一种重楼皂苷VII的新用途制造技术

本发明专利技术公开的一种重楼皂苷VII的新用途，对乳腺癌细胞株和小鼠移植瘤的生长均具有良好的抑制作用，能够诱导乳腺癌细胞发生凋亡。重楼皂苷VII抗乳腺癌活性高且作用明确，同时可配以临床上接受的赋形剂，制备成口服剂型(片剂，酊剂，可分散性粉剂，颗粒剂，乳剂，糖浆剂，硬胶囊，软胶囊等)或者非口服剂型(注射剂，喷雾剂，贴剂等)用于乳腺癌的治疗。

【技术实现步骤摘要】
一种重楼皂苷VII的新用途
本专利技术属于药学
，涉及一种重楼皂苷VII的新用途。
技术介绍
乳腺癌是威胁妇女健康的常见恶性肿瘤之一，发病率居女性恶性肿瘤首位，且呈逐年上升趋势。在我国，乳腺癌的发病率增长速度高出西方国家1到2个百分点，仅2003-2009年间中国城市乳腺癌死亡率增长了38.91％。根据《2015中国癌症统计数据》结果提示，乳腺癌的发病率(10万分之272.4)和死亡率(10万分之70.7)均处在较高水平，成为45岁以下女性最主要的癌症致死原因。对于乳腺癌患者而言，病变发展到晚期，约50％乳腺癌会发生转移扩散，导致骨、肺、局部淋巴结、肝脏和大脑等多处病变，乳腺癌的转移部位与原发部位在细胞属性上存在明显差异，会对原发性乳腺癌的治疗方案产生抵抗，导致肿瘤治疗预后效果差且容易复发，成为治疗失败的重要原因。在中医理论指导下，中药抗肿瘤研究近年来进步较快，在抗乳腺癌方面已显示出独有特色，从中草药中寻找适宜的抗乳腺癌药物是一大趋势。重楼为百合科植物云南重楼ParispolyphyllaSmithvar.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz.和七叶一枝花ParispolyphyllaSmithvar.chinensis(Franch.)Hara的干燥根茎，收载于2015版《中华人民共和国药典》(一部)，主产于四川、云南、陕西等地，为清热解毒类中药。在中医理论指导下，重楼已有上千年的应用历史，民间用于治疗疔疮痈肿等，目前临床常用于炎症、肿瘤的治疗。现已有楼莲胶囊、金复康口服液等几种复方成药在国内上市销售，它还是著名中成药云南白药、宫血宁胶囊等的主要组成药物。现代药理研究发现，重楼中发挥主要药效作用的是其中的甾体皂苷类成分，即重楼皂苷，重楼皂苷VII即为其中之一，目前，已发现重楼皂苷VII具有抗炎、抗肿瘤等生物活性，但重楼皂苷VII在抗乳腺癌中的应用目前尚未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种重楼皂苷VII的新用途，为提供重楼皂苷VII在治疗抗乳腺癌中新的药物用途。本专利技术所采用的技术方案是：一种重楼皂苷VII的新用途，重楼皂苷VII在制备治疗抗乳腺癌药物中的应用。本专利技术的特点还在于，重楼皂苷VII作为制备治疗抗乳腺癌药物组合物时的主药。重楼皂苷VII通过百合科植物滇重楼、七叶一枝花、延龄草中任一获取，作为制备抗乳腺癌药物组合物时的主药。重楼皂苷VII作为制备抗乳腺癌药药物组合物中主药的质量百分含量为0.1％～99.9％。本专利技术的有益效果是：本专利技术的一种重楼皂苷VII的新用途，对乳腺癌细胞株和小鼠移植瘤的生长均具有良好的抑制作用，能够诱导乳腺癌细胞发生凋亡。重楼皂苷VII抗乳腺癌活性高且作用明确，同时可配以临床上接受的赋形剂，制备成口服剂型(片剂，酊剂，可分散性粉剂，颗粒剂，乳剂，糖浆剂，硬胶囊，软胶囊等)或者非口服剂型(注射剂，喷雾剂，贴剂等)用于乳腺癌的治疗。附图说明图1是本专利技术一种重楼皂苷VII的新用途的重楼皂苷VII诱导乳腺癌细胞发生凋亡图；图2是图1中一种重楼皂苷VII的新用途的重楼皂苷VII诱导乳腺癌细胞发生凋亡比率图。具体实施方式下面结合具体实施方式对本专利技术进行详细说明。重楼皂苷VII，其化学结构为：重楼皂苷VII通过现有提取方法能够从百合科植物滇重楼、七叶一枝花、延龄草中任一一种获取，或通过化学合成途径获得。本专利技术提供了一种重楼皂苷VII的新用途，具体实验过程如下：实施例一重楼皂苷VII体外对乳腺癌细胞的生长抑制作用1、实验方法人乳腺癌细胞MCF-7、ZR-75-30、MDA-MB-231分别生长于含10％胎牛血清，100U/mL青霉素、100μg/mL链霉素的MEM培养基、RPMI-1640培养基、L-15培养基中，置于含5％CO2，37℃培养箱里培养。