用于APOA1给药的组合物和剂量制造技术

本发明专利技术涉及用于口服给予二聚体或多聚体形式的载脂蛋白的新的组合物，其中采用特定剂量方案用于在治疗动脉粥样硬化中使用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于APOA1给药的组合物和剂量
本专利技术涉及用于口服给予二聚体或多聚体形式的载脂蛋白的新的组合物，其中采用特定剂量方案用于在治疗动脉粥样硬化中使用。
技术介绍
心肌梗塞、中风、不稳定型心绞痛和心源性猝死都是全世界死亡的主要原因，其中发病率不断上升。这些CVD的最常见病因是动脉粥样硬化，这是一种缓慢进行性疾病，其中在大中型动脉中形成被称为斑块或粥样斑的病变。致动脉粥样硬化过程由含胆固醇的血浆脂蛋白在动脉的病灶区域、特别是在解剖学区域(如分叉，弯曲等)内的内皮下保留而触发的，在该区域的血流以湍流为特征。血液中的高胆固醇水平与被称为血脂异常的病症相关，其表现为既是遗传形式又由非遗传起源的继发性病况(与动脉粥样硬化相关的风险因素)引起。血液中总胆固醇(TC)和LDL胆固醇(LDL-C，低密度脂蛋白胆固醇)增加、以及由极低密度脂蛋白(VDLD)增加、小而密低密度脂蛋白增加和HDL胆固醇(HDL-C，高密度脂蛋白胆固醇)降低所引起的所谓的致动脉粥样硬化脂质三联症似乎是心血管疾病的相关因素。早期确定和管理能改变的风险因素(最重要的是那些导致血脂异常的因素)构成了预防心血管疾病的第一道防线。由文献已知ApoA1蛋白(载脂蛋白A1)具有有前景的治疗性潜力。发现该蛋白质与磷脂高度相关，形成复合物并促进胆固醇从富含胆固醇的细胞中流出。保持足够的ApoA1血浆水平从而减轻或预防动脉粥样硬化症状并不易于实施。发现高血浆水平的HDL胆固醇与心血管疾病之间存在负相关，这归因于HDL及其主要成分ApoA1蛋白在胆固醇逆向转运(RCT现象)中发挥的作用。RCT效率取决于ApoA1蛋白质的以下能力：促进胆固醇从细胞中流出、结合脂质、激活卵磷脂-胆固醇酰基转移酶(LCAT)并形成成熟HDL(其与特定受体相互作用)、和转移蛋白质以将其从血浆流至肝脏而被消除。已经证明，输注如ApoA1或ApoE的蛋白质(即可以是重组的也可以是提取的蛋白质)确定动脉粥样硬化病的动物实验模型中动脉粥样硬化负荷减轻。尽管动脉粥样硬化动物模型的各种研究已经证明HDL具有作为治疗策略的潜力，但是当通过以输注的方式已经给予重组HDL分子或HDL相关的模拟肽时，临床研究实质上并未成功证明粥样斑体积(一个重要的有效参数)明显减少[A.M.Fogelman,TryingtoharnessthepotentialofHDL:wishfulthinkingorsoundstrategy？EurHeartJ.35(2014)3248–3249]。针对动脉粥样硬化的靶向HDL胆固醇的疗法是基于通过作用于胆固醇逆向转运代谢的不同方面而将HDL-C血浆水平标准化。其中，将他汀类药物用于减少肝脏中内源性胆固醇的合成，从而降低LDL-C水平。另一方面，CETP抑制剂增加HDL-C水平。其它治疗途径是基于将重构的HDL和ApoA1模拟物输注于血流中。对于这种类型的分子，目的是增加HDL颗粒中的胆固醇含量，从而改善这些分子的功能。这些策略在实验模型中产生了有关联的结果，然而这并没有在临床研究上带来明显优势。无论实际上临床应用如何，尽管ApoA1脂蛋白具有较高的治疗性潜力，但是它们在与脂质代谢功能障碍或异常相关的病症(如家族性高胆固醇血症、动脉粥样硬化等)中的治疗性用途尚未开发到令人满意。可将基于ApoA1的疗法尚未成功解释为存在两个主要限制，即生产和/或纯化这些分子的方法非常低效，以及它们向需要其的患者给药的限制。目前用于治疗动脉粥样硬化的疗法的组成部分是实质性改变患者的饮食习惯。由于经常需要难以控制其饮食习惯的人进行这种改变，因而该改变经常失败，并严重破坏在患者身上使用的药理疗法的有效性和结果。由文献熟知饮食与治疗上述病症的相关性(例如，ConnorWE,ConnorSL“Importanceofdietinthetreatmentoffamilialhypercholesterolemia”AmJCardiol.1993Sep30；72(10):42D-53D；ConnorWE,ConnorSL“Diet,atherosclerosis,andfishoil”AdvInternMed.1990；35:139-71；ChapmanMJ,BlankenbergS,LandmesserU(2016)Theyearincardiology2015:prevention.EurHeartJ37:ehv721–519.doi:10.1093/eurheartj/ehv721)。专利申请WO2008/01790描述了由植物种子产生以二聚体或多聚体形式的ApoA1突变蛋白，并在未经证明下假定，不仅可以静脉内给予这些载脂蛋白，而且可以口服或直肠给药。在口服给药下，假定通过给予从专利申请记载的植物的种子或其粉状物等提取的浆(milk，乳)进行直接给药。此外，该文献教导了以包含以药学上有效浓度描述的一种或多种突变蛋白的二聚体和/或低聚体的药物组合物形式的载脂蛋白A1的每日剂量，例如10mg/kg体重，或50mg/kg体重。
