具有促进创面愈合作用的6-羟甲基吡啶-3-醇及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种具有促进创面愈合作用的化合物，所述化合物6‑羟甲基吡啶‑3‑醇为首次从美洲大蠊中分离得到；本发明专利技术还公开了所述化合物的制备方法以及以该化合物为有效成分的一种组合物，所述的组合物包含6‑羟甲基吡啶‑3‑醇或其药学上可接受的衍生物及其盐类。所述化合物在制备促进创面愈合药物中，特别是在促进溃疡愈合药物中的应用，该化合物是通过调节细胞迁移活性的机制来促进创面的愈合，并通过药理实验研究发现其对口腔溃疡有改善作用，能提高其愈合率。

6-hydroxymethylpyridine-3-alcohol with wound healing promoting effect and its application

The invention discloses a compound with the function of promoting wound healing, and the compound 6 hydroxymethylpyridine 3 alcohol is separated from Periplaneta Americana for the first time. The invention also discloses the preparation method of the compound and a composition with the compound as an effective component, and the composition comprises 6 hydroxymethylpyridine 3 alcohol or its pharmaceutically acceptable derivation. Material and its salts. The compound is used in the preparation of wound healing drugs, especially in the promotion of ulcer healing drugs. The compound promotes wound healing by regulating the mechanism of cell migration activity. Pharmacological experiments show that it can improve oral ulcer healing rate.

