胶体金检测卡及其制备方法、及激素残留检测方法技术

本发明专利技术公开一种胶体金检测卡及其制备方法、及应用该胶体金检测卡的激素残留检测方法，其中，所述胶体金检测卡包括支撑板、样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜及吸水垫，所述样品垫、所述胶体金结合垫、所述硝酸纤维素膜及所述吸水垫沿所述检测卡之第一端至第二端的方向依次设于所述支撑板的板面，所述硝酸纤维素膜设置有检测线和质控线；所述胶体金结合垫包被有胶体金标记的抗甲基睾丸酮单克隆抗体和抗己烯雌酚单克隆抗体。本发明专利技术的技术方案能够实现同时检测水产品中雄性激素和雌性激素的残留，从而提升其检测效率。

【技术实现步骤摘要】
胶体金检测卡及其制备方法、及激素残留检测方法
本专利技术涉及食品检测
，特别涉及一种胶体金检测卡及其制备方法、及应用该胶体金检测卡的激素残留检测方法。
技术介绍
在水产养殖业中，雄性激素(比如甲基睾丸酮)和雌性激素(比如己烯雌酚)通常作为苗种培育和性别控制等方面的特效药物。但是这些激素在水产品中的残留严重威胁人体健康，且对人体的危害是慢性、远期及累积性的、其危害主要表现为：干扰体内自然激素的平衡，使正常人的生理功能发生紊乱，严重时还会导致新生儿畸形，影响儿童的正常生长发育。目前，胶体金检测卡因其具有简单、快速、有效、灵敏度高等优点，广泛应用于水产品中激素残留的检测。但是，现有的胶体金检测卡大多数只能检测单一项目，也即，检测雄性激素(甲基睾丸酮)和检测雌性激素(己烯雌酚)要分开检测，则检测效率较低。
技术实现思路
本专利技术的主要目的是提供一种胶体金检测卡，旨在实现同时检测水产品中雄性激素和雌性激素的残留，从而提升其检测效率。为实现上述目的，本专利技术提出的胶体金检测卡，包括支撑板、样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜及吸水垫，所述样品垫、所述胶体金结合垫、所述硝酸纤维素膜及所述吸水垫沿所述检测卡之第一端至第二端的方向依次设于所述支撑板的板面，所述硝酸纤维素膜设置有检测线和质控线；所述胶体金结合垫包被有胶体金标记的抗甲基睾丸酮单克隆抗体和抗己烯雌酚单克隆抗体。可选地，所述检测线包括第一检测线和第二检测线，所述第一检测线、所述第二检测线及所述质控线沿所述第一端至所述第二端的方向依次设置于所述硝酸纤维素膜背向所述吸水垫的表面。可选地，所述第一检测线包被有甲基睾丸酮-鸡卵清白蛋白偶联物，所述第二检测线包被有己烯雌酚-鸡卵清白蛋白偶联物，所述质控线包被有羊抗鼠IgG抗体。可选地，所述支撑板为聚氯乙烯板；且/或，所述样品垫的材质为玻璃纤维；且/或，所述胶体金结合垫的材质为聚酯膜；且/或，所述吸水垫为滤纸。本专利技术还提出了一种胶体金检测卡的制备方法，该制备方法包括以下步骤：对抗甲基睾丸酮单克隆抗体和抗己烯雌酚单克隆抗体的混合物进行胶体金标记，得到胶体金标记的抗甲基睾丸酮-己烯雌酚单克隆抗体：将所述胶体金标记的抗甲基睾丸酮-己烯雌酚单克隆抗体包被在胶体金结合垫；沿同一方向依次将样品垫、已包被的胶体金结合垫、喷涂有检测线和质控线的硝酸纤维素膜及吸水垫贴设于支撑板的板面，切割后并装入模板中制成所述胶体金检测卡。可选地，所述“得到胶体金标记的抗甲基睾丸酮-己烯雌酚单克隆抗体”步骤包括以下步骤：取颗粒大小为20nm-40nm的胶体金溶液，并将胶体金溶液的pH值调至7-9；向胶体金溶液中加入抗甲基睾丸酮单克隆抗体和抗己烯雌酚单克隆抗体的混合物，搅拌混合，再加入聚乙二醇，搅拌并离心，弃去上清液，得到沉淀物；加入磷酸缓冲盐溶液对沉淀物进行清洗，并采用含有鸡卵清白蛋白的磷酸缓冲盐溶液溶解沉淀物，过滤后得到所述胶体金标记的抗甲基睾丸酮-己烯雌酚单克隆抗体。