技术实现思路
本专利技术的作者通过从WO2008/017906中描述的植物种子中提取的浆，以及通过评估其在各种细胞和动物模型中的活性，已经证实了有效进行口服给药的可能性。然而，本专利技术的作者出乎意料地发现，以WO2008/017906所建议的剂量的1/10-1/100的剂量给予从该专利申请描述的植物种子中提取的浆在体内是有效的，并且在用经测定的口腔组合物治疗期间，在经受高胆固醇饮食的动物中也观察到抗动脉粥样硬化的治疗性效果。作者还有利地发现，从WO2008/017906描述的植物种子中提取的浆在冷冻干燥(例如，-20℃)存储后以冻干形式、或在室温下和用合适的稀释剂将其重新混悬后保持其有效性。在用高胆固醇饮食处理的小鼠的体内实验中，所述组合物出乎意料地被证实能够预防动脉粥样硬化斑块进展，还能够显著降低动脉粥样硬化斑块面积，对于经受高胆固醇饮食的动物在处理之前和之后也是如此。在文献中，没有关于口服给予载脂蛋白A1(ApoA1)或其突变蛋白的实验数据，没有因此能够假定正确的剂量方案的数据；最重要的是，关于静脉内给予所述分子的现有数据(参见Ibanez等人，Atherosclerosis2012，和Cimmino等人，JCellMolMed2009，报道向高胆固醇血症兔子和动脉粥样硬化兔子给予75mg/kgAPOA1Milano，相隔4天，两次静脉内输注(一周总共150mg/kg))表明，以远高于本文描述的和要求保护的用于口服给药的剂量，动脉粥样硬化斑块减少<5％。在本说明书中报道的数据中，证明了在主动脉窦水平处的斑块减少约50％，并且在主动脉弓处斑块面积减少40％。此外，从喂饲高胆固醇饮食的小鼠获得了这样的数据，更实际地反映了在饮食方面没有特定纪律的患者的可能饮食方案。因此，本专利技术的目的是包含一种或多种以二聚体和/或多聚体形式的载脂蛋白A1(ApoA-1)突变蛋白的组合物，其中所述突变蛋白在植物种子中以二聚体和/或多聚体的形式产生，所述组合物包含从所述植物的种子提取的浆和/或其衍生物，并且其中以0.2至4mg/kg体重的日剂量向患者口服给予所述突变蛋白，用于在治疗动脉粥样硬化中使用。本专利技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种组合物，其包含一种或多种以二聚体和/或多聚体形式的载脂蛋白1的突变蛋白，其中所述突变蛋白在植物种子中以二聚体和/或多聚体的形式产生，所述组合物包含从所述植物的种子提取的浆和/或其衍生物，并且其中以0.2至4mg/kg体重的日剂量向患者口服给予所述一种或多种突变蛋白，用于在治疗动脉粥样硬化中使用。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.08.02 IT 1020160000811931.一种组合物，其包含一种或多种以二聚体和/或多聚体形式的载脂蛋白1的突变蛋白，其中所述突变蛋白在植物种子中以二聚体和/或多聚体的形式产生，所述组合物包含从所述植物的种子提取的浆和/或其衍生物，并且其中以0.2至4mg/kg体重的日剂量向患者口服给予所述一种或多种突变蛋白，用于在治疗动脉粥样硬化中使用。2.根据权利要求1使用的所述组合物，其中以0.4至3mg/kg体重的日剂量向患者口服给予所述一种或多种突变蛋白。3.根据权利要求2使用的所述组合物，其中以0.5至2mg/kg体重的日剂量向患者口服给予所述一种或多种突变蛋白。4.根据权利要求3使用的所述组合物，其中以0.5至1.8mg/kg体重的日剂量向患者口服给予所述一种或多种突变蛋白。5.根据权利要求4使用的所述组合物，其中以0.5至1.5mg/kg体重的日剂量向患者...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗伯特·焦万诺尼，加布里尔·罗马诺，尼可拉·佛克尔，玛丽亚·利塔·杰弗里，玛利亚特利萨·佩蒂纳托，瑟瑞娜·雷吉，
申请(专利权)人：GRG基因技术有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士,CH