用于治疗黑素瘤的方法和组合物技术

本文提供使用经PTD‑MYC融合蛋白(例如HIV TAT‑MYC融合蛋白)处理的抗肿瘤免疫细胞治疗黑素瘤的方法和组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗黑素瘤的方法和组合物
技术介绍
过继细胞转移(ACT)为一种涉及将具有抗肿瘤活性的免疫细胞转移到患者中的免疫疗法的形式。ACT通常涉及从患者分离具有抗肿瘤活性的淋巴细胞，体外培养淋巴细胞以扩增细胞群，并随后将淋巴细胞输注到患有癌症的宿主中。用于过继转移的淋巴细胞可来源于所切除的肿瘤的基质(例如肿瘤浸润性淋巴细胞)、淋巴管或淋巴结或血液。在一些情况下，所分离的淋巴细胞经基因工程改造以表达抗肿瘤T细胞受体(TCR)或嵌合抗原受体(CAR)。用于输注的淋巴细胞可从供体分离(同种异体ACT)或从患有癌症的宿主分离(自体ACT)。
技术实现思路
在某些实施例中，本文提供用于过继细胞转移以治疗黑素瘤的方法。在一些实施例中，提供治疗受试者中的黑素瘤的方法，其包含向受试者施用治疗有效量的具有抗肿瘤活性的免疫细胞，其中所述免疫细胞在向受试者施用之前与蛋白质转导结构域(PTD)-MYC融合多肽接触。在一些实施例中，免疫细胞包含一或多种淋巴细胞。在一些实施例中，一或多种淋巴细胞包含T细胞和/或B细胞。在一些实施例中，一或多种淋巴细胞包含肿瘤浸润性淋巴细胞。在一些实施例中，黑素瘤为转移性黑素瘤。在一些实施例中，黑素瘤为浅表扩散性黑素瘤、结节性黑素瘤、雀斑样痣性黑素瘤或肢端黑素瘤。在一些实施例中，免疫细胞由患有黑素瘤的供体受试者获得。在一些实施例中，供体受试者和接受免疫细胞的受试者为相同的(即自体ACT)。在一些实施例中，供体受试者和接受免疫细胞的受试者为不同的(即同种异体ACT)。在一些实施例中，PTD-MYC融合多肽包含：(i)HIVTAT蛋白质转导结构域；和(ii)MYC多肽序列。在一些实施例中，PTD-MYC融合多肽易位到免疫细胞的细胞核中。在一些实施例中，PTD-MYC融合多肽展现MYC的生物活性，诸如MYC靶基因的活化。在一些实施例中，融合肽包含SEQIDNO:1。在某些实施例中，本文描述包含以下的组合物：(a)MYC融合肽，其包含(i)蛋白质转导结构域；(ii)MYC多肽序列；和(b)从患有黑素瘤肿瘤的供体受试者分离的一或多种原代免疫细胞，其中所述一或多种原代免疫细胞对黑素瘤特异性抗原有反应性。在一些实施例中，MYC融合肽易位到一或多种原代免疫细胞的细胞核中。在一些实施例中，MYC融合肽展现MYC的生物活性。在一些实施例中，MYC融合肽进一步包含一或多种连接蛋白质转导结构域和MYC多肽的分子。在一些实施例中，MYC融合肽包含具有以下一般结构的MYC融合肽：蛋白质转导结构域-X-MYC序列，其中-X-为连接蛋白质转导结构域和MYC序列的分子。在一些实施例中，蛋白质转导结构域序列为TAT蛋白质转导结构域序列。在一些实施例中，TAT蛋白质转导结构域序列选自由TAT[48-57]和TAT[57-48]组成的群组。在一些实施例中，MYC融合肽包含SEQIDNO:1。在一些实施例中，MYC融合肽被乙酰化。在一些实施例中，一或多种免疫细胞具有针对黑素瘤细胞的抗肿瘤活性。在一些实施例中，一或多种免疫细胞包含一或多种淋巴细胞。在一些实施例中，一或多种淋巴细胞包含T细胞、B细胞、NK细胞或其任何组合。在一些实施例中，T细胞选自由以下组成的群组：原初T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、记忆T细胞、活化T细胞、无反应性T细胞、耐受性T细胞、嵌合T细胞和抗原特异性T细胞。在一些实施例中，B细胞选自由以下组成的群组：原初B细胞、血浆B细胞、活化B细胞、记忆B细胞、无反应性B细胞、耐受性B细胞、嵌合B细胞和抗原特异性B细胞。