可选地，所述检测线包括第一检测线和第二检测线，将甲基睾丸酮-鸡卵清白蛋白偶联物包被在所述第一检测线，将己烯雌酚-鸡卵清白蛋白偶联物包被在所述第二检测线；将羊抗鼠IgG抗体包被在所述质控线。可选地，所述甲基睾丸酮-鸡卵清白蛋白偶联物由以下步骤制备得到：将甲基睾丸酮和盐酸羧甲基羟胺混合反应，得到反应物；将反应物与鸡卵清白蛋白混合反应，得到甲基睾丸酮-鸡卵清白蛋白偶联物；且/或，所述己烯雌酚-鸡卵清白蛋白偶联物由以下步骤制备得到：将己烯雌酚和盐酸羧甲基羟胺混合反应，得到反应物；将反应物与鸡卵清白蛋白混合反应，得到己烯雌酚-鸡卵清白蛋白偶联物。本专利技术还提出了一种激素残留检测方法，应用于胶体金检测卡，该激素残留检测方法包括以下步骤：对待测的样品进行预处理，得到样品待检液；将样品待检液滴加至胶体金检测卡的样品垫，静置10mim-20mim，观察硝酸纤维素膜的检测线和质控线是否显色；若检测线和质控线均显色，检测结果判定为阴性，表明样本中不含有水产品激素或水产品激素含量低于检测限；若检测线不显色，质控线显色，检测结果判定为阳性，表明样本中水产品激素含量等于或高于检测限；若质控线不显色，检测结果无效，表明不正确的操作或检测卡已过期失效。可选地，所述“对待测的样品进行预处理，得到样品待检液”步骤包括以下步骤：取去皮去骨去脂肪的样品，用均质机均质均匀样本；取样本液于试管中，加入去离子水混匀，并加入乙酸乙酯提取，震荡、离心，弃去上层清液，下层液体用氮气或空气吹干；向吹干的试管中加入磷酸缓冲盐溶液，冲洗溶解试管内壁上的残留物，得到样品待检液。本专利技术的技术方案，胶体金检测卡包括支撑板、样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜及吸水垫，样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜及吸水垫沿检测卡之第一端至第二端的方向依次贴设于支撑板的板面，硝酸纤维素膜设置有检测线和质控线。当检测样品液中激素残留时，样品液被滴加至样品垫的表面，随后，样品液依次渗透于胶体金结合垫和硝酸纤维素膜，最后由吸水垫吸取样品液。当样品液渗透于硝酸纤维素膜时，样品液依次经过检测线和质控线，通过检测线和质控线是否显色来判断检测样品液中激素残留情况，并判断检测卡的检测结果是否有效。并且，胶体金结合垫包被有胶体金标记的抗甲基睾丸酮单克隆抗体和抗己烯雌酚单克隆抗体，则该胶体金检测卡能够实现同时检测水产品中雄性激素和雌性激素的残留，相较于现有技术中只能进行单一激素检测，其检测效率大大地提升。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图示出的结构获得其他的附图。图1为本专利技术胶体金检测卡一实施例的剖视结构示意图；图2为图1中硝酸纤维素膜另一视角的结构示意图；图3为本专利技术胶体金检测卡之卡盒的结构示意图。附图标号说明：标号名称标号名称100胶体金检测卡411第一检测线100a第一端412第二检测线100b第二端43质控线10支撑板50吸水垫20样品垫60卡盒30胶体金结合垫61加样孔40硝酸纤维素膜62观察窗41检测线本专利技术目的的实现、功能特点及优点将结合实施例，参照附图做进一步说明。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。