多肽包含：(a)分泌信号氨基酸序列，所述分泌信号氨基酸序列与以下各项具有80％或更大的序列同一性：(i)SEQIDNO:73的至少AA1-19的氨基酸序列；(ii)SEQIDNO:74的至少AA1-19的氨基酸序列；(iii)SEQIDNO:77；(iv)SEQIDNO:75；(v)SEQIDNO:76；或(vi)SEQIDNO:78；以及(b)来自酵母、真菌或细菌葡糖淀粉酶多肽的葡糖淀粉酶氨基酸序列，其中所述多肽具有葡糖淀粉酶活性。5.根据权利要求1所述的工程化的多肽，其中所述(a)分泌信号氨基酸序列与以下各项具有90％或更大的序列同一性：(i)SEQIDNO:73的至少AA1-19的氨基酸序列；(ii)SEQIDNO:74的至少AA1-19的氨基酸序列；(iii)SEQIDNO:77；(iv)SEQIDNO:75；(v)SEQIDNO:76；或(vi)SEQIDNO:78。6.根据前述权利要求中任一项所述的工程化的多肽，其中所述葡糖淀粉酶氨基酸序列来自选自由以下组成的组的酵母或真菌生物体：树脂枝孢霉菌、黑曲霉、泡盛曲霉、米曲霉、川地曲霉、白宇佐美曲霉、土曲霉、出芽短梗霉、食腺嘌呤芽生葡萄孢酵母、布鲁塞尔酒香酵母、白色念珠菌、产朊假丝酵母、草酸青霉、...

【专利技术属性】
技术研发人员：克里斯托弗·K·米勒，格雷戈里·迈克尔·波因特，阿米特·瓦斯，
申请(专利权)人：嘉吉公司，
类型：发明
国别省市：美国,US