一种利用HPLC测定玫瑰花中维生素C含量的方法技术

本发明专利技术涉及玫瑰产品性能检测技术领域，特别涉及一种利用HPLC测定玫瑰花中维生素C含量的方法，该方法能够方便、准确地对玫瑰花中的维生素C含量进行测定，同时，能够减少实验的偶然误差。其技术要点包括S1：配制维生素C标准液；S2：将维生素C标准液稀释至不同浓度，进液相色谱检测，绘制标准曲线；S3：样品处理；S4：处理后的样品进液相色谱检测，并根据维生素C的标准曲线计算样品中维生素C含量。

【技术实现步骤摘要】
一种利用HPLC测定玫瑰花中维生素C含量的方法
本专利技术属于玫瑰产品性能检测
，特别涉及一种利用HPLC测定玫瑰花中维生素C含量的方法。
技术介绍
玫瑰(Rosarugosa)为蔷薇科、蔷薇属植物，其花形美色鲜、芳香浓郁，具有食用、药用、保健、美容、观赏等多种用途，是我国十大名花之一，也是世界四大切花之一。玫瑰花中含有维生素E及维生素C(简称VC)等营养素，特别是维生素C，维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，它能增强人体抵抗力，预防坏血病，又称抗坏血酸。因此，测定玫瑰花中的维生素C的含量，对评定其营养价值有重要意义。维生素C的测定方法有多种，包括容量法、比色法以及荧光光度法、电位法和紫外分光光度法等，但是，各种方法均存在操作繁琐，偶然误差大等缺陷。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种利用HPLC测定玫瑰花中维生素C含量的方法，能够方便、准确地对玫瑰花中的维生素C含量进行测定，同时，能够减少实验的偶然误差。本专利技术的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：一种利用HPLC测定玫瑰花中维生素C含量的方法，包括以下步骤：S1：配制维生素C原液；S2：将维生素C原液稀释至不同浓度的维生素C标准液，进液相色谱检测，绘制标准曲线；S3：样品处理；S4：处理后的样品经微孔过滤，进液相色谱检测，并根据维生素C的标准曲线计算样品中维生素C含量。进一步的，步骤S2中，样品处理过程为，将样品放入粉碎机中，加入草酸，均匀粉碎后，滤纸过滤，滤液保留，待测。进一步的，所使用草酸为质量浓度0.5％的草酸水溶液。进一步的，步骤S2及S4中液相色谱条件为液相色谱柱：C18250mm×5mm，流速1ml/min；检测波长：265nm；流动相A为甲醇，B为0.02moL/L乙酸钠；进样量：5μL。进一步的，流动性A与B的比值为A:B＝5:95。进一步的，S3步骤中，进行样品处理时，向样品中加入氯化铝。进一步的，氯化铝与样品的质量比为1:30。进一步的，S3步骤中，进行样品处理时，向样品中加入硝酸胺钙。进一步的，硝酸胺钙与样品的质量比为1:45。本专利技术的有益效果是：1.本专利技术提供的利用高效液相色谱对玫瑰花中的维生素C含量进行测定的方法，操作简单，且准确率高，重复性好。2.本专利技术使用乙酸钠与甲醇配合做流动相，使最终维生素C的分离效果较好，单独出峰，无明显拖峰现象。3.本专利技术中在对样品处理时，在样品中加入氯化铝，氯化铝能够破坏玫瑰花中的类黄酮类物质，类黄酮对维生素C具有保护作用，类黄酮被破坏，从而在对玫瑰花碾碎时，维生素C大量流出，进而能够对样品中的维生素C含量进行更精确地测定。4.本专利技术中在对样品处理时，在样品中加入硝酸胺钙，硝酸铵钙能够降低抗坏血酸氧化酶的活性，从而，在维生素C流出后，减少维生素C的氧化，避免检测过程中，因维生素C与空气接触被抗坏血酸氧化酶氧化导致实验结果不准确。具体实施方式下面将结合具体实施例，对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。一种利用HPLC测定玫瑰花中维生素C含量的方法，具体如下各实施例。实施例1S1：配制维生素C原液。准确称取0.2000g维生素C标准品，用超纯水定容至100mL容量瓶中，此时维生素C浓度为2000mg/L。S2：吸取2000mg/L维生素C原液，稀释5倍、10倍、20倍、50倍，配制成400mg/L、200mg/L、100mg/L、50mg/L浓度标准液。将各浓度标准液进液相色谱进行检测，以标准液浓度为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线，建立回归方程。液相色谱条件为液相色谱柱：C18柱子，250mm×5mm，流速1ml/min；检测波长：265nm；流动相A为甲醇，B为0.02moL/L乙酸钠；流动性A与B的比值为A:B＝5:95；进样量：5μL。S3：样品处理。取100g样品，放入粉碎机中，加入200mL质量浓度为0.5％草酸水溶液，均匀粉碎，滤纸过滤后，滤液保留，及时进行下一步检测。S4：滤液经0.45μm微孔过滤，进液相色谱检测，并根据维生素C的标准曲线计算样品中维生素C含量。