The invention discloses an enhancer for extracting free circulating tumor DNA, a kit and a method for extracting free circulating tumor DNA from peripheral blood. The enhancers include: 1 ug/UL~5 ug/UL Carrier RNA, 1 ug/UL~5 ug/UL polyadenylate, 1 ug/UL~5 ug/UL glycogen, 0-5 ug/UL linear acrylamide, 1 ug/UL~5 ug/UL yeast tRNA, 2 ug/UL~10 ug/UL salmon sperm DNA and/or herring sperm DNA and water. The enhancer for extracting free circulating tumor DNA (ctDNA) can be used in combination with conventional splitting binding solution, washing buffer, eluent, etc. By specifically binding ctDNA and settling down, the efficiency of extracting ctDNA and the yield of extracting ctDNA are significantly improved.
【技术实现步骤摘要】
用于游离循环肿瘤DNA提取的增强剂、提取外周血中游离循环肿瘤DNA的试剂盒及方法
本专利技术涉及生物医学
,具体而言,涉及一种用于游离循环肿瘤DNA提取的增强剂、提取外周血中游离循环肿瘤DNA的试剂盒及方法。
技术介绍
随着发病率和死亡率的不断增加,癌症已经成为中国人群死亡的首要原因和主要的公共健康问题。癌症治疗手段多种多样,包括放疗、化疗以及新兴的靶向治疗和免疫治疗;其中,靶向治疗是精准医学的重要组成,而对于靶向基因特异性人群的筛选尤为重要,癌症的基因检测直接关系到药物对于患者的治疗效率。目前,用于检测的主要样本类型是肿瘤组织或穿刺样本;但是组织样本均为有创操作,有时难以实施,且这些操作受肿瘤大小、部位、患者一般情况等影响,有时不能取得满意的组织,存在一系列的局限性。肿瘤细胞坏死及脱落的肿瘤细胞进入血液后凋亡释放ctDNA进入外周血。近些年血浆游离肿瘤DNA(ctDNA)被认为是一种可检测肿瘤特异性改变的样本。ctDNA用于肿瘤突变检测优势在于:操作无创或微创;在疾病的任一进程中都可获取;可以作为一种肿瘤标记物,实现实时检测和动态检测;克服肿瘤组织的异质性 ...
【技术保护点】
1.一种用于游离循环肿瘤DNA提取的增强剂,其特征在于,包括:1μg/μL~5μg/μLCarrierRNA、1μg/μL~5μg/μL多聚腺苷酸、1μg/μL~5μg/μL糖原、0~5μg/μL线性丙烯酰胺、1μg/μL~5μg/μL酵母tRNA、2μg/μL~10μg/μL大马哈鱼精子DNA和/或鲱鱼精子DNA和水。
【技术特征摘要】
1.一种用于游离循环肿瘤DNA提取的增强剂,其特征在于,包括:1μg/μL~5μg/μLCarrierRNA、1μg/μL~5μg/μL多聚腺苷酸、1μg/μL~5μg/μL糖原、0~5μg/μL线性丙烯酰胺、1μg/μL~5μg/μL酵母tRNA、2μg/μL~10μg/μL大马哈鱼精子DNA和/或鲱鱼精子DNA和水。2.根据权利要求1所述的增强剂,其特征在于,所述多聚腺苷酸的残基数为2100~10000nt,所述线性丙烯酰胺的重均分子量为100万~500万。3.根据权利要求1所述的增强剂,其特征在于,所述CarrierRNA、所述多聚腺苷酸、所述糖原、所述线性丙烯酰胺、所述酵母tRNA、所述大马哈鱼精子DNA和所述鲱鱼精子DNA的质量比例为1:1:1:1:1:1:1。4.一种提取外周血中游离循环肿瘤DNA的试剂盒,其特征在于,包括如权利要求1至3中任一项所述的用于游离循环肿瘤DNA提取的增强剂。5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括磁珠悬浮液、SDS溶液、裂解结合液、蛋白酶K、蛋白酶溶解缓冲液、第一洗涤液、第二洗涤液和洗脱液。6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述裂解结合液包含45mmol/LTris-HCl、120mmol/LNaCl、30mmol/L乙二胺四乙酸二钠、10~30mol/L异硫氰酸胍、2~4mol/L醋酸钾和5wt~10%吐温20,pH值为7.6;优选的,所述SDS溶液浓度为10%。7.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述蛋白酶溶解缓冲液包含45~75mmol/LTris-HCl和100~120mmol/LNaCl。8.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述...
【专利技术属性】
技术研发人员:潘晓西,姬晓勇,霍旭,王建伟,伍启熹,刘倩,刘珂弟,唐宇,
申请(专利权)人:北京优迅医疗器械有限公司,
类型:发明
国别省市:北京,11
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