在一些实施例中，一或多种淋巴细胞为肿瘤浸润性淋巴细胞、经T细胞受体修饰的淋巴细胞或经嵌合抗原受体修饰的淋巴细胞。在一些实施例中，肿瘤浸润性淋巴细胞具有CD8+CD25+标签。在一些实施例中，肿瘤浸润性淋巴细胞具有CD4+CD25+标签。在一些实施例中，一或多种免疫细胞包含可检测部分。在某些实施例中，本文描述治疗受试者中的黑素瘤的方法，其包含向有需要的受试者施用一或多种经修饰的免疫细胞，其中所述一或多种经修饰的免疫细胞包含MYC融合肽并且对肿瘤特异性抗原有反应性，所述MYC融合肽包含(i)蛋白质转导结构域；(ii)MYC多肽序列。在一些实施例中，一或多种经修饰的免疫细胞来源于从受试者分离的原代免疫细胞。在一些实施例中，一或多种经修饰的免疫细胞来源于从患有相同类型的黑素瘤的单独供体受试者分离的原代免疫细胞。在一些实施例中，一或多种经修饰的免疫细胞是通过在分离之后使原代免疫细胞与MYC融合肽体外接触来制备。在一些实施例中，所述方法进一步包含在与MYC融合肽接触之前，体外扩增原代免疫细胞。在一些实施例中，所述方法进一步包含在与MYC融合肽接触之后，扩增原代免疫细胞。在一些实施例中，使用抗CD3抗体扩增所述细胞。在一些实施例中，使用经照射的同种异体饲养细胞扩增所述细胞。在一些实施例中，在外源性细胞因子存在下扩增所述细胞。在一些实施例中，细胞因子为白细胞介素-2。在一些实施例中，MYC融合肽易位到免疫细胞的细胞核中。在一些实施例中，MYC融合肽展现MYC的生物活性。在一些实施例中，MYC融合肽进一步包含一或多种连接蛋白质转导结构域和MYC多肽的分子。在一些实施例中，MYC融合肽包含具有以下一般结构的MYC融合肽：蛋白质转导结构域-X-MYC序列，其中-X-为连接蛋白质转导结构域和MYC序列的分子。在一些实施例中，蛋白质转导结构域序列为TAT蛋白质转导结构域序列。在一些实施例中，TAT蛋白质转导结构域序列选自由TAT[48-57]和TAT[57-48]组成的群组。在一些实施例中，MYC融合肽包含SEQIDNO:1。在一些实施例中，MYC融合肽被乙酰化。在一些实施例中，一或多种经修饰的免疫细胞具有针对受试者中的黑素瘤细胞的抗肿瘤活性。在一些实施例中，一或多种经修饰的免疫细胞具有针对受试者中的黑素瘤细胞的抗肿瘤活性。在一些实施例中，一或多种经修饰的免疫细胞包含一或多种无反应性免疫细胞。在一些实施例中，一或多种免疫细胞包含一或多种淋巴细胞。在一些实施例中，一或多种淋巴细胞包含T细胞、B细胞、NK或其任何组合。在一些实施例中，T细胞选自由以下组成的群组：原初T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、记忆T细胞、活化T细胞、无反应性T细胞、耐受性T细胞、嵌合T细胞和抗原特异性T细胞。在一些实施例中，B细胞选自由以下组成的群组：原初B细胞、血浆B细胞、活化B细胞、记忆B细胞、无反应性B细胞、耐受性B细胞、嵌合B细胞和抗原特异性B细胞。在一些实施例中，一或多种淋巴细胞为肿瘤浸润性淋巴细胞、经T细胞受体修饰的淋巴细胞或经嵌合抗原受体修饰的淋巴细胞。在一些实施例中，淋巴细胞具有CD8+CD28-CD152-标签。在一些实施例中，淋巴细胞具有CD8+CD25+标签。在一些实施例中，淋巴细胞具有CD4+CD25+标签。在一些实施例中，所述方法进一步包含从供体受试者分离原代免疫细胞。在一些实施例中，供体受试者患有黑素瘤。在一些实施例中，静脉内、腹膜内、皮下、肌内或瘤内施用一或多种经修饰的免疫细胞。在一些实施例中，所述方法进一步包含在施用一或多种经修饰的免疫细胞之前对受试者进行淋巴细胞清除。在一些实施例中，所述方法进一步包含向受试者施用细胞因子。