取对数生长期的细胞配制成5×104个/ml浓度细胞悬液，每孔100μL接种于96孔板中培养24小时，待细胞充分贴壁后，弃去原有培养基，加入由培养基配制成的不同浓度梯度的重楼皂苷VII，每孔100μL。37℃分别培养24、48、72小时，培养结束后每孔加入5mg/mL的MTT10μL继续培养4小时后弃去上清液，每孔加入DMSO150μL，微量振荡器振荡10分钟以充分溶解结晶物。利用酶标仪在492nm波长下测定各孔吸光值(A值)，按以下公式计算药物对肿瘤细胞体外增殖的抑制率(inhibitoryratio，IR)。IR(％)＝[A492(control)-A492(sample)]/[A492(control)-A492(blank)]×100％2、实验结果重楼皂苷VII作用三种不同的乳腺癌细胞株24、48、72小时后，有不同程度的细胞增殖抑制作用，且其生长抑制作用呈浓度依赖性，半数抑制浓度(IC50)如表1所示。表1重楼皂苷VII作用不同乳腺癌细胞株的IC50值实施例二重楼皂苷VII诱导乳腺癌细胞凋亡1、实验方法收集对数生长期的MCF-7、ZR-75-30、MDA-MB-231细胞，用不含EDTA的0.25％的胰酶消化，接种于6孔板，调整细胞数目为每孔1.0×105个，培养24小时，之后弃去培养基，加入重楼皂苷VII(浓度分别为12、10、36μmol/L)，处理细胞24小时。同时设置0h的AnnexinV-FITC和PI的单染孔做对照。24小时后，将细胞上清液转移至15ml离心管内，PBS洗涤2次，加入不含EDTA的胰酶消化细胞，之后转移至离心管中，加入培养基终止消化，500×g离心5min，去除上清液，滤纸倒扣滤干。用1mLPBS将细胞重悬后转移至1.5mlEP管中，轻轻吹打均匀后500×g离心5min。弃上清液，多余液体用滤纸条吸干。加入400μL1×BindingBuffer重悬细胞，再加入5μLAnnexinV-FITC轻轻混匀，室温避光孵育15min，之后加入10μLPI染液，轻轻混匀，冰浴避光孵育5min。重悬后，滤网过滤，用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。2、实验结果实验结果如图1所示，重楼皂苷VII诱导乳腺癌细胞发生凋亡；如图2所示则为重楼皂苷VII诱导乳腺癌细胞发生凋亡比率；其三种乳腺癌细胞株经重楼皂苷VII处理24小时后，均发生凋亡，与空白对照组相比具有显著性差异。实施例三重楼皂苷VII体内抗乳腺癌小鼠移植瘤实验1、实验方法取BALB/c小鼠，将动物分笼饲养，适应环境3天后开始实验。取对数生长期的小鼠4T1乳腺癌细胞，胰蛋白酶消化，离心，去上清，计数，生理盐水调细胞浓度至2×107个/ml，将细胞接种于小鼠右前肢腋窝皮下，0.1ml/只，并记为接种第1天。每隔2天记录移植瘤长径(a)、短径(b)，及小鼠体重，按下列公式计算肿瘤体积(V)，V＝a×b2/2。待肿瘤长至100mm3时，将动物随机分为4组，每组6只：(1)空白对照组：腹腔注射生理盐水，0.2ml/只；(2)环磷酰胺对照组：按20mg/kg腹腔注射环磷酰胺；(3)重楼皂苷VII低剂量组：按5mg/kg腹腔注射重楼皂苷VII；(4)重楼皂苷VII高剂量组：按10mg/kg腹腔注射重楼皂苷VII；各组均连续给药15天。停药次日，称重后，麻醉，处死小鼠。完整剥离肿瘤，去除血污、脂肪等非肿瘤组织，称瘤体重量，计算肿瘤生长抑制本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种重楼皂苷VII的新用途，其特征在于，重楼皂苷VII作为制备治疗乳腺癌药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.一种重楼皂苷VII的新用途，其特征在于，重楼皂苷VII作为制备治疗乳腺癌药物中的应用。2.如权利要求1所述的一种重楼皂苷VII的新用途，其特征在于，所述药物含有重楼皂苷VII的制剂。3.如权利要求2所述的一种重楼皂苷VII的新用途，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：何昊，许畅，徐玥，成昭，郑蕾，
申请(专利权)人：西安医学院，
类型：发明
国别省市：陕西,61