另外，本专利技术各个实施例之间的技术方案可以相互结合，但是必须是以本领域普通技术人员能够实现为基础，当技术方案的结合出现相互矛盾或无法实现时应当认为这种技术方案的结合不存在，也不在本专利技术要求的保护范围之内。本专利技术提出一种胶体金检测卡100，用于检测水产品中的激素残留。请参照图1和图2，在本专利技术胶体金检测卡100一实施例中，该胶体金检测卡100包括支撑板10、样品垫20、胶体金结合垫30、硝酸纤维素膜40及吸水垫50，样品垫20、胶体金结合垫30、硝酸纤维素膜40及吸水垫50沿检测卡之第一端100a至第二端100b的方向依次设于支撑板本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种胶体金检测卡，用于检测水产品中的激素残留，其特征在于，所述胶体金检测卡包括支撑板、样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜及吸水垫，所述样品垫、所述胶体金结合垫、所述硝酸纤维素膜及所述吸水垫沿所述检测卡之第一端至第二端的方向依次设于所述支撑板的板面，所述硝酸纤维素膜设置有检测线和质控线；所述胶体金结合垫包被有胶体金标记的抗甲基睾丸酮单克隆抗体和抗己烯雌酚单克隆抗体。

【技术特征摘要】
1.一种胶体金检测卡，用于检测水产品中的激素残留，其特征在于，所述胶体金检测卡包括支撑板、样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜及吸水垫，所述样品垫、所述胶体金结合垫、所述硝酸纤维素膜及所述吸水垫沿所述检测卡之第一端至第二端的方向依次设于所述支撑板的板面，所述硝酸纤维素膜设置有检测线和质控线；所述胶体金结合垫包被有胶体金标记的抗甲基睾丸酮单克隆抗体和抗己烯雌酚单克隆抗体。2.如权利要求1所述的胶体金检测卡，其特征在于，所述检测线包括第一检测线和第二检测线，所述第一检测线、所述第二检测线及所述质控线沿所述第一端至所述第二端的方向依次设置于所述硝酸纤维素膜背向所述吸水垫的表面。3.如权利要求2所述的胶体金检测卡，其特征在于，所述第一检测线包被有甲基睾丸酮-鸡卵清白蛋白偶联物，所述第二检测线包被有己烯雌酚-鸡卵清白蛋白偶联物，所述质控线包被有羊抗鼠IgG抗体。4.如权利要求1至3中任一项所述的胶体金检测卡，其特征在于，所述支撑板为聚氯乙烯板；且/或，所述样品垫的材质为玻璃纤维；且/或，所述胶体金结合垫的材质为聚酯膜；且/或，所述吸水垫为滤纸。5.一种胶体金检测卡的制备方法，其特征在于，该制备方法包括以下步骤：对抗甲基睾丸酮单克隆抗体和抗己烯雌酚单克隆抗体的混合物进行胶体金标记，得到胶体金标记的抗甲基睾丸酮-己烯雌酚单克隆抗体：将所述胶体金标记的抗甲基睾丸酮-己烯雌酚单克隆抗体包被在胶体金结合垫；沿同一方向依次将样品垫、已包被的胶体金结合垫、喷涂有检测线和质控线的硝酸纤维素膜及吸水垫贴设于支撑板的板面，切割后并装入模板中制成所述胶体金检测卡。6.如权利要求5所述的胶体金检测卡的制备方法，其特征在于，所述“得到胶体金标记的抗甲基睾丸酮-己烯雌酚单克隆抗体”步骤包括以下步骤：取颗粒大小为20nm-40nm的胶体金溶液，并将胶体金溶液的pH值调至7-9；向胶体金溶液中加入抗甲基睾丸酮单克隆抗体和抗己烯雌酚单克隆抗体的混合物，搅拌混合，再加入聚乙二醇，搅拌...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄荫翔，
申请(专利权)人：深圳市宝安康生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44