液相色谱条件为液相色谱柱：C18250mm×5mm，流速1ml/min；检测波长：265nm；流动相A为甲醇，B为0.02moL/L乙酸钠；流动性A与B的比值为A:B＝5:95；进样量：5μL。实施例2S1：配制维生素C原液。准确称取0.2000g维生素C标准品，用超纯水定容至100mL容量瓶中，此时维生素C浓度为2000mg/L。S2：吸取2000mg/L维生素C原液，稀释5倍、10倍、20倍、50倍，配制成400mg/L、200mg/L、100mg/L、50mg/L浓度标准液。将各浓度标准液进液相色谱进行检测，以标准液浓度为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线，建立回归方程。液相色谱条件为液相色谱柱：C18柱子，250mm×5mm，流速1ml/min；检测波长：265nm；流动相A为甲醇，B为0.02moL/L乙酸钠；流动性A与B的比值为A:B＝5:95；进样量：5μL。S3：样品处理。取100g样品，放入粉碎机中，加入200mL质量浓度为0.5％草酸水溶液，均匀粉碎，滤纸过滤后，滤液保留24h后进行检测。S4：滤液经0.45μm微孔过滤，进液相色谱检测，并根据维生素C的标准曲线计算样品中维生素C含量。液相色谱条件为液相色谱柱：C18250mm×5mm，流速1ml/min；检测波长：265nm；流动相A为甲醇，B为0.02moL/L乙酸钠；流动性A与B的比值为A:B＝5:95；进样量：5μL。实施例3S1：配制维生素C原液。准确称取0.2000g维生素C标准品，用超纯水定容至100mL容量瓶中，此时维生素C浓度为2000mg/L。S2：吸取2000mg/L维生素C原液，稀释5倍、10倍、20倍、50倍，配制成400mg/L、200mg/L、100mg/L、50mg/L浓度标准液。将各浓度标准液进液相色谱进行检测，以标准液浓度为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线，建立回归方程。液相色谱条件为液相色谱柱：C18柱子，250mm×5mm，流速1ml/min；检测波长：265nm；流动相A为甲醇，B为0.02moL/L乙酸钠；流动性A与B的比值为A:B＝5:95；进样量：5μL。S3：样品处理。取100g样品，放入粉碎机中，加入200mL质量浓度为0.5％草酸水溶液，同时，加入氯化铝，氯化铝与样品的质量比为1:30，搅拌并均匀粉碎，滤纸过滤后，滤液保留，及时进行下一步检测。S4：滤液经0.45μm微孔过滤，进液相色谱检测，并根据维生素C的标准曲线计算样品中维生素C含量。液相色谱条件为液相色谱柱：C18250mm×5mm，流速1ml/min；检测波长：265nm；流动相A为甲醇，B为0.02moL/L乙酸钠；流动性A与B的比值为A:B＝5:95；进样量：5μL。实施例4S1：配制维生素C原液。准确称取0.2000g维生素C标准品，用超纯水定容至100mL容量瓶中，此时维生素C浓度为2000mg/L。S2：吸取2000mg/L维本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用HPLC测定玫瑰花中维生素C含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：配制维生素C原液；S2：将维生素C原液稀释至不同浓度的维生素C标准液，进液相色谱检测，绘制标准曲线；S3：样品处理；S4：处理后的样品经微孔过滤，进液相色谱检测，并根据维生素C的标准曲线计算样品中维生素C含量。

【技术特征摘要】
1.一种利用HPLC测定玫瑰花中维生素C含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：配制维生素C原液；S2：将维生素C原液稀释至不同浓度的维生素C标准液，进液相色谱检测，绘制标准曲线；S3：样品处理；S4：处理后的样品经微孔过滤，进液相色谱检测，并根据维生素C的标准曲线计算样品中维生素C含量。2.根据权利要求1所述的一种利用HPLC测定玫瑰花中维生素C含量的方法，其特征在于：步骤S2中，样品处理过程为，将样品放入粉碎机中，加入草酸，均匀粉碎后，滤纸过滤，滤液保留，待测。3.根据权利要求2所述的一种利用HPLC测定玫瑰花中维生素C含量的方法，其特征在于：所使用草酸为质量浓度0.5％的草酸水溶液。4.根据权利要求1所述的一种利用HPLC测定玫瑰花中维生素C含量的方法，其特征在于：步骤S2及S4中液相色谱条件为液相色谱柱：C18250mm×5...

【专利技术属性】
技术研发人员：倪庆伟，董博才，吴晓川，蔡旭东，薛洁，陈秀娟，
申请(专利权)人：倪氏国际玫瑰产业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42