【技术实现步骤摘要】
具有促进创面愈合作用的6-羟甲基吡啶-3-醇及应用
本专利技术属于化学药物领域，涉及6-羟甲基吡啶-3-醇及其在治疗包括溃疡在内的创面愈合中的应用。
技术介绍
创伤包括溃疡在内的成因、危害及治疗在以往申请专利CN105434450A中已经述及。创伤的组织重建过程至少包括细胞的增殖、迁移和血管形成，目前HUVEC(人脐静脉内皮细胞)已经成为研究促创伤愈合的重要模型。本专利技术采用此方法发现的活性化合物未见报道。美洲大蠊(Periplanetaamericana)为昆虫纲有翅亚纲蜚蠊目蜚蠊科大蠊属昆虫，由其制备的康复新液临床上治疗各种创伤包括溃疡效果肯定，表明从中有望发现促创面愈合的活性成分或药物，但这方面的研究还比较欠缺。
技术实现思路
本专利技术提供了一种化合物6-羟甲基吡啶-3-醇在制备促进创面愈合药物中的应用。进一步，所述化合物在制备促进溃疡药物中的应用。进一步，所述化合物是通过调节细胞迁移活性的机制来促进创面的愈合。进一步，所述的化合物为6-羟甲基吡啶-3-醇，结构式：进一步，所述的化合物的制备方法为：取美洲大蠊干燥虫体，经粉碎后，热水回流提取，回流3次，每次2h，提取液减压浓缩得到总提物；总提物经反相色谱MCIgelCHP20P柱，流动相为甲醇-水，0％～100％进行梯度洗脱得11个组分，依次为F1～F11；F10经SephadexLH-20凝胶，流动相为甲醇：水＝80％：20％和RP-18色谱柱，流动相为甲醇-水，10％～25％进行梯度洗脱得8个组分，依次为F10.1～F10.8；F10.4经SephadexLH-20凝胶，流动相为甲醇：水＝80％：20％、半制备HPLC，流动相为甲醇：水＝15％：85％得化合物6-羟甲基吡啶-3-醇。进一步，所述的化合物6-羟甲基吡啶-3-醇是通过从美洲大蠊中提取获得或通过人工合成获得。本专利技术还提供了一种组合物，所述的组合物以6-羟甲基吡啶-3-醇或其药学上可接受的衍生物及其盐类作为活性成分，加上药学上可接受的赋形剂制备成药物制剂。本专利技术的有益效果：1.本专利技术首次公开了从美洲大蠊中提取分离所述6-羟甲基吡啶-3-醇的方法。2.本专利技术所述的6-羟甲基吡啶-3-醇是首次从美洲大蠊中分离鉴定得到的。3.本专利技术所述的环二肽具有显著促进HUVEC细胞迁移的功效。附图说明图1和图2为化合物促进HUVECs细胞迁移活性试验结果(n＝3)，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001；图3药物外用对豚鼠口腔溃疡模型局部组织形态的影响；图4药物对大鼠口腔溃疡模型局部组织形态的影响。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步描述。实施例1本专利技术所述6-羟甲基吡啶-3-醇的提取分离及结构鉴定美洲大蠊来源于四川好医生攀西药业有限责任公司美洲大蠊GAP基地，美洲大蠊提取物是康复新液的主要成分。取美洲大蠊干燥虫体25kg，经粉碎后，热水回流提取(3×2h)，提取液减压浓缩得到总提物(约2kg)。总提物经反相色谱MCIgelCHP20P柱(甲醇-水，0％～100％)梯度洗脱得11个组分(F1～F11)。F10(10g)经SephadexLH-20凝胶(甲醇-水，80％)和RP-18色谱柱(甲醇-水，10％～25％梯度洗脱)得8个组分(F10.1～F10.8)。F10.4(1.5g)经SephadexLH-20凝胶(甲醇-水，80％)、半制备HPLC(甲醇-水，15％)得化合物6-羟甲基吡啶-3-醇(13.5mg，tR＝12.3)化合物结果鉴定如下：化合物6-羟甲基吡啶-3-醇，淡黄色固体，EI-MSm/z:125(5)[M]+,1HNMR(400MHz,CD3OD)δ:7.99(1H,d,J＝2.0Hz,H-2),7.33(1H,d,J＝6.0Hz,H-5),7.21(1H,dd,J＝6.0,2.0Hz,H-4),4.57(2H,s,6-CH2).13CNMR(125MHz,CD3OD)δ:155.9(C-6),151.5(C-3),137.7(C-2),125.3(C-5),123.4(C-4),65.2(6-CH2)。实施例2本专利技术所述6-羟甲基吡啶-3-醇(mdl-30a)促HUVEC细胞迁移活性测试人脐静脉内皮细胞(HUVECs)来自深圳大学医学部，由刘宝华教授研究组馈赠。M199培养基和胎牛血清购自Gibco公司。收集对数期HUVECs细胞，接种于24孔培养板中，每孔14×104个细胞。置于37℃、5％CO2条件下培养24h待细胞贴壁后，用1×PBS清洗3次，然后用含0.5％FBS的M199培养基饥饿6小时。饥饿结束后，用P10枪头进行划痕，实验组加入溶有不同药物(终浓度20μM)的M199培养基，空白组加入新鲜的M199培养基，并进行拍照。在37℃、5％CO2条件下孵育6h后，用1×PBS清洗3次，加入新鲜的M199培养基，并进行拍照。划痕面积计算用Imageproplus6进行。迁移面积％＝(实验组0h划痕面积-实验组6h划痕面积/空白对照组0h划痕面积-空白组6h划痕面积)×100％由图1和2可知，化合物环6-羟甲基吡啶-3-醇在20μM时可显著促进HUVECs细胞迁移，表明具有促进创面愈合作用。实施例3本专利技术所述化合物对豚鼠口腔溃疡的作用1实验材料1.1药品试剂受试药：6-羟甲基吡啶-3-醇，简称6OP3O，CAS:40222-77-3；桂林西瓜霜，桂林三金药业股份有限公司，批号：Z45021599；生理盐水，河南科伦药业有限公司生产，批号C217030105-2；甲醛溶液，烟台市双双化工有限公司，批号20170201；苯酚，天津市致远化学试剂有限公司，批号：20140402；豚鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒，苏州卡尔文生物科技有限公司，批号：CK-E30635。1.2实验动物普通级豚鼠，体重270～300g，雌雄各半，由济南金丰实验动物有限公司提供，合格证号：37009700000360；实验室许可证号：SYXK(豫)2015-0005。1.3实验仪器数位型游标卡尺，上海宝工工具有限公司；FA(N)/JA(N)系列电子天平，上海民桥精密仪器有限公司；HWS12型电热恒温水浴锅，上海一恒科学仪器有限公司；KDC-160HR高速冷冻离心机，科大创新股份有限公司中佳分公司；680型酶标仪，美国BIO-RAD公司；可调式移液器，上海雷勃分析仪器有限公司。2实验方法2.1实验方法取豚鼠72只，雌雄各半。随机取12只作为空白组，取60只豚鼠复制口腔溃疡模型，用乙醚麻醉豚鼠，将一小棉球置于直径为5mm的玻璃管一端(使之与管口平齐)，再将玻璃管塞棉球一端蘸900g/L苯酚溶液，灼烧豚鼠口腔左侧面颊60s，24h后观察，豚鼠口腔黏膜上均出现直径5mm的溃疡；空白组豚鼠麻醉后，用塞棉球的玻璃管蘸生理盐水后放在豚鼠口腔左侧面颊60s。将造模豚鼠随机均分为5组，分别涂6OP3O高剂量48mg/mL，、低剂量12mg/mL，用消毒药棉蘸相应药液0.5mL放在豚鼠口腔溃疡处3min；桂林西瓜霜混悬液，用生理盐水配成0.5g/mL，用消毒药棉蘸相应药液0.5mL放在豚鼠口腔溃疡处3min；等体积生理盐水，用消毒药棉蘸0.5mL生理盐水后，敷在豚鼠口腔本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.化合物6‑羟甲基吡啶‑3‑醇在制备促进创面愈合药物中的应用。

【技术特征摘要】
2017.10.12 CN 20171094989761.化合物6-羟甲基吡啶-3-醇在制备促进创面愈合药物中的应用。2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述化合物在制备促进溃疡药物中的应用。3.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述化合物是通过调节细胞迁移活性的机制来促进创面的愈合。4.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述的化合物为6-羟甲基吡啶-3-醇，结构式：5.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述的化合物的制备方法为：取美洲大蠊干燥虫体，经粉碎后，热水回流提取，回流3次，每次2h，提取液减压浓缩得到总提物；总提物经反相色谱MCIgelCHP2...

【专利技术属性】
技术研发人员：程永现，刘越飞，向斌，王心龙，
申请(专利权)人：四川好医生攀西药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：四川,51