【技术实现步骤摘要】
微波萃取-固相萃取前处理结合液质联用技术同时检测水产养殖底泥中15种抗生素的方法
本专利技术属于有机污染物质残留检测
，涉及一种水产养殖底泥中微量抗生素的检测方法，特别涉及一种微波萃取-固相萃取前处理结合液相色谱串联质谱技术同时检测水产养殖底泥中15种抗生素含量的方法。技术背景近年来，我国的水产养殖业发展迅速，规模化与集约化成为养殖的趋势，而水生动物疾病发生的频率也在提高。为了防治鱼类疾病和加快鱼类生长、繁殖,水产养殖业广泛而大量地使用抗生素。抗生素主要通过添加到饲料和直接投入的方式应用于水产养殖过程中，研究表明，仅有20％-30％的抗生素被水生动物吸收，其它则以原形或者代谢物形式被排入环境。这些抗生素可通过范德华力、氢键、疏水分配作用等吸附在底泥上。底泥中大量的微生物经抗生素诱导产生抗性基因，进而产生耐药性，从而导致一些能够抵抗强力抗生素的病原菌出现。底泥样品中抗生素的含量较低，而且底泥样品基质复杂，干扰物多，这些干扰成分的存在对准确高效地测定底泥中抗生素含量具有较大的挑战。因此，建立一种有效的分离富集方法对准确测定底泥中抗生素的含量尤为重要。底泥样品...
【技术保护点】
1.一种微波萃取‑固相萃取前处理结合液质联用技术同时检测水产养殖底泥中15种抗生素的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)抗生素的提取：微波萃取称取经冷冻干燥、粉碎、过筛后的底泥样品，加入指示回收率的内标物，再加入提取溶剂，经微波萃取、过滤后收集提取液，用超纯水稀释，调节pH值；所述的指示回收率的内标物为磺胺甲噁唑‑13C6、诺氟沙星‑D5、青霉素G钾盐‑D5、四环素‑D6、喹乙醇‑D4、阿莫西林‑13C6和甲氧苄啶‑D3；(2)富集净化：固相萃取依次用甲醇和等体积的超纯水活化固相萃取柱，将经步骤(1)处理过的样品过柱，控制样品过柱流速；富集完后，依次用超纯水和低浓度的甲醇...
【技术特征摘要】
1.一种微波萃取-固相萃取前处理结合液质联用技术同时检测水产养殖底泥中15种抗生素的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)抗生素的提取：微波萃取称取经冷冻干燥、粉碎、过筛后的底泥样品，加入指示回收率的内标物，再加入提取溶剂，经微波萃取、过滤后收集提取液，用超纯水稀释，调节pH值；所述的指示回收率的内标物为磺胺甲噁唑-13C6、诺氟沙星-D5、青霉素G钾盐-D5、四环素-D6、喹乙醇-D4、阿莫西林-13C6和甲氧苄啶-D3；(2)富集净化：固相萃取依次用甲醇和等体积的超纯水活化固相萃取柱，将经步骤(1)处理过的样品过柱，控制样品过柱流速；富集完后，依次用超纯水和低浓度的甲醇淋洗固相萃取柱，并真空干燥固相萃取柱；最后用甲醇洗脱固相萃取柱，经氮吹仪吹干，获得残渣；将残渣用一定浓度的有机溶剂溶解、定容、超声、过滤后转移至小瓶，待测；(3)高效液相色谱串联质谱法测定水产养殖底泥中七类15种抗生素的含量采用内标法，用高效液相色谱串联质谱仪，定量检测水产养殖底泥中七类15种抗生素；所述的15种抗生素包括磺胺类、喹诺酮类、四环素类、β-内酰胺类、硝基呋喃类、甲氧苄啶、喹乙醇这七类抗生素；15种抗生素分别为磺胺嘧啶SD、磺胺甲基嘧啶SM1、磺胺二甲基嘧啶SM2、磺胺间二甲氧基嘧啶SDM、磺胺甲噁唑SMX、甲氧苄啶TMP、恩诺沙星ENR、环丙沙星CIP、诺氟沙星NOR、呋喃唑酮AOZ、金霉素CTC、土霉素OTC、盐酸多西环素DOX、阿莫西林AMZ、喹乙醇OLA。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，微波萃取前分别加入100ng的磺胺甲噁唑-13C6、诺氟沙星-D5、青霉素G钾盐-D5、四环素-D6、喹乙醇-D4、阿莫西林-13C6和甲氧苄啶-D3这七种内标物指示回收率。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的提取溶剂，是乙腈:磷酸盐缓冲液体积比为1:1的乙腈与磷酸盐缓冲液的混合溶液；采用CEMMARSCLASSIC型微波萃取仪进行萃取，提取底泥中的抗生素；底泥样品过滤所用的筛网为孔径0.25mm的筛网；微波萃取后过滤提取液所用的玻璃纤维滤膜孔径为0.45μm、0.47μm或0.7μm；稀释后的样品pH值调至3-4。4.根据权利要求1或2所述的方...
【专利技术属性】
技术研发人员：胡双庆，沈根祥，张洪昌，郭春霞，钱晓雍，李贞金，汪仙仙，王真，
申请(专利权)人：上海市环境科学研究院，
类型：发明
国别省市：上海,31
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