在本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种组合物，其包含：(a)MYC融合肽，其包含(i)蛋白质转导结构域；(ii)MYC多肽序列；和(b)从患有黑素瘤肿瘤的供体受试者分离的一或多种原代免疫细胞，其中所述一或多种原代免疫细胞对黑素瘤特异性抗原有反应性。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种组合物，其包含：(a)MYC融合肽，其包含(i)蛋白质转导结构域；(ii)MYC多肽序列；和(b)从患有黑素瘤肿瘤的供体受试者分离的一或多种原代免疫细胞，其中所述一或多种原代免疫细胞对黑素瘤特异性抗原有反应性。2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述MYC融合肽易位到所述一或多种原代免疫细胞的细胞核中。3.根据权利要求1至2中任一权利要求所述的组合物，其中所述MYC融合肽展现MYC的生物活性。4.根据权利要求1至3中任一权利要求所述的组合物，其中所述MYC融合肽进一步包含一或多种连接所述蛋白质转导结构域和所述MYC多肽的分子。5.根据权利要求1至4中任一权利要求所述的组合物，其中所述MYC融合肽包含具有以下一般结构的MYC融合肽：蛋白质转导结构域-X-MYC序列，其中-X-为连接所述蛋白质转导结构域和所述MYC序列的分子。6.根据权利要求1至5中任一权利要求所述的组合物，其中所述蛋白质转导结构域序列为TAT蛋白质转导结构域序列。7.根据权利要求6所述的组合物，其中所述TAT蛋白质转导结构域序列选自由TAT[48-57]和TAT[57-48]组成的群组。8.根据权利要求1至7中任一权利要求所述的组合物，其中所述MYC融合肽包含SEQIDNO:1。9.根据权利要求1至8中任一权利要求所述的组合物，其中所述MYC融合肽被乙酰化。10.根据权利要求1至9中任一权利要求所述的组合物，其中所述一或多种免疫细胞具有针对黑素瘤细胞的抗肿瘤活性。11.根据权利要求1至10中任一权利要求所述的组合物，其中所述一或多种免疫细胞包含一或多种淋巴细胞。12.根据权利要求11所述的组合物，其中所述一或多种淋巴细胞包含T细胞、B细胞、NK细胞或其任何组合。13.根据权利要求12所述的组合物，其中所述T细胞选自由以下组成的群组：原初T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、记忆T细胞、活化T细胞、无反应性T细胞、耐受性T细胞、嵌合T细胞和抗原特异性T细胞。14.根据权利要求12所述的组合物，其中所述B细胞选自由以下组成的群组：原初B细胞、血浆B细胞、活化B细胞、记忆B细胞、无反应性B细胞、耐受性B细胞、嵌合B细胞和抗原特异性B细胞。15.根据权利要求11至14中任一权利要求所述的组合物，其中所述一或多种淋巴细胞为肿瘤浸润性淋巴细胞、经T细胞受体修饰的淋巴细胞或经嵌合抗原受体修饰的淋巴细胞。16.根据权利要求15所述的组合物，其中所述肿瘤浸润性淋巴细胞具有CD8+CD28-CD152-标签、CD8+CD25+标签或CD4+CD25+标签。17.根据权利要求1至16中任一权利要求所述的组合物，其中所述一或多种免疫细胞包含可检测部分。18.一种用于治疗受试者中的黑素瘤的方法，其包含向有需要的所述受试者施用一或多种经修饰的免疫细胞，其中所述一或多种经修饰的免疫细胞包含MYC融合肽并且对肿瘤特异性抗原有反应性，所述MYC融合肽包含(i)蛋白质转导结构域；(ii)MYC多肽序列。19.根据权利要求18所述的方法，其中所述一或多种经修饰的免疫细胞来源于从所述受试者分离的原代免疫细胞。20.根据权利要求18所述的方法，其中所述一或多种经修饰的免疫细胞来源于从患有相同类型的黑素瘤的单独供体受试者分离的原代免疫细胞。21.根据权利要求19至20中任一权利要求所述的方法，其中所述一或多种经修饰的免疫细胞是通过在分离之后使所述原代免疫细胞与所述MYC融合肽体外接触来制备。