用于前列腺特异抗原检测的电化学免疫传感器电信号标记物及检测方法技术

用于前列腺特异抗原检测的电化学免疫传感器电信号标记物，电信号标记物为蛋白酶，蛋白酶的催化底物是一种多肽，多肽的序列特征是：切割位点往碳端方向的第三个氨基酸是组氨酸H。用于前列腺抗原检测的检测方法，采用上述的用于前列腺特异抗原检测的电化学免疫传感器电信号标记物，包括以下步骤，A：二抗/碳纳米管/蛋白酶复合物的制备；B：工作电极的制备；C：将工作电极在含有铜离子和多肽基底的PBS溶液中浸泡2小时，然后采用线性扫描伏安法进行电化学测试。本电信号标记物电信号明显，可满足人体血清中前列腺特异抗原浓度的检测，而且催化基底中不用联苯类物质，对工作人员和环境无害。

Electrochemical Immunosensor Electrical Signal Markers and Detection Method for Prostate Specific Antigen Detection

The electrochemical immunosensor for detection of prostate specific antigen (PSA) is an electrochemical signal marker. The electrochemical signal marker is protease. The catalytic substrate of protease is a polypeptide. The sequence of the polypeptide is characterized by histidine H, the third amino acid in the direction of the carbon end of the cleavage site. For the detection of prostatic antigen, the above electrochemical immunosensor signal markers for detection of prostate specific antigen were used, including the following steps: preparation of a second antibody/carbon nanotubes/protease complex; preparation of B: working electrode; C: immersion of working electrode in PBS solution containing copper ions and polypeptide substrates for 2 hours, and then linear scanning. The electrochemical test was carried out by voltammetry. This electric signal marker has obvious electric signal, which can satisfy the detection of prostate specific antigen concentration in human serum, and does not need biphenyl substances in catalytic substrate, which is harmless to workers and the environment.

【技术实现步骤摘要】
用于前列腺特异抗原检测的电化学免疫传感器电信号标记物及检测方法
本专利技术涉及前列腺特异抗原检测方法，特别涉及用于前列腺特异抗原检测的电化学免疫传感器信号标记物及检测方法，属于生物化学

技术介绍
前列腺特异抗原是前列腺类疾病的一种生物标志物，它在血清中浓度的高低与前列腺癌的发生密切相关。例如，正常人血清中前列腺特异抗原的浓度低于4ng/mL，但当其浓度大于10ng/mL，该前列腺病人极有可能患有前列腺癌。因此，前列腺特异抗原的检测在前列腺类疾病的早期诊断方面具有重要的意义。目前用于前列腺特异抗原临床检测的方法主要是酶联免疫吸附法，但这种方法需要使用特殊的仪器，价格昂贵，检测程序复杂，而且检测成本较高，且需采用联苯类化合物作为检测基底，而联苯类化合物具有一定的致癌作用，因此，开发新型的用于前列腺特异抗原检测的方法具有十分重要的意义。电化学免疫传感器具有使用方便、测量精度高、维护简单和成本低等优点，是检测蛋白质的有效方法之一，在生物分析中具有广大的应用前景。在这种检测体系中，目标蛋白质可以被电极表面的抗体1（一抗）捕获，然后再通过酶标记的抗体2（二抗）对被捕获的蛋白质进行识别和本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于前列腺特异抗原检测的电化学免疫传感器电信号标记物，其特征在于：所述的电信号标记物为蛋白酶，蛋白酶的催化底物是一种多肽，多肽能够被所述的蛋白酶切割，多肽的序列特征是：切割位点往碳端方向的第三个氨基酸是组氨酸H。

【技术特征摘要】
1.用于前列腺特异抗原检测的电化学免疫传感器电信号标记物，其特征在于：所述的电信号标记物为蛋白酶，蛋白酶的催化底物是一种多肽，多肽能够被所述的蛋白酶切割，多肽的序列特征是：切割位点往碳端方向的第三个氨基酸是组氨酸H。2.根据权利1所述的用于前列腺特异抗原检测的电化学免疫传感器电信号标记物，其特征在于：所述的蛋白酶与前列腺特异抗原对应的二抗复合到碳纳米管上形成二抗/碳纳米管/蛋白酶复合物。3.用于前列腺特异抗原的检测方法，采用权利要求1或2所述的用于前列腺特异抗原检测的电化学免疫传感器电信号标记物，其特征在于包括以下步骤：A：二抗/碳纳米管/蛋白酶复合物的制备，包括以下子步骤：A1：碳纳米管的预处理；将多壁碳纳米管用2M的硝酸煮沸12小时，冷却后离心洗涤三次，再将离心下来的多壁碳纳米管在硝酸/硫酸混合液中加热12小时，加热温度为60~100℃，再离心洗涤多次，直至pH接近7，将最后的离心物真空干燥，即得到较短的碳纳米管；A2：二抗/碳纳米管/蛋白酶复合物的制备；将步骤A1得到的碳纳米管表面的羧基用EDC/NHS活化，离心分离去除多余的EDC和NHS，然后加入二抗，震荡反应1小时候，再加入蛋白酶继续震荡12小时，将所得沉淀物用二次水离心洗涤三...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏宁，刘林，杨素玲，邓德华，
申请(专利权)人：安阳师范学院，
类型：发明
国别省市：河南,41