22.根据权利要求19至21中任一权利要求所述的方法，其进一步包含在与所述MYC融合肽接触之前，体外扩增所述原代免疫细胞。23.根据权利要求19至21中任一权利要求所述的方法，其进一步包含在与所述MYC融合肽接触之后，扩增所述原代免疫细胞。24.根据权利要求22至23中任一权利要求所述的方法，其中使用抗CD3抗体扩增所述细胞。25.根据权利要求22至24中任一权利要求所述的方法，其中使用经照射的同种异体饲养细胞扩增所述细胞。26.根据权利要求22至25中任一权利要求所述的方法，其中在外源性细胞因子存在下扩增所述细胞。27.根据权利要求26所述的方法，其中所述细胞因子为白介素-2。28.根据权利要求18至27中任一权利要求所述的方法，其中所述MYC融合肽易位到所述免疫细胞的细胞核中。29.根据权利要求18至28中任一权利要求所述的方法，其中MYC融合肽展现MYC的生物活性。30.根据权利要求18至29中任一权利要求所述的方法，其中所述MYC融合肽进一步包含一或多种连接所述蛋白质转导结构域和所述MYC多肽的分子。31.根据权利要求18至30中任一权利要求所述的方法，其中所述MYC融合肽包含具有以下一般结构的MYC融合肽：蛋白质转导结构域-X-MYC序列，其中-X-为连接所述蛋白质转导结构域和所述MYC序列的分子。32.根据权利要求18至31中任一权利要求所述的方法，其中所述蛋白质转导结构域序列为TAT蛋白质转导结构域序列。33.根据权利要求32所述的方法，其中所述TAT蛋白质转导结构域序列选自由TAT[48-57]和TAT[57-48]组成的群组。34.根据权利要求18至33中任一权利要求所述的方法，其中所述MYC融合肽包含SEQIDNO:1。35.根据权利要求18至34中任一权利要求所述的方法，其中所述MYC融合肽被乙酰化。36.根据权利要求18至35中任一权利要求所述的方法，其中所述一或多种经修饰的免疫细胞具有针对所述受试者中的黑素瘤细胞的抗肿瘤活性。37.根据权利要求18至36中任一权利要求所述的方法，其中所述一或多种经修饰的免疫细胞包含一或多种无反应性免疫细胞。38.根据权利要求18至37中任一权利要求所述的方法，其中所述一或多种免疫细胞包含一或多种淋巴细胞。39.根据权利要求38所述的方法，其中所述一或多种淋巴细胞包含T细胞、B细胞、NK细胞或其任何组合。40.根据权利要求39所述的方法，其中所述T细胞选自由以下组成的群组：原初T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、记忆T细胞、活化T细胞、无反应性T细胞、耐受性T细胞、嵌合T细胞和抗原特异性T细胞。41.根据权利要求39所述的方法，其中所述B细胞选自由以下组成的群组：原初B细胞、血浆B细胞、活化B细胞、记忆B细胞、无反应性B细胞、耐受性B细胞、嵌合B细胞和抗原特异性B细胞。42.根据权利要求38所述的方法，其中所述一或多种淋巴细胞包含肿瘤浸润性淋巴细胞、经T细胞受体修饰的淋巴细胞或经嵌合抗原受体修饰的淋巴细胞。43.根据权利要求42所述的方法，其中所述淋巴细胞具有CD8+CD28-CD152-标签、CD8+CD25+标签或CD4+CD25+标签。44.根据权利要求19至43中任一权利要求所述的方法，其中方法进一步包含从所述供体受试者分离所述原代免疫细胞。45.根据权利要求44所述的方法，其中所述供体受试者患有黑素瘤。46.根据权利要求18至45中任一权利要求所述的方法，其中静脉内、腹膜内、皮下、肌内或瘤内施用所述一或多种经修饰的免疫细胞。47.根据权利要求18至46中任一权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：Y·里菲利，B·C·特纳，G·A·伯德，
申请(专利权)人：泰加生物工艺学公司，
类型：发明
国别省市：美国,US